ABSTRACT
alpha-glycerophosphate dehydrogenase (alpha-GPDH-EC.1.1.1.8) has been considered absent in Trypanosoma cruzi in contradiction with all other studied trypanosomatids. After observing that the sole malate dehydrogenase can not maintain the intraglycosomal redox balance, GPDH activity was looked for and found, although in very variable levels, in epimastigotes extracts. GPDH was shown to be exclusively located in the glycosome of T. cruzi by digitonin treatment and isopycnic centrifugation. Antibody against T. brucei GPDH showed that this enzyme seemed to be present in an essentially inactive form at the beginning of the epimastigotes growth. GPDH is apparently linked to a salicylhydroxmic-sensitive glycerophosphate reoxidizing system and plays an essential role in the glycosome redox balance
Subject(s)
Animals , Glycerolphosphate Dehydrogenase/analysis , Microbodies/chemistry , Trypanosoma cruzi/chemistry , Glycerolphosphate Dehydrogenase/metabolism , Microbodies/enzymology , Oxygen Consumption , Trypanosoma cruzi/enzymology , Trypanosoma cruzi/metabolismABSTRACT
El aislamiento en Escherichia coli K-12 de un cytocromo C552, libre de contaminantes particulados, permitio la reconstitucion "in vitro" de una actividad nitrito reductasa que requiere vesiculas de membrana, cytocromo C552 y formiato (o NADH) como donadores de electrones. La via de transferencia de electrones desde el formiato o el NADH incluye un segmento de las cadenas respiratorias membranales del nitrato y el oxigeno que carece de cytocromos de tipo b. Este segmento contiene NADH y formiato deshidrogenasas, y un transportador redox sensible al 2-heptil-4hidroxiquinolina-N-oxido (HQNO). Evidencias indirectas sugieren que este transportador es probablemente una quinona que reaccionaria directamente, o indirectamente por medio de un transportador desconocido, con el cytocromo C552 periplasmico soluble. En este sistema el citocromo C552 parece actuar directamente sobre el nitrito como una nitrito reductasa terminal
Subject(s)
Adrenergic beta-Antagonists , Cell Membrane , Cytochromes , Escherichia coli , Formates , In Vitro Techniques , Nitrite ReductasesABSTRACT
Se siguio la reduccion del clorato por Escherichia coli K-12 mediante la utilizacion de clorato marcado 36 C1-, preparado por oxidacion anodica del ion cloruro. Las celulas redujeron el nitrato y el clorato a velocidades similares. Las vesiculas de membrana y las celulas no acumularon clorato ni sus productos de reduccion (C102-, C10-, C1). El bajo nivel de radioactividad enlazado a celulas o vesiculas puede ser atribuido principalmente a absorcion inespecifica. Estos resultados son discutidos en relacion con la localizacion del sitio enlazante del clorato (y el nitrato) sobre la nitrato reductasa membranal de E. coli