Ocorrência de Babesia sp, Ehrlichia canis e Hepatozoon canis em cães domiciliados, em dois municípios do estado do Espírito Santo - Brasil / Occurrence of Babesia sp, Ehrlichia canis and Hepatozoon canis in domiciled dogs in two municipalities of the state of Espírito Santo - Brazil / Ocurrencia de Babesia sp, Ehrlichia canis y Hepatozoon canis em perros domiciliados em dos municipios del estado de Espírito Santo - Brasil

As doenças transmitidas por carrapatos são afecções de grande importância na clínica médica de pequenos animais, devido à alta casuística e ampla distribuição vetorial no território brasileiro. Os principais agentes responsáveis pelas infecções em cães são Babesia sp., Ehrlichia canis e Hepatozoon canis. Os animais infectados são assintomáticos ou apresentam sinais clínicos inespecíficos, sendo necessário a utilização de testes diagnósticos para definição do agente etiológico, e diagnóstico seguro. O objetivo do presente estudo foi determinar a ocorrência desses micro-organismos em cães naturalmente infectados, domiciliados nos municípios de Vila Velha e Anchieta, Espírito Santo, utilizando diferentes testes de detecção: Reação em cadeia polimerase (PCR), sorologia para detecção de anticorpos anti Ehrlichia canis e pesquisa de hematozoários em esfregaço sanguíneo. Foram analisadas 65 amostras de sangue obtidas por venopunção de veia cefálica de cães. No teste de PCR, 4,62% dos animais foram positivos para Babesia vogeli e 1,54% para Ehrlichia canis sendo os resultados para Hepatozoon canis negativos. No teste sorológico para E. canis 90,77% dos animais foram positivos para a presença de anticorpos, e na pesquisa em lâminas de esfregaço sanguíneo 3,02% apresentavam outros hemoparasitas. Os resultados indicam a dispersão desses hemoparasitas na população canina da região de estudo, entretanto com baixa ocorrência. O teste de PCR demonstrou-se como o mais sensível no qual Babesia vogeli foi o agente mais observado.(AU)

Tick-borne diseases are diseases of great importance in the medical practice of small animals, due to the high casuistry and wide vectorial distribution in the Brazilian territory. The main agents responsible for infections in dogs are Babesia sp., Ehrlichia canis and Hepatozoon canis. Infected animals are asymptomatic or present nonspecific clinical signs, requiring the use of diagnostic tests to define the etiologic agent, and safe diagnosis. The objective of the present study was to determine the occurrence of these microorganisms in naturally infected dogs domiciled in the municipalities of Vila Velha and Anchieta, Espírito Santo, using different detection tests: polymerase chain reaction (PCR), serology to detect antibodies against Ehrlichia canis and research of hematozoa in blood smears. Sixty-five blood samples obtained by venipuncture of the cephalic vein of dogs were analyzed. In the PCR test, 4.62% of the animals were positive for Babesia vogeli and 1.54% for Ehrlichia canis, and the results for Hepatozoon canis were negative. In the serological test for E. canis, 90.77% of the animals were positive for the presence of antibodies, and in the research in blood smear slides, 3.02% presented other hemoparasites. The results indicate the dispersion of these hemoparasites in the canine population of the study region, however with low occurrence. The PCR test proved to be the most sensitive, in which Babesia vogeli was the most observed agent.(AU)

Las enfermedades transmitidas por garrapatas son enfermedades de gran importancia en la práctica médica de los pequeños animales, debido a la alta casuística y amplia distribución vectorial en el territorio brasileño. Los principales agentes responsables de las infecciones en los perros son Babesia sp., Ehrlichia canis y Hepatozoon canis. Los animales infectados son asintomáticos o presentan signos clínicos inespecíficos, siendo necesario el uso de pruebas diagnósticas para la definición del agente etiológico, y el diagnóstico seguro. El objetivo del presente estudio fue determinar la ocurrencia de estos microorganismos en perros infectados naturalmente, domiciliados en los municipios de Vila Velha y Anchieta, Espírito Santo, utilizando diferentes pruebas de detección: reacción en cadena de la polimerasa (PCR), serología para detectar anticuerpos anti Ehrlichia canis e investigación de hematozoos en frotis de sangre. Se analizaron sesenta y cinco muestras de sangre obtenidas por venopunción de la vena cefálica de los perros. En la prueba PCR, el 4,62% de los animales fueron positivos para Babesia vogeli y el 1,54% para Ehrlichia canis, y los resultados para Hepatozoon canis fueron negativos. En la prueba serológica para E. canis, el 90,77% de los animales fueron positivos a la presencia de anticuerpos, y en la investigación en láminas de frotis de sangre el 3,02% presentaron otros hemoparásitos. Los resultados indican la dispersión de estos hemoparásitos en la población canina de la región de estudio, aunque con una baja presencia. La prueba PCR resultó ser la más sensible, en la que Babesia vogeli fue el agente más observado.(AU)

Lynxacarus radovskyi (Acari: Listrophoridae) in a domestic cat from Espírito Santo, Brazil / Lynxacarus radovskyi (Acari: Listrophoridae) em gato doméstico no Espírito Santo, Brasil

Lynxacarus radovskyi is of uncommon occurrence and there are few reports in the state of Espírito Santo, Southeastern Brazil. The purpose of the present note is to record the occurrence of L. radovskyi in a Persian domestic cat in Vila Velha, Espírito Santo, Brazil. The animal was asymptomatic, without evidence of dermatological signs. The present report can be informative, once the lack of knowledge in relation to the ectoparasite presence and potential of spread in the regional cat population is constant in the veterinary medicine practice,may cause underreporting of infestations.

Lynxacarus radovskyi é de ocorrência incomum e existem poucos relatos no estado do Espírito Santo, Sudeste do Brasil. O objetivo do presente relato foi reportar a ocorrência de L. radovskyi em felino doméstico da raça Persa em Vila Velha, Espírito Santo, Brasil. O animal apresentava-se assintomático à infestação, sem evidências de alterações dermatológicas. Este relato pode ser informativo, uma vez que a falta de conhecimento em relação à presença e potencial disseminativo deste ectoparasito é constante na prática da Medicina Veterinária, podendo causar subnotificações das infestações.

Lynxacarus radovskyi (Acari: Listrophoridae) in a domestic cat from Espírito Santo, Brazil / Lynxacarus radovskyi (Acari: Listrophoridae) em gato doméstico no Espírito Santo, Brasil

Lynxacarus radovskyi is of uncommon occurrence and there are few reports in the state of Espírito Santo, Southeastern Brazil. The purpose of the present note is to record the occurrence of L. radovskyi in a Persian domestic cat in Vila Velha, Espírito Santo, Brazil. The animal was asymptomatic, without evidence of dermatological signs. The present report can be informative, once the lack of knowledge in relation to the ectoparasite presence and potential of spread in the regional cat population is constant in the veterinary medicine practice,may cause underreporting of infestations.

Lynxacarus radovskyi é de ocorrência incomum e existem poucos relatos no estado do Espírito Santo, Sudeste do Brasil. O objetivo do presente relato foi reportar a ocorrência de L. radovskyi em felino doméstico da raça Persa em Vila Velha, Espírito Santo, Brasil. O animal apresentava-se assintomático à infestação, sem evidências de alterações dermatológicas. Este relato pode ser informativo, uma vez que a falta de conhecimento em relação à presença e potencial disseminativo deste ectoparasito é constante na prática da Medicina Veterinária, podendo causar subnotificações das infestações.

Efficacy of a commercial fungal formulation containing Duddingtonia flagrans (Bioverm®) for controlling bovine gastrointestinal nematodes / Eficácia de uma formulação comercial contendo Duddingtonia flagrans (Bioverm®) no controle de nematódeos gastrintestinais de bovinos

Abstract Bioverm® (Duddingtonia flagrans) is a fungal formulation indicated for controlling gastrointestinal nematodes in ruminants and horses, which has recently been authorized for commercialization in Brazil. The objective was to determine the efficiency of Bioverm® against larvae of gastrointestinal nematodes after passage through the gastrointestinal tract of cattle. Twelve animals were used, divided into two groups. In the treated group, a single dose of 1 g of Bioverm® per 10 kg of live weight (containing 105 chlamydospores of D. flagrans) was provided for each animal. Fecal samples were obtained from the animals in each group at 12, 24, 36, 48, 60 and 72 hours after administration. In assay A, 2 g of feces were added to Petri dishes containing 2% agar-water medium. In assay B, coprocultures were performed. In both assays, the peak of larval predation occurred within 48 hours after administration of Bioverm®. In assay A, a significant larval reduction (P < 0.05) was seen at 48 h (88.2%). In assay B, significant reductions (P < 0.05) were seen at 36 h (43.7%) and 48 h (82.3%). Bioverm® showed high predatory capacity after passage through the gastrointestinal tract of cattle and was effective for controlling gastrointestinal nematodes.

Resumo O Bioverm® (Duddingtonia flagrans) é uma formulação fúngica indicada para o controle de nematódeos gastrintestinais de ruminantes e equídeos, recentemente autorizado para a comercialização no Brasil. Objetivou-se determinar a eficiência do Bioverm® contra larvas de nematódeos gastrintestinais após a passagem pelo trato gastrintestinal de bovinos. Foram utilizados doze bovinos divididos em dois grupos. No grupo tratado, foi fornecida, por animal, a dose única de 1g (105 clamidósporos de D. flagrans) do Bioverm® para cada 10 kg de peso vivo. Foram obtidas amostras fecais dos animais de cada grupo a partir de 12, 24, 36, 48, 60 e 72 horas após a administração. No ensaio A, 2g de fezes foram adicionadas em placas de Petri contendo meio ágar-água 2%. No ensaio B, foram realizadas coproculturas. Em ambos os ensaios, o pico de predação larval ocorreu em 48 horas após a administração do Bioverm®. No ensaio A, houve redução larval significativa (P<0,05) em 48h (88,2%). No ensaio B, as reduções significativas (P<0,05) ocorreram em 36h (43,7%) e 48h (82,3%). O Bioverm® apresentou elevada capacidade predatória após a passagem pelo trato gastrintestinal de bovinos, sendo eficaz no controle dos nematódeos gastrintestinais.

Rhabditis spp, in the Espírito Santo, State of Brazil and evaluation of biological control / Rhabditis spp, no Espírito Santo, estado do Brasil e avaliação do controle biológico

Abstract The objectives of this study were to describe occurrences of Rhabditis spp. causing parasitic otitis in dairy cattle of Gir breed in the state of Espírito Santo, southeastern Brazil, and to evaluate the biological control of this nematode using the nematophagous fungi Duddingtonia flagrans (AC001) and Monacrosporium thaumasium (NF34). After nematode detection and collection, three groups were formed: two groups that were treated, respectively, with the fungal isolates; and a control group, without fungus. The treatments were as follows: (a) Petri dishes containing the culture medium 2% water agar (WA) + 250 nematodes + AC001; (b) Petri dishes containing 2% WA + 250 nematodes + NF34; and (c) Petri dishes containing only 2% WA + 250 nematodes. After seven days at 27 °C the treatments with fungi were able to capture and destroy the nematodes, with percentages of 82.0% (AC001) and 39.0% (NF34) in relation to the control group. The results demonstrate the occurrence of Rhabditis spp. after animals physical examination and that there was efficacy of the in vitro predatory activity of both fungal isolates. Thus, these results are important because they can assist in future in vivo control of this nematode in cattle.

Resumo Os objetivos neste estudo foram descrever ocorrências do nematódeo Rhabditis spp., causando otite parasitária em bovinos leiteiros da raça Gir no estado do Espírito Santo, sudeste do Brasil, e avaliar o controle biológico desse nematódeo utilizando os fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001) e Monacrosporium thaumasium (NF34). Após a detecção e coleta dos nematódeos, três grupos foram formados: dois grupos que foram tratados com os isolados fúngicos, respectivamente; e um grupo controle, sem fungos. Os tratamentos foram os seguintes: (a) placas de Petri contendo o meio de cultura 2% ágar de água (WA) + 250 nematoides + AC001; (b) placas de Petri contendo 2% de WA + 250 nematoides + NF34; e (c) placas de contendo apenas 2% de nematódeos WA + 250. Após sete dias a 27 °C os tratamentos com fungos foram capazes de capturar e destruir os nematódeos, com porcentagens de 82,0% (AC001) e 39,0% (NF34) em relação ao grupo controle. Os resultados demonstram a ocorrência de Rhabditis spp., no Estado do Espírito Santo e a eficácia da atividade predatória in vitro dos isolados fúngicos utilizados. Assim, esses resultados são importantes, pois podem auxiliar no controle alternativo in vivo de Rhabditis spp. em bovinos com otite parasitária.

Predatory viability of the nematophagous fungus Duddingtonia flagrans on the infective larvae of gastrointestinal nematodes of sheep following storage and refrigeration / Viabilidade predatória do fungo nematófago Duddingtonia flagrans sobre larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos após armazenamento e refrigeração

The objective of this study was to evaluate the in vivo predatory viability of the nematophagous fungus, Duddingtonia flagrans, after storage (36 months) and refrigeration (2-8 °C). This viability was evaluated using the infective larvae of gastrointestinal nematodes of sheep in the Northeastern semi-arid region of Brazil. Sixteen Santa Inês sheep with negative counting of eggs per gram of feces (EPG) were divided into four experimental groups, each group comprised of four animals. The pellets were administered at the dose of 3 g/10 kg of live weight (20% fungal micelyum), and a single administration was performed for each animal. Group I was administered pellets that had been stored for 36 months; Group II, freshly produced pellets; Group III, freshly produced pellets that did not contain fungi; and Group IV, pellets were not administered, and this was the control group. Feces were collected for 5 days, every 24 h for analysis. There was a significant decrease in the number of infective larvae of sheep nematodes that received D. flagrans pellets in a sodium alginate matrix, 82% was observed for Group I and 71% for Group II, compared to the control group. It is therefore concluded that the fungus, D. flagrans, pelleted in sodium alginate matrix after 36 months of storage at 2-8 °C, showed efficacy in reducing the number of infective larvae of gastrointestinal nematodes of sheep. (AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade predatória in vivo do fungo nematófago Duddingtonia flagrans, após armazenamento (36 meses) e refrigeração (2-8 °C). Esta viabilidade foi avaliada utilizando larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos no semi-árido nordestino do Brasil. 16 ovinos Santa Inês com contagem negativa de ovos por grama de fezes (GEP) foram divididos em quatro grupos experimentais, compostos por quatro animais. Os péletes foram administrados na dose de 3 g/10 kg de peso vivo (20% de micélio fúngico), e uma única administração foi realizada para cada animal. Grupo I foi administrado péletes que foram armazenados por 36 meses; Grupo II, péletes recém-produzidos; Grupo III, péletes recém-produzidos que não continham fungos; e o Grupo IV, péletes não foram administrados, e este foi o grupo controle. As fezes foram coletadas por cinco dias, a cada 24 horas, para análise. Houve uma diminuição significativa no número de larvas infectantes de nematóides ovinos que receberam pellets de D. flagrans, 82% foi observado para o Grupo I e 71% para o Grupo II, comparado ao grupo controle. Conclui-se, portanto, que o fungo D. flagrans, peletizado em matriz de alginato de sódio após 36 meses de armazenamento a 2-8 °C, apresenta eficácia na redução do número de larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos.(AU)

Leporacarus gibbus (Acari: listrophoridae) in a naturally-infested domestic rabbit: first report of its occurrence in the state of Espírito Santo, Brazil / Leporacarus gibbus (Acari: listrophoridae) em um coelho doméstico naturalmente infestado: primeiro relato de sua ocorrência no estado do Espírito Santo, Brasil

This study aimed to report the first occurrence of Leporacarus gibbus in a domestic rabbit (Oryctolagus cuniculus) from the state of Espírito Santo, Brazil. The two-year-old male rabbit came from a rural area and was admitted to the Veterinary Hospital Professor Ricardo Alexandre Hippler with intense pruritus throughout the body, severe hair loss, crustal lesions on the outer surface of the ears, and desquamation mainly in the dorsal region. A skin scraping and trichogram were performed. In the microscopic evaluation of the hairs obtained from the dorsal region, mites with morphology compatible with L. gibbus were observed. Cheyletiella parasitovorax and Psoropotes cuniculi were also detected in the same region. Treatment with ivermectin (0.4 mg/kg) was prescribed with three applications every 14 days, over a period of six weeks. This report presents the first description of the occurrence of L. gibbus in the state of Espírito Santo concomitant with poly-infestation of C. parasitovorax and P. cuniculi, and it is hoped that this will provide a research tool for future work in the region.(AU)

Este trabalho teve como objetivo relatar a primeira ocorrência de Leporacarus gibbus em um coelho doméstico (Oryctolagus cuniculus) do estado do Espírito Santo, Brasil. O coelho macho de dois anos de idade veio de uma área rural e foi internado no Hospital Veterinário Professor Ricardo Alexandre Hippler com intenso prurido em todo o corpo, severa queda de cabelo, lesões crustais na superfície externa das orelhas e descamação principalmente na região dorsal. A raspagem da pele e o tricograma foram realizados. Na avaliação microscópica dos pêlos obtidos na região dorsal, observaram-se ácaros com morfologia compatível com L. gibbus. Cheyletiella parasitovorax e Psoropotes cuniculi também foram detectados na mesma região. O tratamento com ivermectina (0,4 mg / kg) foi prescrito com três aplicações a cada 14 dias, durante um período de seis semanas. Este relato apresenta a primeira descrição da ocorrência de L. gibbus no estado do Espírito Santo concomitante à poliinfestação de C. parasitovorax e P. cuniculi, e espera-se que esta seja uma ferramenta de pesquisa para futuros trabalhos na região.(AU)

Control of sheep gastrointestinal nematodes using the combination of Duddingtonia flagrans and Levamisole Hydrochloride 5% / Controle de nematódeos gastrintestinais de ovinos utilizando a combinação de Duddingtonia flagrans e Cloridrato de Levamisole 5%

Abstract The objective was to evaluate the action of D. flagrans pellets in association with Levamisole Hydrochloride 5% for controlling sheep gastrointestinal nematodes in the northeastern Brazil. Three groups of six sheep each were formed: group 1 received 3 g of the pellets (0.6 g of D. flagrans mycelium) for each 10 kg b.w., twice a week for six months, and deworming with Levamisole Hydrochloride 5% when EPG ≥ 1500; group 2 received a dosage of Levamisole Hydrochloride 5% when EPG ≥ 1500; and group 3 received 3 g of pellets without fungi for each 10 kg b.w., twice a week for six months. EPG counts, larval cultures, packed cell volume (PCV) and weighing were performed every 15 days; monthly, samples of grass from each paddock were collected. The mean EPG of the groups began to statistically differ from day 30 (p < 0.05). Group 1 required less deworming with Levamisole Hydrochloride 5% and showed superiority of PCV values ​​throughout the experiment (p < 0.05). There was a significant reduction (p < 0.05) in L3 recovery in the group 1 paddock from day 30 onwards. The use of D. flagrans pellets in association with Levamisole Hydrochloride 5% was effective for controlling gastrointestinal nematodes.

Resumo O objetivo foi avaliar a ação de péletes de Duddingtonia flagrans em associação ao Cloridrato de Levamisole 5% no controle de nematódeos gastrintestinais de ovinos no Nordeste do Brasil. Foram formados três grupos de seis animais cada: grupo 1 recebeu 3 g de péletes (0,6 g de micélio de D. flagrans) para cada 10 kg p.v., duaz vezes por semana durante seis meses, e vermifugações com Cloridrato de Levamisole 5% quando OPG > 1500; grupo 2 recebeu uma dosagem de Cloridrato de Levamisole 5% quando OPG ≥ 1500; e grupo 3 recebeu 3 g de péletes sem fungos para cada 10 kg de p.v., duas vezes por semana durante seis meses. Contagens de OPG, coproculturas, de volumes globulares (VG) e pesagens foram realizadas a cada 15 dias. Mensalmente, amostras de pasto de cada piquete eram coletadasa. A média de OPG dos grupos começou a diferir estatisticamente a partir do dia 30 (p < 0,05). O grupo 1 necessitou de menos vermifugações com Cloridrato de Levamisole 5% e demonstrou superioridade nos valores de VG durante todo o experimento (p < 0,05). Houve redução significativa (p < 0,05) nas L3 recuperadas no piquete do grupo 1 a partir do dia 30. Em conclusão, a utilização de péletes de D. flagrans em associação ao Cloridrato de Levamisole 5% foi eficaz no controle de nematódeos gastrintestinais de ovinos.

Predatory activity of Butlerius nematodes and nematophagous fungi against Haemonchus contortus infective larvae / Atividade predatória de nematóides Butlerius e fungos nematófagos contra larvas infectantes de Haemonchus contortus

Abstract The purpose of this study was to evaluate the predatory activity of the nematode Butlerius spp. and fungal isolates of Duddingtonia flagrans, Clonostachys rosea, Arthrobotrys musiformis and Trichoderma esau against H. contortus infective larvae (L3) in grass pots. Forty-eight plastic gardening pots containing 140 g of sterile soil were used. Panicum spp. grass seeds (200 mg) were sown into each pot and individually watered with 10 mL of tap water. Twelve days after seeding, the pots were randomly divided into 6 groups (n=8). Two thousand H. contortus infective larvae (L3) were added to each group. Additionally, the following treatments were established: Group 1 – 2000 Butlerius spp. larvae; group 2 – A. musiformis (1x107 conidia); group 3 – T. esau (1x107 conidia); group 4 – C. rosea (1x107 conidia), group 5 – D. flagrans (1x107conidia) and Group 6 – no biological controller (control group). The larval population of H. contortus exposed to Butlerius spp. was reduced by 61.9%. Population reductions of 90.4, 66.7, 61.9 and 85.7% were recorded in the pots containing A. musiformis, T. esau, C. rosea and D. flagrans, respectively. The results of this study indicate that the predatory nematode Butlerius spp. and the assessed fungi display an important predatory activity can be considered suitable potential biological control agents.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade predatória do nematoide Butlerius spp. e isolados fúngicos de Duddingtonia flagrans, Clonostachys rosea, Arthrobotrys musiformis e Trichoderma esau contra larvas infectantes (L3) de Haemonchus contortus em vasos plantados com Panicum spp. Foram utilizados quarenta e oito potes plásticos de jardinagem contendo 140 g de solo estéril, 200 mg de sementes de Panicum spp.. Cultivar colonião, foi semeado em cada vaso e, diariamente, molhados com 10 mL de água da torneira. Doze dias após, os vasos foram divididos em 6 grupos (n = 8), e duas mil L3 de H. contortus foram adicionadas a cada vaso. Foram estabelecidos os seguintes tratamentos: Grupo 1 - 2.000 larvas de Butlerius spp.; Grupo 2 - A. musiformis (1x107 conídios); grupo 3 - T. esau (1x107 conídios); grupo 4 - C. rosea (1x107 conídios); grupo 5 - D. flagrans (1x107conidia); e Grupo 6 – somente L3 de H. contortus que serviu como controle negativo. A população de L3 de H. contortus expostas a Butlerius spp. foi reduzida em 61,9%. Redução populacional de 90,4, 66,7, 61,9 e 85,7% foram observadas nos vasos contendo A. musiformis, T. esau, C. rosea e D. flagrans, respectivamente. Os resultados deste estudo indicaram que o nematoide Butlerius spp. e os fungos avaliados exibiram importante atividade predatória e podem ser considerados como agentes de controle biológico.

Nematicidal activity of Paecilomyces marquandii proteases on infective larvae of Ancylostoma spp

ABSTRACT The present study aimed to evaluate the action of Paecilomyces marquandii proteases on Ancylostoma spp L3. White halos in the zymogram confirmed the proteolytic action. Difference (p <0.01) between the number of L3 in the differents groups was found, with 41.4% of reduction of Ancylostoma spp. L3 before 24 hours.

Platynosomum fastosum in an asymptomatic cat in the state of Espírito Santo: first report

Platynosomum fastosum is a parasite that affects cats, and among these, domestic cats, especially those originating from areas with tropical and subtropical climates. It is the most common liver parasite of domestic cats and is usually located in the bile ducts and gall bladder, but may also be found in the small intestine and pancreas. Infection occurs through ingestion of geckos containing metacercariae, causing cholangitis in the bile ducts of domestic cats. The aim of this study was to report the occurrence of P. fastosum after necropsy of an asymptomatic domestic cat, with a history of sudden death, received at the Animal Pathology sector of the Ricardo Alexandre Hippler Veterinary Hospital, Espírito Santo, Brazil. In macroscopic examination adult specimens of P. fastosum were observed inside the visibly dilated bile ducts. The dilatation, the presence of parasites and papillary proliferations into the lumen of the ducts were confirmed by histopathological examination. Then, a cholangiohepatitis associated to P. fastosum infection was classified. This is the first report of the occurrence of P. fastosum in a domestic cat in the state of Espírito Santo

Producción de conidios y clamidosporas de los hongos Duddingtonia flagrans y Monacrosporium thaumasium en diferentes medios sólidos / Produção de conídios e clamidósporos de Dunddingtonia flagrans e Monacrosporium thaumasium em diferentes meios sólidos / Production of conidia and clamidospores of Duddingtonia flagrans and Monacrosporium thaumasium fungi in different solid media

Las especies Duddingtonia flagrans y Monacrosporium thaumasium son micro-hongos considerados promisorios agentes del control biológico de parásitos. Bajo condiciones adversas como la falta de nutrientes, estos hongos producen esporas capaces de sobrevivieren después de pasar por el tracto gastrointestinal de los animales. La formación de estas estructuras es una característica deseable ya que promueve la sobrevivencia y la diseminación de los hongos para propósitos de biocontrol. El objetivo de este estudio fue evaluar la producción de esporas de dos especies de hongos nematófagos D. flagrans (aislados AC001 y CG722) y M. thaumasium (NF34A). Estos fueron cultivados en los subproductos agroindustriales, que tenían el intento de identificar el mejor medio para uso en programas de biocontrol de nematodos. Diferentes volúmenes (10, 15 y 20 mL) de masa micelial fueron utilizados como inóculos iniciales y adicionados a 100 gramos de medios de crecimientos sólidos (sémola de arroz - QA; sémola de maíz - QM; bagazo de caña - BC; paja de arroz - PA y cascara de café - CC) y mantenidos a 25°C en la obscuridad para evaluar la producción de esporas. Los aislados AC001 y CG722 mostraron las mejores producciones en el medio de la QA (p<0,05). El volumen de 20 mL de masa micelial utilizado como inóculo inicial proporcionó una mayor recuperación de esporas. El aislado NF34A presentó una baja o nula producción de estructuras reproductivas en los diferentes volúmenes y medios de crecimientos utilizados. La mejor producción de esporas se obtuvo utilizando subproductos de la agroindustria con mayor densidad proteica y energética.(AU)

As espécies Duddingtonia flagrans e Monacrosporium thaumasium são microfungos considerados promissores agentes de controle biológico de parasitos. Sob condições adversas, como a falta de nutrientes, estes fungos produzem esporos capazes de sobreviverem após a passagem pelo trato gastrintestinal dos animais. A formação destas estruturas é uma característica desejável, já que promove a sobrevivência fúngica e a sua disseminação para fins de biocontrole. Este estudo teve como objetivo avaliar a produção de esporos das espécies de fungos nematófagos D. flagrans (isolados AC001 e CG722) e M. thaumasium (NF34A). Estes foram cultivados em subprodutos agroindustriais, a fim de identificar o melhor meio para uso em programas de controle biológico de nematoides. Diferentes volumes de massa micelial (10, 15 e 20 mL) foram utilizados como inóculo inicial e adicionados sobre 100 gramas dos meios de crescimento sólidos (quirera de arroz - QA; quirera de milho - QM; bagaço de cana - BC; palha de arroz - PA e casca de café - CC) e mantidos a 25°C ao abrigo da luz para avaliar a produção de esporos. Os isolados AC001 e CG722 mostraram as melhores produções no meio QA (p<0,05). O volume de 20 mL de massa micelial usado como inóculo inicial permitiu maior recuperação de esporos. O isolado NF34A apresentou produção baixa ou nula de estruturas reprodutivas nos diferentes volumes e meios de crescimento utilizados. A melhor produção de esporos foi obtida nos subprodutos agroindustriais com maior densidade proteica/energética.(AU)

Optimization of protease production by the fungus Monacrosporium thaumasium and its action against Angiostrongylus vasorum larvae / Otimização da produção de protease pelo fungo Monacrosporium thaumasium e sua ação contra larvas de Angiostrongylus vasorum

The objectives of this study were to optimize protease production from the nematophagous fungus Monacrosporium thaumasium (NF34a) and evaluate its larvicidal activity and biological stability. An isolate of the nematophagous fungus Monacrosporium thaumasium (NF34a) was used to produce the enzyme. The Plackett-Burman design was used in order to scan which components of the culture medium could have a significant influence on protease production by the fungus NF34a. An in vitro assay was also performed to evaluate the larvicidal activity of NF34a. It was observed that only one component of the culture medium (yeast extract), at the levels studied, had any significant effect (p < 0.05) on protease production. There was a reduction (p < 0.01) in the mean number of larvae recovered from the treated groups, compared with the control groups. The results confirm previous reports on the efficiency of nematophagous fungi for controlling nematode larvae that are potentially zoonotic. Thus, given the importance of biological control, we suggest that further studies should be conducted on the protease produced by the fungus Monacrosporium thaumasium.

O objetivo deste trabalho foi otimizar a produção de proteases do fungo nematófago Monacrosporium thaumasium (NF34a), avaliar sua atividade larvicida e sua estabilidade biológica. Foi utilizado um isolado do fungo nematófago Monacrosporium thaumasium (NF34a) para a produção de enzima. O delineamento Plackett-Burman foi utilizado com o objetivo de se escanear quais componentes do meio de cultura, poderiam ter influência significava na produção de protease pelo fungo NF34a. Foi realizado um ensaio in vitro para avaliar a atividade larvicida de NF34a. Observou-se que apenas um dos componentes do meio de cultura (extrato de levedura), nos níveis avaliados, apresentou um efeito significativo (p < 0,05) sobre a produção de protease. Houve redução (p < 0,01) entre as médias de larvas recuperadas dos grupos tratados em relação às dos grupos controle. Os resultados confirmam trabalhos anteriores da eficiência de fungos nematófagos no controle de larvas de nematóides potencialmente zoonóticos. Assim, devido a importância do controle biológico, os autores sugerem estudos mais aprofundados sobre a protease produzida pelo fungo Monacrosporium thaumasium.

Control of infective larvae of gastrointestinal nematodes in heifers using different isolates of nematophagous fungi / Controle de larvas infectantes de nematóides gastrintestinais de novilhas por diferentes isolados dos fungos nematófagos

The effect of different nematophagous fungi [Duddingtonia flagrans (AC001 and CG722) and Monacrosporium thaumasium (NF34)] with regard to controlling infective larvae (L3) of nematodes after gastrointestinal transit in female cattle (3/4 Holstein × Zebu) was evaluated. A total of 24 pubescent female cattle were used, weighing approximately 320 kg each one. There were three treatment groups, each contained six animals that received 150 g of pellets (0.2 g of mycelium), orally in a single dose, in a sodium alginate matrix containing mycelial mass of the fungus D. flagrans (AC001 or CG722) or M. thaumasium (NF34); and one control group (without fungi). Fecal samples were collected from the animals at intervals of 12, 15, 18, 21, 24, 48, and 72 hours. At the end of 17 days, the L3 not subjected to predation were recovered by means of the Baermann method. The fungal isolates tested were capable of destroying the L3 after gastrointestinal transit. It was observed that within 72 hours, the isolates AC001, CG722, and NF34 showed a higher predatory activity (81.2%, 97.3%, and 98.3%, respectively). The results justify the need for studies in the field, and over longer intervals, in order to observe the efficiency of the fungus D. flagrans, or even M. thaumasium, for environmental control over nematodes in naturally infected cattle.

No presente estudo, foi avaliado o efeito de diferentes fungos nematófagos [Duddingtonia flagrans (AC001 e CG722) eMonacrosporium thaumasium (NF34)] no controle de larvas infectantes (L3) de nematóides após o trânsito gastrointestinal em fêmeas bovinas (3/4 Holandês x Zebu). Um total de 24 fêmeas bovinas pubescentes foram utilizadas, pesando aproximadamente 320 kg cada. Foram utilizados três grupos de tratamento; cada um contendo seis animais que receberam por via oral de 150 g de péletes (0,2 g de micélio), em dose única, em uma matriz de alginato de sódio contendo massa micelial dos fungos D. flagrans (AC001 ou CG722), M. thaumasium (NF34), além de um grupo controle (sem fungo). Amostras de fezes foram colhidas dos animais em intervalos de 12, 15, 18, 21, 24, 48 e 72 horas. No final de 17 dias, as L3 não predadas foram recuperadas pelo método de Baermann. Os isolados de fungos testados foram capazes de destruir as L3 após trânsito gastrointestinal. Observou-se após 72 horas, os isolados AC001, CG722 e NF34 mostraram uma maior atividade predatória (81,2%, 97,3% e 98,3%, respectivamente). Estes resultados justificam a necessidade de estudos a campo e em intervalos mais longos, a fim de observar a eficácia dos fungos D. flagrans ou mesmoM. thaumasium no controle ambiental dos nematóides de bovinos naturalmente infectados.

First report of interaction of nematophagous fungi on Libyostrongylus douglassii (Nematoda: Trichostrongylidae) / Primeiro relato da interação de fungos nematófagos sobre Libyostrongylus douglassii (Nematoda: Trichostrongilidae)

Libyostrongylus douglassii is a gastrointestinal nematode parasite of ostriches that can cause up to 50% mortality in young birds. The objective of this study was to compare the predatory capacity of two isolates of the predatory fungi Duddingtonia flagrans(AC001 and CG722 isolates) and one of Arthrobotrys cladodes (CG719) on infective larvae (L3) of L. douglassii under laboratory conditions, in 2% water-agar medium. The results showed that the fungi tested were effective in preying upon the L3 of L. douglassii (P < 0.05), compared with the control group. However, there was no difference in predatory capacity between the fungi tested (P > 0.05) during the seven days of experimental testing. In comparison with the control, without fungus, there were significant decreases (P < 0.05) of 85.2% (AC001), 81.2% (CG722) and 89.2% (CG719) in the average numbers of L3 of L. douglassii recovered from treatments with the isolates tested. In the present study, the three isolates of the predatory fungi D. flagrans (AC001 and CG722) and A. cladodes (CG719) were efficient at in vitro destruction of the L3 of L. douglassii.

Libyostrongylus douglassii é um nematóide parasito gastrintestinal de avestruzes que pode causar até 50% de mortalidade em aves jovens. O objetivo deste trabalho foi comparar a capacidade predatória de dois isolados de fungos predadores Duddingtonia flagrans (isolados AC001 e CG722) e um Arthrobotrys cladodes (CG719) sobre larvas infectantes (L3) de L. douglassii em condições laboratoriais, em meio ágar­água 2%. Os resultados demonstraram que os fungos testados foram eficientes em predar as L3 de L. douglassii (P < 0,05) em relação ao grupo controle. Contudo, não foi observada nenhuma diferença na capacidade predatória entre os fungos testados (P > 0,05) durante os sete dias do ensaio experimental. Em comparação ao controle, sem fungo, houve uma redução significativa (P < 0,05) de 85,2% (AC001); 81,2% (CG722) e 89,2% (C719) na média de L3 recuperadas nas placas do grupo tratado com os isolados testados. No presente trabalho, os três isolados de fungos predadores D. flagrans (AC001 e CG722) e A. cladodes (CG719) foram eficientes na destruição in vitro das L3 de L. douglassii.

Proteolytic action of the crude extract of Duddingtonia flagrans on cyathostomins (Nematoda: Cyathostominae) in coprocultures / Ação proteolítica do extrato bruto de Duddingtonia flagrans sobre ciatostomíneos (Nematoda: Cyathostominae) em coproculturas

The objective of this study was to examine the action of the crude extract of Duddingtonia flagrans (isolates AC001 and CG722) on infective larvae (L3) of cyathostomins in coprocultures and to confirm its proteolytic activity by means of a zymogram. The following groups were formed in coprocultures: Group 1: 10 mL of crude extract of D. flagrans (AC001); group 2: 10 mL of crude extract of AC001 with 10 mM of Ca2+; group 3: 10 mL of crude extract of D. flagrans (CG722); group 4: 10 mL of crude extract of CG722 with 10 mM of Ca2+; and group 5: control group (distilled water). The third-stage larvae (L3) were obtained after eight days. The crude extract of D. flagrans was effective in reducing the number of L3, with the following percentage reductions: group 1, 49.5%; group 2, 52.5%; group 3, 36.8%; and group 4, 57.7%; in relation to the control group (p > 0.05). The proteolytic activity of the crude extract was confirmed through the zymogram. The results from this study confirmed that the crude extract of the fungus D. flagrans could be used for controlling cyathostomin L3, and suggested that at least one protease of approximately 38 kDa was present.

O objetivo deste trabalho foi estudar a ação do extrato bruto de Duddingtonia flagrans (isolados AC001 e CG722) sobre larvas infectantes (L3) de ciatostomíneos em coproculturas e confirmar a sua atividade proteolítica por meio de um zimograma. Foram formados os seguintes grupos em coproculturas: grupo 1: 10 mL de extrato bruto de D. flagrans (AC001); grupo 2: 10 mL de extrato bruto de AC001 com íons Ca2+ 10 Mm; grupo 3: 10 mL de extrato bruto de D. flagrans (CG722); grupo 4: 10 mL de extrato bruto de CG722 com íons Ca2+ 10 Mm; e grupo 5 como controle (água destilada), obtendo-se as L3 ao final de 8 dias. O extrato bruto de D. flagrans foi eficiente na redução do número de L3 com os seguintes percentuais de redução: grupo 1 (49,5%); grupo 2 (52,5%); grupo 3 (36,8%) e grupo 4 (57,7%) em relação ao grupo controle (p > 0,05). Confirmou-se a atividade proteolítica por meio do zimograma. Os resultados do presente trabalho confirmam a utilização do extrato bruto do fungo D. flagrans no controle de L3 de ciatostomíneos e sugere a presença de pelo menos uma protease de aproximadamente 38 kDa.

Predatory activity of chlamydospores of the fungus Pochonia chlamydosporia on Toxocara canis eggs under laboratory conditions / Atividade predatória de clamidósporos do fungo Pochonia chlamydosporia sobre ovos de Toxocara canis em condições laboratoriais

The objective of this study was to use chlamydospores of the fungus Pochonia chlamydosporia (isolates VC1 and VC4) against Toxocara canis eggs in a 15-day in vitro assay. One thousand T. canis eggs were placed in Petri dishes containing 2% water agar medium with different concentrations of chlamydospores (1,000, 10,000 or 100,000) of each fungal isolate of P. chlamydosporia (treated groups) and 1,000 eggs in Petri dishes without fungus (control group). Egg counts were performed to determine the ovicidal activity, which was classified as three effect levels: type 1, type 2 and type 3. Significant differences (P < 0.01) in egg destruction were found in comparison with the control group. The highest percentage of egg destruction was found in plates containing 100,000 chlamydospores (68.5% for VC1 and 70.5% for VC4). Chlamydospores of P. chlamydosporia were effective in destroying T. canis eggs and may contribute in the future towards combating the eggs of this parasite.

O objetivo do trabalho foi utilizar clamidósporos do fungo Pochonia chlamydosporia (isolados VC1 e VC4) na destruição de ovos de Toxocara canis, num ensaio in vitro, realizado no intervalo de 15 dias. Em cada placa de Petri com ágar-água 2% foram vertidos 1.000 ovos de T. canis em 1.000, 10.000 ou 100.000 clamidósporos de cada isolado do fungo (grupos tratados). Foram realizadas as contagens para verificar a atividade ovicida, classificada em três níveis de efeito: tipo 1, tipo 2 e tipo 3. Os resultados demonstraram que houve diferença significativa (P < 0,01) na destruição dos ovos em relação aos ovos observados nas placas do grupo controle. O maior percentual de ovos destruídos foi observado nas placas contendo 100.000 clamidósporos (68,5% para VC1 e 70,5% para VC4). Clamidósporos do fungo P. chlamydosporia foram efetivos na destruição dos ovos de T. canis podendo contribuir no futuro para o combate aos ovos deste parasito.

In vitro predatory activity of conidia of fungal isolates of the Duddingtonia flagrans on Angiostrongylus vasorum first-stage larvae

INTRODUCTION:Angiostrongylus vasorum is a nematode that parasitizes molluscs, dogs, and even man. METHODS:The objective was to evaluate the predatory activity of the conidia of two fungal isolates of Duddingtonia flagrans (AC001 and CG722) on first-stage larvae (L1) of A. vasorum in laboratory conditions. RESULTS: At the end of the experiment, there were significant reductions (p<0.01) of 74.5% and 63.2%, on average, in the A. vasorum (L1) recovered in the AC001 and CG722 treatment conditions, respectively. CONCLUSIONS: The two isolates of fungi were efficient in the capture and destruction of A. vasorum (L1).

In vitro biological control of infective larvae of Ancylostoma ceylanicum / Controle biológico in vitro de larvas infectantes de Ancylostoma ceylanicum

The aim of this study was to evaluate the predatory activity of the fungus Duddingtonia flagrans (AC001) on infective larvae of Ancylostoma ceylanicum after gastrointestinal transit in hamsters. Twenty animals were used in the experiment, divided into two groups: a treated group (10 animals) and a control group (10 animals). In the group treated with D. flagrans, each animal received mycelium from the AC001 isolate, at an oral dose of 5 mg/25 g of live weight. To evaluate the predatory activity of the fungus, fecal samples were collected from the animals in both groups, at the times of 6, 8, 12, 24 and 36 hours after the treatment. Then, subsamples of 2 g of feces were placed in Petri dishes containing 2% water-agar (2% WA) culture medium and 1000 L3 of A. ceylanicum. Over the study period, the following percentage reductions were observed: 43.2% (6 hours), 30.8% (8 hours), 25.8% (12 hours), 30% (24 hours) and 11% (36 hours). The fungus D. flagrans presented predatory activity on the L3 of A. ceylanicum, after passing through the hamsters' gastrointestinal tract. It was therefore concluded that the fungus D. flagrans may be an alternative for biological control of the L3 of A. ceylanicum.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade predatória do fungo Duddingtonia flagrans (AC001) sobre larvas infectantes de Ancylostoma ceylanicum após o trânsito gastrintestinal em hamsters. Foram utilizados vinte animais no experimento, divididos em dois grupos: um grupo tratado (10 animais) e um grupo controle (10 animais). No grupo tratado com D. flagrans, cada animal recebeu 5mg/25g de peso vivo de micélio do isolado AC001, por via oral. Para avaliar a atividade predatória do fungo, amostras fecais foram coletadas de ambos os grupos de animais nos horários de: 6, 8, 12, 24 e 36 após o tratamento. A seguir, 2g de fezes foram colocadas em placas de Petri contendo o meio de cultura ágar-água 2% (AA2%) e 1000 L3 de A. ceylanicum. Ao longo dos horários estudados os seguintes percentuais de redução foram observados: 43,2% (6 horas); 30,8% (8 horas); 25,8% (12 horas); 30% (24 horas) e 11% (36 horas). O fungo D. flagrans (AC001) apresentou atividade predatória sobre as L3 de A. ceylanicum após o trânsito pelo trato gastrintestinal de hamsters. Além disso, foi observada uma diferença significativa nos percentuais obtidos de cada horário em relação ao numero de L3 recuperadas (P < 0,01). Conclui-se, portanto, que o fungo D. flagrans pode ser uma alternativa de controle biológico das L3 de A. ceylanicum.

Control of Strongyloides westeri by nematophagous fungi after passage through the gastrointestinal tract of donkeys / Controle de Strongyloides westeri por fungos nematófagos após trânsito gastrintestinal em jumentas

Strongyloides westeri is the most prevalent nematode among equines aged up to four months and causes gastrointestinal disorders. The objective of this study was to observe the control of infective S. westeri larvae (L3) by the nematophagous fungi Duddingtonia flagrans (AC001) and Monacrosporium thaumasium (NF34) after passage through the gastrointestinal tract of female donkeys. Twelve dewormed female donkeys that were kept in stables were used. Two treatment groups each comprising four animals received orally 100 g of pellets made of sodium alginate matrix containing a mycelial mass of either D. flagrans (AC001) or M. thaumasium (NF34). The control group consisted of four animals that received pellets without fungus. Feces samples were then collected from the animal groups at different times (after 12, 24, 48 and 72 hours). These feces were placed in Petri dishes containing 2% water-agar medium and 1000 L3 of S. westeri. AC001 and NF34 isolates showed the ability to destroy the L3, after gastrointestinal transit, thus demonstrating their viability and predatory activity.

O Strongyloides westeri é o nematóide de maior prevalência entre equídeos com idade até quatro meses, causando distúrbios gastrintestinais. O objetivo do presente trabalho foi observar o controle de larvas infectantes (L3) de Strongyloides westeri pelos fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001) e Monacrosporium thaumasium (NF34) após trânsito gastrintestinal em jumentas. Foram utilizadas 12 jumentas, estabuladas e previamente vermifugadas. A seguir, dois grupos tratados, contendo cada um 4 animais receberam por via oral 100 g de péletes em matriz de alginato de sódio, contendo massa miceliana dos fungos D. flagrans (AC001) ou M. thaumasium (NF34). O grupo controle foi constituído de 4 animais que receberam péletes sem fungo. A seguir, amostras de fezes dos grupos de animais foram coletadas em distintos intervalos de horas (12, 24, 48 e 72). Essas fezes foram vertidas em placas de Petri contendo meio sólido ágar-água 2% e 1000 L3 de S. westeri. Os isolados AC001 e NF34 apresentaram capacidade de destruir as L3 após o trânsito, demonstrando sua viabilidade e atividade predatória.