Risk factors and detection of brucella ovis in naturally infected rams and ewes / Fatores de risco e detecção de brucella ovis em carneiros e ovelhas naturalmente infectados

The objective of this study was to verify the occurrence of ovine brucellosis using Agar Gel Immunodiffusion (AGID) and Polymerase Chain Reaction (PCR) techniques, as well as to identify the main risk factors associated with infection in sheep flocks belonging to municipalities in the microregion from Teresina, PI, Brazil. A total of 100 urine and blood samples were collected from sheep aged 6 months or older. The urine samples were submitted to conventional PCR and the blood samples were examined by the AGID technique. Of the 100 blood samples, 17 (17%) were reactive to the AGID test. In conventional PCR of 100 urine samples, six (6%) were positive. Risk factors associated to infection by B. ovis included the rearing system (OR=0.19), feed management (OR=0.05), presence of dystotic births (OR=4.50), miscarriages (OR=3.75) and source of water offered to the animals (OR=0.19). Thus, it was concluded that it is possible to detect the occurrence of animals with ovine brucellosis since PCR is a reliable method to confirm infection. Furthermore, there are risk factors associated to infection by B. ovis in the municipalities studied.

Objetivou-se verificar a ocorrência da brucelose ovina através das técnicas de Imunodifusão em Gel de Ágar (IDGA) e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), bem como identificar os principais fatores de risco associados à infecção nos rebanhos ovinos pertencentes a municípios da microrregião de Teresina, PI, Brasil. Foram colhidas 100 amostras de urina e de sangue de ovinos com idade superior ou igual a seis meses. As amostras de urina foram submetidas a PCR convencional e as amostras de sangue à técnica de IDGA. Das 100 amostras de sangue 17 (17%) foram reagentes ao teste de IDGA. Já na PCR convencional das 100 amostras de urina, seis (6%) foram positivas. Ressalta-se que três animais foram positivos em ambos os testes. Como fatores associados à infecção por B. ovis, observou-se o tipo de sistema de criação (OR=0,19), o manejo alimentar (OR=0,05), presença de partos distócicos (OR=4,50), abortamentos (OR=3,75) e a fonte de água fornecida aos animais (OR=0,19). Assim, conclui-se que foi possível detectar a ocorrência de animais com brucelose ovina, uma vez que a PCR é um método confirmatório. Além disso, há fatores de risco associados à infecção por B. ovis nos municípios estudados.

Risk factors and detection of brucella ovis in naturally infected rams and ewes / Fatores de risco e detecção de brucella ovis em carneiros e ovelhas naturalmente infectados

The objective of this study was to verify the occurrence of ovine brucellosis using Agar Gel Immunodiffusion (AGID) and Polymerase Chain Reaction (PCR) techniques, as well as to identify the main risk factors associated with infection in sheep flocks belonging to municipalities in the microregion from Teresina, PI, Brazil. A total of 100 urine and blood samples were collected from sheep aged 6 months or older. The urine samples were submitted to conventional PCR and the blood samples were examined by the AGID technique. Of the 100 blood samples, 17 (17%) were reactive to the AGID test. In conventional PCR of 100 urine samples, six (6%) were positive. Risk factors associated to infection by B. ovis included the rearing system (OR=0.19), feed management (OR=0.05), presence of dystotic births (OR=4.50), miscarriages (OR=3.75) and source of water offered to the animals (OR=0.19). Thus, it was concluded that it is possible to detect the occurrence of animals with ovine brucellosis since PCR is a reliable method to confirm infection. Furthermore, there are risk factors associated to infection by B. ovis in the municipalities studied.

Objetivou-se verificar a ocorrência da brucelose ovina através das técnicas de Imunodifusão em Gel de Ágar (IDGA) e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), bem como identificar os principais fatores de risco associados à infecção nos rebanhos ovinos pertencentes a municípios da microrregião de Teresina, PI, Brasil. Foram colhidas 100 amostras de urina e de sangue de ovinos com idade superior ou igual a seis meses. As amostras de urina foram submetidas a PCR convencional e as amostras de sangue à técnica de IDGA. Das 100 amostras de sangue 17 (17%) foram reagentes ao teste de IDGA. Já na PCR convencional das 100 amostras de urina, seis (6%) foram positivas. Ressalta-se que três animais foram positivos em ambos os testes. Como fatores associados à infecção por B. ovis, observou-se o tipo de sistema de criação (OR=0,19), o manejo alimentar (OR=0,05), presença de partos distócicos (OR=4,50), abortamentos (OR=3,75) e a fonte de água fornecida aos animais (OR=0,19). Assim, conclui-se que foi possível detectar a ocorrência de animais com brucelose ovina, uma vez que a PCR é um método confirmatório. Além disso, há fatores de risco associados à infecção por B. ovis nos municípios estudados.

Serological evidence of Toxoplasma gondii occurrence in naturally infected sheep in the Teresina microregion, Piauí, Brazil

Toxoplasmosis is a zoonosis of reproductive nature that is transmitted to humans mainly by ingestion of undercooked meat or drinking oocyte-contaminated water. The slaughter of small ruminants in clandestine slaughterhouses and the presence of companion animals in these locations may be epidemiologically important for the dissemination of the disease. The objective of the present study was to determine toxoplasmosis prevalence by researching anti- Toxoplasma gondii antibodies in meat sheep herds from farms in Teresina microregion, Piauí, Brazil. A total of 450 blood samples were collected from sheep of both sexes, belonging to 28 herds from the 14 municipalities that comprise the microregion. The samples were analyzed by the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and the presence of anti-T. gondii antibodies was observed in 62% (279/450) of the animals in all the municipalities and on at least one farm in each municipality. The high occurrence of positive animals is an indication of reproductive problems in these herds, characterizing a problem for both sheep rearing and public health.

Diluente Tris suplementado com óleo de Mauritia flexuoxa sobre a qualidade do sêmen caprino após a criopreservação / Tris diluent supplemented with Mauritia flexuoxa oil on the quality of goat semen after cryopreservation

Objetivou-se verificar os efeitos, nos parâmetros espermáticos, na integridade mitocondrial, acrossomal e de membrana em células espermáticas, desencadeados pelo uso do Tris (Tris hidroximetil aminometano) suplementado com óleo de Mauritia flexuoxa como diluente para criopreservação de sêmen caprino. Quatro caprinos clinicamente saudáveis foram utilizados. Os animais eram alimentados diariamente com volumoso (Pennisetum purpureum, Schum.), concentrado (ração peletizada com teor de 20% proteína, 300 g/animal/dia) e sal mineral específico para Caprinos (Caprinofós®), à vontade. Dois ensaios foram realizados: I – Teste de toxicidade; II – Criopreservação do sêmen com concentrações ideais. No teste de toxicidade as concentrações avaliadas foram: 5%, 10%, 15% e 20% de diluente a base de óleo de Mauritia flexuoxa. Após o teste de toxicidade, foi escolhido a concentração que apresentou o melhor resultado (5%). Logo após, foram realizadas mais 32 coletas, que foram diluídas em Tris-gema-glicerol (grupo controle) ou diluente contendo óleo vegetal (Mauritia flexuoxa). As amostras foram criopreservadas com auxílio do aparelho Tk3000®. Após o período mínimo de uma semana as palhetas foram descongeladas em banho-maria a 37 °C por 30 segundos, acondicionadas em microtubos de centrifugação e homogeneizadas para a análise imediata de motilidade, vigor espermático e morfologia. Em seguida, por meio de sondas fluorescentes foram avaliadas a integridade de acrossomo, membrana plasmática (Diacetato de Carboxifluresceína e Iodeto de Propídeo) e função mitocondrial sob microscopia de epifluorescência. Quanto a motilidade e vigor, integridade mitocondrial e acrossomal, o grupo buriti foi inferior ao grupo controle. O Tris suplementado com óleo de Mauritia flexuoxa na concentração de 5% não influenciou significativamente a qualidade espermática, porém, observouse morfologia e integridade de membrana favoráveis. Dessa forma, sendo uma alternativa para substituição de diluentes a base de produtos de origem animal.

The objective was to verify the effects, sperm parameters, mitochondrial, acrosomal and membrane integrity in sperm cells, triggered by the use of Tris (Tris hydroxymethyl aminomethane) supplemented with Mauritia flexuoxa oil as a diluent for cryopreservation of goat semen. Four goats clinically healthy were used. The animals were fed daily with bulky (Pennisetum purpureum, Schum.), concentrate (pelleted feed with 20% protein content, 300 g / animal / day) and mineral salt Specific for Goats (Caprinofós®), ad libitum. Two tests were carried out: I - Toxicity test; II - Semen cryopreservation with ideal concentrations. In the toxicity test as selected were: 5%, 10%, 15% and 20% of Mauritia flexuoxa oil-based diluent. After the toxicity test, the concentration that showed the best result (5%) was chosen. Soon after, a further 32 samples were obtained, which were diluted in Tris-glycerol (control group) or diluent containing vegetable oil (Mauritia flexuoxa). The samples were cryopreserved using the Tk3000® machine. After a minimum of one week, the samples were thawed in a 37 ° C water bath for 30 seconds, packed in centrifugation microtubes and homogenized for immediate analysis of motility, sperm vigor and morphology. Then, by means of fluorescent probes, the integrity of the acrosome, plasma membrane (Carboxyflurescein diacetate and Propidium Iodide) and mitochondrial function under epifluorescence microscopy were evaluated. As for motility and vigor, mitochondrial and acrosomal integrity, the buriti group was inferior to the control group. Tris supplemented with Mauritia flexuoxa oil at a concentration of 5% did not significantly influence sperm quality, however, favorable motility, morphology and membrane integrity were observed. Thus, being an alternative to replace diluents based on products of animal origin.

Diluente Tris suplementado com óleo de Mauritia flexuoxa sobre a qualidade do sêmen caprino após a criopreservação / Tris diluent supplemented with Mauritia flexuoxa oil on the quality of goat semen after cryopreservation

Objetivou-se verificar os efeitos, nos parâmetros espermáticos, na integridade mitocondrial, acrossomal e de membrana em células espermáticas, desencadeados pelo uso do Tris (Tris hidroximetil aminometano) suplementado com óleo de Mauritia flexuoxacomo diluente para criopreservação de sêmen caprino. Quatro caprinos clinicamente saudáveis foram utilizados. Os animais eram alimentados diariamente com volumoso (Pennisetum purpureum, Schum.), concentrado (ração peletizada com teor de 20% proteína, 300 g/animal/dia) e sal mineral específico para Caprinos (Caprinofós®), à vontade. Dois ensaios foram realizados: I ­ Teste de toxicidade; II ­ Criopreservação do sêmen com concentrações ideais. No teste de toxicidade as concentrações avaliadas foram: 5%, 10%, 15% e 20% de diluente a base de óleo de Mauritia flexuoxa. Após o teste de toxicidade, foi escolhido a concentraçãoque apresentou o melhor resultado (5%). Logo após, foram realizadas mais 32 coletas, que foram diluídas em Tris-gema-glicerol (grupo controle) ou diluente contendo óleo vegetal (Mauritia flexuoxa). As amostras foram criopreservadas com auxílio do aparelho Tk3000®. Após o período mínimo de uma semana as palhetas foram descongeladas em banho-maria a 37 °C por 30 segundos, acondicionadas em microtubos de centrifugação e homogeneizadas para a análise imediata de motilidade, vigor espermático e morfologia. Em seguida, por meio de sondas fluorescentes foram avaliadas a integridade de acrossomo, membrana plasmática (Diacetato de Carboxifluresceína e Iodeto de Propídeo) e função mitocondrial sob microscopia de epifluorescência. Quanto a motilidade e vigor, integridade mitocondrial e acrossomal, o grupo buriti foi inferior ao grupo controle. O Tris suplementado com óleo de Mauritia flexuoxa na concentração de 5% não influenciou significativamente a qualidade espermática, porém, observou-se morfologia e integridade de membrana favoráveis. Dessa forma, sendo uma alternativa para substituição de diluentes a base de produtos de origem animal.

The objective was to verify the effects, sperm parameters, mitochondrial, acrosomal and membrane integrity in sperm cells, triggered by the use of Tris (Tris hydroxymethyl aminomethane) supplemented with Mauritia flexuoxa oil as a diluent for cryopreservation of goat semen. Four goats clinically healthy were used. The animals were fed daily with bulky (Pennisetum purpureum, Schum.), concentrate (pelleted feed with 20% protein content, 300 g / animal / day) and mineral salt Specific for Goats (Caprinofós®), ad libitum. Two tests were carried out: I - Toxicity test; II - Semen cryopreservation with ideal concentrations. In the toxicity test as selected were: 5%, 10%, 15% and 20% of Mauritia flexuoxa oil-based diluent. After the toxicity test, the concentration that showed the best result (5%) was chosen. Soon after, a further 32 samples were obtained, which were diluted in Tris-glycerol (control group) or diluent containing vegetable oil (Mauritia flexuoxa). The samples were cryopreserved using the Tk3000® machine. After a minimum of one week, the samples were thawed in a 37 ° C water bath for 30 seconds, packed in centrifugation microtubes and homogenized for immediate analysis of motility, sperm vigor and morphology. Then, by means of fluorescent probes, the integrity of the acrosome, plasma membrane (Carboxyflurescein diacetate and Propidium Iodide) and mitochondrial function under epifluorescence microscopy were evaluated. As for motility and vigor, mitochondrial and acrosomal integrity, the buriti group was inferior to the control group. Tris supplemented with Mauritia flexuoxa oil at a concentration of 5% did not significantly influence sperm quality, however, favorable motility, morphology and membrane integrity were observed. Thus, being an alternative to replace diluents based on products of animal origin.

Seroprevalence of ovine brucellosis in the microregion of Teresina, Piauí, Brazil / Soroprevalência da brucelose ovina na microrregião de Teresina, Piauí

Among the diseases that affect the reproductive system of domestic animals, brucellosis in the sheep species is important because it generates significant economic losses to sheep rearing. Thus, it is a threat to the growth and productivity of sheep herds. In the face of this problem, the objective of the present research was to identify the prevalence of ovine brucellosis in herds in municipalities of the Teresina, Piauí, Brazil microregion by using the agar gel immunodiffusion assay (AGID) and indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) serological tests. Fourteen municipalities were included in the research. Blood samples were collected from 521 pubescent animals by puncturing the jugular vein. After collection, the samples were submitted to the serological techniques, AGID and indirect ELISA, to detect anti B. ovis antibody. Of the 521 samples submitted to the AGIDtest, 23 (4.41%) were sera reagent and 498 (95.58%) negative. The indirect ELISA tests, 24 (4.61%) suspect samples and 497 (95.39%) negative samples were obtained, and there were no reagent animals in this test, only suspect. The seroprevalence of ovine brucellosis in the Teresina, Piauí microregion was 4.41%. Thus, it is possible to identify sheep with reagent serology to infection by B. ovis, that is present in municipalities in the state of Piauí, Brazil. Furthermore, AGIDwas shown to be more sensitive in detecting animals that had had contact with the etiological agent of the disease.(AU)

Dentre as enfermidades que acometem o sistema reprodutivo dos animais domésticos, a brucelose na espécie ovina tem se destacado por gerar prejuízos econômicos significativos à ovinocultura. Dessa forma, apresenta-se como uma ameaça ao crescimento e à produtividade dos rebanhos ovinos. Diante de tal problemática, objetivou-se, por meio desta pesquisa, identificar a prevalência de brucelose ovina em rebanhos pertencentes a municípios da microrregião de Teresina, Piauí, por meio dos testes sorológicos, imunodifusão em gel de ágar (IDGA) e ensaio imunoenzimático (ELISA) indireto. Quatorze municípios foram incluídos na pesquisa. Para sua execução, colheram-se, por punção venosa da jugular, amostras sanguíneas de 521 animais púberes. Após colheita, as amostras foram submetidas às técnicas sorológicas, IDGA e ELISA indireto, para a detecção de anticorpos anti-B. ovis. Das 521 amostras submetidas ao teste de IDGA, 23 (4,41%) foram sororreagentes e 498 (95,58%) negativas. Quanto ao teste ELISA indireto, obtiveram-se 24 (4,61%) amostras suspeitas e 497 (95,39%) amostras negativas, não havendo animais reagentes neste teste, apenas suspeitos. A soroprevalência da brucelose ovina na microrregião homogênea de Teresina, Piauí, foi de 4,41%. Assim, foi possível identificar ovinos com sorologia reagente à infecção por B. ovis, presente em municípios do estado do Piauí. Além disso, a IDGA mostrou-se mais sensível em detectar animais que tiveram contato com o agente etiológico da doença.(AU)

Investigação sorológica das lentiviroses de pequenos ruminantes nas microrregiões homogêneas do Alto Médio Canindé, Picos e Floriano, Piauí, Brasil / Serological investigation of lentiviruses of small ruminants in the microregions of Alto Médio Canindé, Picos and Floriano, Piauí state, Brazil

Lentivírus de pequenos ruminantes (LV) é o termo genérico utilizado para designar os vírus da artrite encefalite caprina e Maedi-Visna, os quais pertencem à família Retroviridae, subfamília Orthoretrovirinae, gênero Lentivirus. Tais vírus infectam caprinos e ovinos, causando enfermidades de curso lento com lesões inflamatórias, crônicas e degenerativas que podem atingir vários órgãos, provocando caquexia e morte. Os animais infectados eliminam o vírus sobretudo por meio de secreções e excreções e transmitem-no especialmente em situações de estreito contato. Não há tratamento até o momento. O controle é baseado na criação segregada, no manejo e no sacrifício dos positivos. Esse agente infeccioso já foi relatado em várias partes do mundo, sendo responsável por perdas econômicas significativas. Por o agente ter sido verificado em vários estados do Brasil e por não existirem dados soroepidemiológicos nas mesorregiões sudeste e sudoeste piauiense, esta pesquisa teve por objetivo realizar inquérito sorológico para investigar a ocorrência de anticorpos para o LV em ovinos e caprinos nas microrregiões do Alto Médio Canindé, Picos e Floriano, no Piauí. Para tanto, foram coletadas 1.280 e 1.360 amostras de soro caprino e ovino, respectivamente, oriundos de 20 municípios, distribuídos nas três microrregiões, sendo o número de amostras proporcional ao rebanho efetivo de cada município. As amostras de soro foram analisadas utilizando o teste de imunodifusão em gel de agarose (IDGA). Nenhum dos soros pesquisados reagiu positivamente, constatando-se soroprevalência nula. Ressalta-se a importância da implantação de um rigoroso programa de controle para que se possa evitar a introdução e/ou a disseminação desse agente infeccioso nessas microrregiões.(AU)

Small ruminant lentiviruses (LV) is the generic term for the caprine arthritis-encephalitis and ­­Maedi-Visna viruses, which belong to the Retroviridae family, Orthoretrovirinae subfamily, Lentivirus genus. The virus infects goats and sheep, causing slow course of disease with inflammatory, chronic and degenerative lesions, which can reach several organs, provoking cachexia and death. Infected animals eliminate the virus mainly through secretions and excretions and transmit it especially in close contact situations. There is no treatment to date. The control is based on segregated creation, management and sacrifice of the positive. This infectious agent has been reported in various parts of the world and is responsible for significant economic losses. It was verified in several states of Brazil and there are seroepidemiological data in southeast and southwest mesoregions of Piauí, Brazil. This research aimed to perform serological survey to investigate the occurrence of antibodies to LV in sheep and goats, in the regions of Alto Médio Canindé, Picos and Floriano. So, 1,280 and 1,360 serum goats and sheep samples, respectively, were collected, coming from 20 municipalities, distributed in the 3 microregions. The number of samples was proportional to the actual herd of each municipality. The samples were analyzed using the agar gel immunodiffusion test. None of the surveyed sera reacted positively, though there is a null seroprevalence. It was emphasized the importance of implementing a rigorous control program in order to prevent the introduction and spread of this infectious agent in these microregions.(AU)

Investigação sorológica das lentiviroses de pequenos ruminantes nas microrregiões homogêneas do Alto Médio Canindé, Picos e Floriano, Piauí, Brasil / Serological investigation of lentiviruses of small ruminants in the microregions of Alto Médio Canindé, Picos and Floriano, Piauí state, Brazil

Small ruminant lentiviruses (LV) is the generic term for the caprine arthritis-encephalitis and ­­Maedi-Visna viruses, which belong to the Retroviridae family, Orthoretrovirinae subfamily, Lentivirus genus. The virus infects goats and sheep, causing slow course of disease with inflammatory, chronic and degenerative lesions, which can reach several organs, provoking cachexia and death. Infected animals eliminate the virus mainly through secretions and excretions and transmit it especially in close contact situations. There is no treatment to date. The control is based on segregated creation, management and sacrifice of the positive. This infectious agent has been reported in various parts of the world and is responsible for significant economic losses. It was verified in several states of Brazil and there are seroepidemiological data in southeast and southwest mesoregions of Piauí, Brazil. This research aimed to perform serological survey to investigate the occurrence of antibodies to LV in sheep and goats, in the regions of Alto Médio Canindé, Picos and Floriano. So, 1,280 and 1,360 serum goats and sheep samples, respectively, were collected, coming from 20 municipalities, distributed in the 3 microregions. The number of samples was proportional to the actual herd of each municipality. The samples were analyzed using the agar gel immunodiffusion test. None of the surveyed sera reacted positively, though there is a null seroprevalence. It was emphasized the importance of implementing a rigorous control program in order to prevent the introduction and spread of this infectious agent in these microregions.

Lentivírus de pequenos ruminantes (LV) é o termo genérico utilizado para designar os vírus da artrite encefalite caprina e Maedi-Visna, os quais pertencem à família Retroviridae, subfamília Orthoretrovirinae, gênero Lentivirus. Tais vírus infectam caprinos e ovinos, causando enfermidades de curso lento com lesões inflamatórias, crônicas e degenerativas que podem atingir vários órgãos, provocando caquexia e morte. Os animais infectados eliminam o vírus sobretudo por meio de secreções e excreções e transmitem-no especialmente em situações de estreito contato. Não há tratamento até o momento. O controle é baseado na criação segregada, no manejo e no sacrifício dos positivos. Esse agente infeccioso já foi relatado em várias partes do mundo, sendo responsável por perdas econômicas significativas. Por o agente ter sido verificado em vários estados do Brasil e por não existirem dados soroepidemiológicos nas mesorregiões sudeste e sudoeste piauiense, esta pesquisa teve por objetivo realizar inquérito sorológico para investigar a ocorrência de anticorpos para o LV em ovinos e caprinos nas microrregiões do Alto Médio Canindé, Picos e Floriano, no Piauí. Para tanto, foram coletadas 1.280 e 1.360 amostras de soro caprino e ovino, respectivamente, oriundos de 20 municípios, distribuídos nas três microrregiões, sendo o número de amostras proporcional ao rebanho efetivo de cada município. As amostras de soro foram analisadas utilizando o teste de imunodifusão em gel de agarose (IDGA). Nenhum dos soros pesquisados reagiu positivamente, constatando-se soroprevalência nula. Ressalta-se a importância da implantação de um rigoroso programa de controle para que se possa evitar a introdução e/ou a disseminação desse agente infeccioso nessas microrregiões.