Diagnóstico diferencial das anemias microcíticas e hipocrômicas / Differential diagnosis of microcytic and hypochromic anemia

Anemias microcíticas e hipocrômicas são resultantes de várias condições patológicas. Por serem as mais prevalentes na população brasileira, muitas vezes o diagnóstico clínico depende dos resultados das análises laboratoriais. Em muitos casos há a necessidade da utilização de técnicas específicas para determinar se esta anemia se deve à deficiência de ferro ou aos diferentes tipos de talassemia. O presente trabalho mostra as principais aplicações técnicas no diagnóstico diferencial das anemias microcíticas e hipocrômicas.

Microcytic and hypochromic anemia are the results of several pathologic conditions. They are the most prevalent forms of anemia in the Brazilian population, and frequently the clinical diagnosis depends on the laboratorial analysis. In many cases it is necessary to use specific techniques to determine if this anemia is due to iron defficiency or different types of thalassemia. This article shows the main technical applications used for differential diagnosis of microcytic and hypochromic anemia.

Transferrin saturation as a possible marker of hematological recovery after hematopoietic stem cell transplantation: [letter to the editor]

Alterações no perfil de ferro já foram descritas em pacientes submetidos à quimioterapia de altas doses com transplante de células precursoras hematopoiéticas (TCPH), e uma possível relação entre o metabolismo do ferro e a reconstituição hematopoiética pós-transplante, embora proposta, ainda carece de confirmação. Com o objetivo de avaliar as alterações do perfil de ferro e a sua correlação com a recuperação hematológica pós-TCPH, foram determinados a saturação da transferrina (ST), ferro e ferritina séricos em 21 pacientes submetidos a TCPH, antes do transplante e prospectivamente no dia 0, no dia +14 e no dia +180. Após a quimioterapia de altas doses, todos os parâmetros analisados se elevaram acentuadamente no dia 0 e permaneceram ainda alterados no dia +14; após 180 dias, observou-se uma tendência de retorno para valores próximos aos obtidos antes do transplante. No dia +14, os valores de ST apresentaram forte correlação inversa com a contagem absoluta de leucócitos (p<0,0001) e de reticulócitos (p<0,05), e uma correlação direta com o tempo de enxertia (p<0,0001). Nossos resultados demonstram que o perfil de ferro se altera de forma aguda e significativa após a quimioterapia de altas doses com TCPH e que tais alterações estão aparentemente correlacionadas com a atividade hematopoiética após o transplante.

Dificuldades no diagnóstico laboratorial das hemoglobinopatias / Dificulties on the laboratorial diagnosis of hemoglobinopathies

Há vários tipos de hemoglobinopatias que são caracterizados por variantes das hemoglobinas anormais (ex: Hb S, Hb C, Hb Instáveis,etc) e por talassemias (ex: tal. alfa, tal. beta, tal.beta/delta,etc) As hemoglobinopatias são consideradas como uma das doenças genéticas mais comuns em todo o mundo, com prevalência de portadores heterozigotos de seus principais tipos em aproximadamente 5 por cento da população mundial. Devido à heterogenidade clínica e genética dessas alterações genéticas é fundamental estabelecer a investigação laboratorial das diferentes formas de hemoglobinas variantes e de talassemias. Este artigo apresenta as principais dificuldades laboratoriais que envolvem a complexidade molecular das hemoglobinopatias.

There are various types of hemoglobinopathies that are characterized by variants of abnormal hemoglobins (eg. Hb S, HbC, unstables Hb, etc.) and thalassemias (eg. alpha, beta, beta/delta, etc.). Hemoglobinopathies account for some of the most common single gene disorders worldwide with at least 5 percent of the world's population having one or more serious genetic abnormalities. Because of the clinical and genetic heterogenity of these disorders, a laboratory investigation is fundamental to establish the diagnosis of the different variants of the abnormal hemoglobinopathies and thalassemias. This article reports on the laboratory diagnostic difficulties caused by molecular complexity of these abnormalities.

Prevalência de talassemias e hemoglobinas variantes no estado de Goiás, Brasil / Prevalence of thalassemias and variant hemoglobins in the state of Goiás, Brazil

As anemias hereditárias, em especial as talassemias e hemoglobinas (Hb) variantes, são as mais comuns das alterações genéticas humanas; sua frequência na população brasileira é muito variável, dependendo dos grupos raciais formadores de cada região. O povoamento de Goiás, que teve início logo após o seu descobrimento, em 1726, motivado pela procura de ouro, foi composto principalmente por portugueses e escravos africanos, contexto que favoreceu a mestiçagem entre eles. Considerando que esses povos apresentam genes para as hemoglobinas anormais com frequências variadas, é esperado que se encontrem essas alterações genéticas na nossa população. O objetivo deste trabalho foi avaliar a a prevalência de talassemias e hemoglobinas variantes na população de Goiás. Para isso a casuística foi composta por 404 alunos participantes dos diversos cursos da Universidade Católica de Goiás (UCG), oriundos de 55 cidades do estado de Goiás. A prevalência de anemia hereditária por talassemias e hemoglobinas variantes em Goiás foi de 10,1 por cento, cuja ordem decrescente foi a seguinte: talassemia alfa heterozigótica (5,2 por cento), heterozigose para hemoglobina S (Hb AS) (2,2 por cento), heterozigose para hemoglobina C (Hb AC) (1 por cento), talassemia beta menor (0,7 por cento), associa��o entre talassemia alfa e heterozigose para Hb S (0,5 por cento), associação entre talassemia alfa e heterozigose para Hb C (0,3 por cento) e heterozigose para hemoglobina D (Hb AD) (0,3 por cento). Nenhum caso de homozigose foi encontrado no presente estudo. Este trabalho demonstrou a dispersão dos genes para Hb S, Hb C e Hb D, bem como de talassemias alfa e beta em uma população do estado de Goiás. Por essa razão, concluímos que é importante realizar programas com maior abrangência da população para estudo da epidemiologia das talassemias e hemoglobinas variantes no estado de Goiás.

The hereditary anemias, especially the thalassemies and hemoglobinopathies are the most common human genetic abnormalities. Their frequency in the Brazilian population is very variable depending on the racial groups typical of each region. The settlement of Goiás, that had its beginning after discovery in 1726 owing to the search for gold, was composed basically by Portuguese and African slaves, a context that favored the racial mixing among them. Considering that these groups present genes for abnormal hemoglobins with varied frequencies it is expected the finding of these genetic abnormalities within our population. The objective of this study was to evaluate the prevalence of thalassemies and variant hemoglobins in the population of Goiás. For this purpose the sample was composed by 404 participating students from several graduate courses of the Catholic University of Goiás originally from 55 cities of the state of Goiás. Laboratory tests were used taking into account the historical and demographic factors of the population. The prevalence of hereditary anemias by thalassemias and variant hemoglobins in Goiás was 10.1 percent, in which the decreasing order of these abnormalities was: alfa heterozygous thalassemy (5.2 percent); heterozygous hemoglobin S (Hb AS) (2.2 percent); heterozygous hemoglobin C (Hb AC) (1 percent); beta short thalassemy (0.7 percent); association between alpha thalassemy and heterozygous for hemoglobin S (0.5 percent); association between alpha thalassemy and heterozygous for hemoglobin C (0.3 percent); and heterozygous for hemoglobin D (0.3 percent). No homozygosity was found in the study group. This study demonstrates the need for large scale screening in human populations for epidemiological studies of the thalassemies and variant hemoglobins in the state of Goiás.

Avaliação laboratorial da toxicidade molecular em eritrócitos talassêmicos / Laboratorial evaluation of molecular toxicity in thalassemic erythrocytes

Oxygen-derived free radical damage is associated with the molecular toxicity of hemoglobin. Especially in thalassemia syndromes, this toxicity has a relationship with "free" alpha globin concentrations. This study of beta thalassemia trait blood samples from 39 individuals shows that the evaluation of methemoglobin is a sensitive method of indicating molecular toxicity and the superoxide dismutase concentration revealing the intensity of oxidative stress of this process.

Avaliação dos produtos da degradação oxidativa da Hb S nos genótipos SS, SF (S/beta0 talassemia) e AS, em comparação com hemoglobinas normais / Evaluation of the products from oxidative damage of Hb S in SS, SF (S/beta0 thalassemia) and AS genotypes compared to normal hemoglobins

A doença falciforme é um termo genérico usado para determinar um grupo de alterações genéticas caracterizadas pelo predomínio de hemoglobina (Hb) S. Os principais genótipos que compõem o grupo de doença falciforme são os seguintes: SS, SF [S/beta0 talassemia e S/persistência hereditária de Hb fetal (PHHF)], SFA (S/beta+ talassemia), SC, SD e SH (S/alfa talassemia). O presente trabalho analisa os resultados das avaliações de produtos provenientes da oxidação da Hb S, identificados pela concentração da metemoglobina e de eritrócitos com corpos de Heinz em dois genótipos da doença falciforme (SS e S/beta0 talassemia) e no traço falcêmico (AS), em comparação com o genótipo normal (AA). A análise dos produtos da degradação oxidativa da hemoglobina, evidenciados pelo aumento dos valores das médias referentes à concentração de metemoglobina e do número de eritrócitos com corpos de Heinz, está diretamente relacionada com o aumento da concentração da Hb S. Assim, a degradação oxidativa da hemoglobina decresce entre os genótipos estudados da seguinte forma: SS>SF>AS>AA. É importante destacar que as análises indicaram que a simples presença de Hb S no eritrócito, como é o caso do genótipo AS, é capaz de causar elevação da concentração de metemoglobina em 52,62% das amostras analisadas e de induzir a precipitação de corpos de Heinz em 73,68% dos casos estudados. Explicações referentes aos processos oxidativos e redutores das hemoglobinas estudadas são apresentados no texto. Destaca-se, entre os resultados apresentados, a identificação por meio de eletroforese em agarose alcalina da fração de globina alfa-livre em todas as amostras do genótipo SF provenientes de pessoas com Hb S/beta0 talassemia. É proposto um esquema para explicar a origem da globina alfa-livre, especialmente para o genótipo S/beta0 talassemia, e a importância da sua identificação no diagnóstico laboratorial de Hb S/beta0 talassemia.

Sickle cell disease is a generic term used to determine a group of genetic alterations characterized by a dominance of Hb S. The main genotypes which compose the sickle cell disease group are as follows: SS, SF (S/b0 thalassemia and S/Hereditary Persistence of Fetal Hemoglobin or HPFH), SFA (S/b+ thalassemia), SC, SD and SH (S/a thalassemia). This study analyzes the products resulting from the oxidization of hemoglobin, identified by the methemoglobin concentration and by red blood cells with Heinz bodies, in two sickle cell genotypes (SS and S/b0 thalassemia) and in the sickle cell trait (AS) compared with the normal genotype (AA). Analysis of the products resulting from hemoglobin oxidative damage, characterized by an increase in the mean levels of methemoglobin and of the number of red blood cells with Heinz bodies, which are directly related to the increase in the Hb S concentration. Thus, oxidative damage of hemoglobin diminishes among the studied genotypes in the following manner: SS>SF>AS>AA. It is important to stress that these results indicate that the simple presence of Hb S in the red blood cell, as in the AS genotype, is capable of increasing the methemoglobin concentration in 52.62% of the assessed samples and inducing the precipitation of Heinz bodies in 73.68% of cases. Elucidation of the oxidative and reductive processes of the studied hemoglobins is presented in the paper. Highlighted among the presented results is the identification, by means of alkaline agarose gel electrophoresis, of the free alpha globin fraction in all SF genotype samples originating from Hb S/b0 thalassemia individuals. A hypothesis to explain the origin of free alpha globin, especially in the S/b0 thalassemia genotype is proposed, as is the importance of its identification in the laboratorial diagnosis of S/b0 thalassemia.

Dosagem espectrométrica de metaemoglobina sem interferentes químicos ou enzimáticos / Spectrometric measurement of methemoglobin without interference of chemical or enzymatic reagents

Os autores apresentam uma nova técnica para dosagem de metaemoglobina em relação à oxiemoglobina, sem interferentes químicos ou enzimáticos. A base metodológica da técnica proposta se fundamenta nos valores reais de metaemoglobina circulante no sangue. Para a determinação quantitativa da metaemoglobina em relação à oxiemoglobina circulantes procedeu-se à hemólise do sangue total e à estabilização desses dois produtos em tampão fosfato M/60 (ou 60 mol L-1) pH 6,8. Os valores de metaemoglobina e oxiemoglobina foram obtidos de suas absorções espectrofotométricas em 630 nm e 540 nm. A técnica proposta foi comparada com a de Evelyn e Malloy, cuja metodologia avalia subprodutos heme-estruturais de hemoglobinas tratados com soluções de ferricianeto e cianeto de potássio. A presente técnica tem a vantagem de dispensar interferentes químicos ou enzimáticos, sem risco tóxico. Os valores obtidos da padronização revelaram que o grau de normalidade variou entre 1,9 por cento e 3,8 por cento.

Prevalência e controle da hemoglobina S / Prevalence and control of hemoglobin S

A heterogênea distribuição regional do gene hr na população brasileira se deve a dois fatores básicos: a sua introdução predominantemente por negros africanos, em regiões especíjicas, durante a nossa colonização e aosprocessos de miscigenação racial, que ocomm com intensidades variáveis nas diversas regiões dopak. Os estudos realizados em nosso laboratório com 101 mil amostras de sangue de 65 cidades de todas as regiões brasileiras, mostraram que a prevalência do gene bS é maior na região norte (4,49%) e decresce gradativamente em direção ao sul: nordeste (4,05%), centro-oeste (3,110/0), sudeste (1,87%] e sul (1,87%), na amostra total (negros e brancos). Quando consideramos apenas o grupo de negros a prevalência é quase homogênea entre as qiões, com variações entre 4,03 e 554%. A prevalência específica entre 15 estados brasileiros mostrou que na população geral, a Bahia foi o que apresentou maior prevalência (5,48%, seguido de Alagoas (4,83%), Piauí (4,77%) e Pará (4,40%). Com relação a faixa etária verij?cou-se diminuição da prevalência do gene bS com o aumento da idade, sugerindo que fatores como miséria social e econômica podem contribuir com a morbilidade e mortalidade dosindivíduos com Hb AS. A relação entre a origem de sobrenomes e os portadores de Hb S, mostra que o gene b é muito comum entre os indivíduos com sobrenomes de origem ibérica (69,,33%), seguindo os de origem religiosa (11,78%), itálica (10,43%]e outras origens (8,42%). Tais dados evidenciam que a miscigenação entreos portugueses e seus descendentes com os escravos negros foi muito intensa.

The heterogeneous regional distribution of the pS gene in our population is due to two basic factors: its introduction, mainly by African Negroes, in specific regions, during our colonization, and to the processes of racial miscegenation, which occurred with variable intensities in the severa1 regions of the county. This study performed with 101 thousand blood samples carried out from 65 cities of a11 Brafilian regions, showed that theprevalence of the P gene on the totalpopulation (white + Negroes) is higher in the north region (4.49%) and decrease in toward to the south (1 37%). Among Negroes the preualence is almost homogenous in a11 the regions, with variations between 4.03% and 5.54%. The specffic preualence on the Brazilian states studied, showed that the Bahia is the most prevalent (5.48%) followed by Alagoas (4.83%1, Piaui (4.77%) and Pará (4.40%). The distribution of carriers of Hb AS by ageshowed that in the general there is a decrease among older indiuiduals, and these results suggest that other factors, such as social and economical poverty can contribute to the morbidity and mortality of the indiuiduals with Hb AS, determining the damaging effects of theS fl gene in the heterozygotes. The relationship between the surnames and Hb S carriers shows that the gene flS is very common among Iberian origin (69.33%), followed by those of religious origin (I I. 78%), Italic (10.43%) and other origins (8.43%). These data show that miscegenation between the Portuguese and their descendents withAfrican Negroes was vey intense.

Doença falciforme no Brasil. Origem, genótipo, haplótipos e distibuiçäo geográfica / Sickle cell disease in Brazil. Origin, genotypes, haplotypes and geographic distribution

A doença falciforme é a mais comum das alteraçöes hematológicas hereditárias conhecida no homem. Sua distribuiçäo no mundo afeta principalmente os negros da África e da América do Norte, bem como algumas populaçöes latinas. É estimado que no Brasil haja cerca de 7 milhöes de portadores säo do gene ßs, e cerca de 10 mil com doenças falciformes. Com o avanço no estudo de técnicas de DNA, tem sido muito fácil investigar a base molecular desta alteraçäo genética, e conhecer sua origem e distribuiçäo a partir da África. Por meio de análises de haplótipos do gene ßs, tem sido possível conhecer a origem desse gene no Brasil, e a prevalência dos haplótipos Banto e Benin

Radicais livres em eritrócitos falcêmicos e talassêmicos / Free radicals in erythrocytes in sickle cell anemia and thalassemia

Radicais livres derivados de espécies ativadas de oxigênio estao associados a lesoes citológicas, que diminuem a sobrevida dos eritrócitos, especialmente quando contêm defeitos congênitos, como sao os casos da anemia falciforme e da talassemia maior. As atividades antioxidantes dos eritrócitos dependem de três tipos de enzimas: superóxido dismutase, catalase e glutatiao peroxidase. Entretanto, as atividades antioxidantes podem ser ineficazes em situaçoes em que ocorrem o comprometimento dos hidroxiperóxidos da membrana eritrocitária, devido às células falciformes irreversíveis e à ligaçao de hemicromos à membrana dos eritrócitos talassêmicos.

Prevalência de hemoglobinopatias em amostras de proveniência diferenciada / Prevalence of hemoglobinopathies in samples from different origen

Os autores analisaram as prevalências de hemoglobinas anormais variantes e talassemias, em amostras de diferentes proveniências (escolares, crianças de creches, jovens do tiro de guerra, usuários de postos de saúde, e pessoas com anemia a esclarecer) das cidades de Araçatuba, Barretos e Säo José do Rio Preto, SP, Brasil. Os resultados mostraram que há diferenças de prevalências, com significância estatística, apenas no grupo composto por pacientes com anemia a esclarecer. Os autores sugerem alguns requisitos fundamentais para a escolha da populaçäo ideal para estudos de prevalências de hemoglobinopatias

Traço falcêmico associado à hemoglobinúria noturna paroxística / Sickling trace associate with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria

Os autores apresentam um caso de falcemia heterozigota (Hb AS) associada a hemoglobinúria noturna paroxística (HNP). Várias patologias podem estar associadas com HNP; nesses ultimos cinco anos a literatura científica relatou apenas um caso de associaçäo entre HNP e hemoglobinopatia - a Hb SS. O caso estudado apresentou anemia grave, pancitopenia, hemoglobinúria e medula hipocelular que mostrou-se responsiva ao ácido fólico. O quadro laboratorial se destaca pela anemia grave (Hb: 5,2 g/dl), hipoferremia, testes de Ham e da glicose positivos, e presença de Hb AS

Prevalências de talassemia alfa em pacientes com anemia e em pessoas sem anemia / Prevalence of alpha thalassemia in patients with anemia and in individuals without anemia

Foram analisadas amostras de sangue de 400 pessoas residentes em Säo José do Rio Preto. Desse total, 195 foram obtidas de pacientes com anemia sem causa definida e 205 de indivíduos aparentemente sadios. O diagnóstico de talassemia alfa foi realizado por meio da pesquisa citológica de agregados intra-eritrocitários de Hb H. Esse teste indicou que, no grupo de pacientes com anemia sem causa definida, 15,89% tinham talassemia alfa. No grupos controle, composto por pessoas aparentemente sadias, 3,90% eram portadoras de talassemia alfa. A avaliaçäo hematimétrica constituída por contagem de eritrócitos, hematócrito, hemoglobina e índices hematimétricos, mostraram que os portadores de talassemia alfa apresentavam diferenças quantitativas em comparaçäo com o grupo de controle. Alteraçöes na morfologia eritrocitária foram observadas em 48% dos portadores de talassemia alfa extraídos do grupo de pacientes com anemia, enquanto que entre aqueles diagnosticados no grupo controle, 25% apresentavam modificaçöes na morfologia eritrocitária. Os valores de Hb A2 e Hb Fetal näo apresentaram diferenças importantes entre os grupos estudados

Hemoglobinas anormais no Brasil: prevalência e distribuiçäo geográfica / Abnormal hemoglobins in Brazil: prevalence and geographic distribution

Foi realizado um estudo de hemoglobinas anormais entre habitantes do Brasil. Foram utilizadas amostras de sangue de 55.217 indivíduos provenientes de centros de saúde, escolas e bancos de sangue de 40 cidades, e analisadas no período de 1978 a 1985. Para efetuar as análises, os indivíduos foram divididos em grupos (características raciais e por classe etária); 42.768 foram classificados como "caucasóides" e 12.449 como "negróides", incluindo nesta última categoria os mulatos escuros e claros. Foram usadas técnicas eletroforéticas para determinar a presença das hemoglobinas dos tipos S e C, de alfa e beta talassemias e formas raras dessas proteínas. Estudos de cadeias polipeptídicas e mapeamento peptídico foram aplicados para caracterizar variantes raras. Os diagnósticos de alfa e beta talassemias foram realizados de acordo com as normas estabelecidas pela Organizaçäo Mundial da Saúde. Pelos procedimentos utilizados foram detectadas hemoglobinas anormais em 1.703 (3.08%) dos indivíduos estudados. Desse total 1.378 eram variantes moleculares específicas (1.068 variantes do tipo S, 245 do tipo C, e 65 de formas raras), 291 talassemias e 34 meta-hemoglobinemias. A prevalência das hemoglobinas anormais foi maior entre os negróides em 34 das 40 cidades estudadas. Entre os caucasóides a maior prevalência ocorreu em Valença (BA) e foi de 8.31%, enquanto entre os negróides foi em Säo José dos Campos (SP) com 15.38%. De uma forma geral, na populaçäo caucasóide a faixa de prevalência mais freqüente foi de 1 a 5%, e ocorreu em 36 cidades, enquanto que entre os negróides a faixa mais freqüente foi de 5 a 10% e ocorreu em 19 cidades. Os métodos utilizados permitiram identificar 21 genótipos de hemoglobinas anormais, sendo 13 de variantes moleculares e 8 de talassemias. Entre os genótipos das variantes moleculares, 8 foram considerados raros, e um deles (Hb N Baltimore) näo havia sido encontrado anteriormente na populaçäo brasileira...

"Você tem anemia hereditária?": resultados do programa de conscientizaçäo e detecçäo de hemoglobinas anormais em escolares de Säo José do Rio Preto, SP (Brasil) / \"Do you have hereditary anemia?\": results of the conscientization and detection of abnormal hemoglobins program in school children of Säo Jofé do Rio Preto, SP (Brazil)

O programa de investigaçäo populacional denominado Você tem anemia hereditária?, que teve o objetivo de conscientizar e detectar hemoglobinas na populaçäo escolar de Säo José do Rio Preto, SP, iniciou-se em abril de 1983 e finalizou-se em dezembro de 1984. A metodologia aplicada se desenvolveu em cinco fases: 1) programaçäo de atividades e seleçäo das escolas; 2) conscientizaçäo do programa aos professores e escolares; 3) coleta das amostras de sangue; 4) análises laboratoriais; 5) comunicaçäo dos resultados; 6) reuniöes de esclarecimento aos pais ou responsáveis dos portadores de hemoglobinas anormais. Foram analisados e conscientizados 10.367 escolares provenientes de 22 instituiçöes de ensino de primeiro e segundo graus e universitários. Desse total resultou que 178 indivíduos (ou 1,71%) tinham hemoglobinas anormais, classificadas em variantes moleculares (1,13%) e talassemias (0,58%). Em termos gerais, 96,06% do total de hemoglobinas anormais foram classificadas como potencialmente patológicas. As reuniöes de esclarecimentos para os portadores de hemoglobinas anormais e seus familiares atraíram 356 pessoas. Da análise dos 205 familiares, 74 (ou 36,09%) apresentaram hemoglobinas anormais. O presente programa detectou, portanto, um total de 252 portadores de anemias hereditárias causadas por hemoglobinas anormais. O trabalho apresenta descriçäo completa da metodologia utilizada e dos resultados obtidos e análise, entre outros aspectos da inter-relaçäo genética, hematológica e social, dando ênfase à necessidade da continuaçäo e ampliaçäo do programa, pela importância que representa para a saúde pública da populaçäo brasileira