The ameliorative potential of probiotics and/or silymarin on thioacetamide induced hepatotoxicity in rats: histological and immunohistochemical study / El potencial de mejora de los probióticos y / o silimarina sobre la hepatotoxicidad inducida por tioacetamida en ratas: estudio histológico e inmunohistoquímico

Thioacetamide (TAA) is one of the common fungicidal agents that induce liver injury varying from inflammation, necrosis, and fibrosis to cirrhosis. Many recent studies reported the beneficial effect of probiotics and silymarin on hepatotoxicity regardless the causative agents. Therefore, the present study aimed to evaluate the ameliorative role of probiotics and/or silymarin on TAA induced hepatotoxicity in rats via histological, and immunohistochemical methods. Twenty five male albino rats were used for this experiment and were divided into five groups (n=5 rats/group); group I acts as negative control, group II was orally administrated distilled water for six weeks, then injected with TAA (200 mg/kg b.wt./ 5 ml physiological saline/ I.P.) twice a week for another six weeks, group III was treated with probiotics at a dose of 135 mg/ kg b.wt. orally in drinking water daily for six weeks, then injected with TAA (dosage of group II), twice weekly for another six weeks, group IV was treated with silymarin at a dose of 200 mg/ kg b.wt orally 4 times per week for six weeks, then injected with TAA (dosage of group II), twice weekly for another six weeks and group V was treated with combination of both probiotics and silymarin, at the same dosage in groups III and IV respectively then injected with TAA (dosage of group II), twice weekly for another six weeks. Histologically, TAA induced hepatocytes degeneration, inflammatory cells infiltration, and pseudolobular parenchyma as well as, high apoptosis and low proliferation rates that were proved by immunohistochemical staining for caspase 3 and ki-67 respectively. Probiotics and/or silymarin improved the histological feature of hepatocytes, reduced apoptosis and stimulated proliferation. Based on these results, we concluded that the use of probiotics and silymarin combination ameliorates the hepatotoxic effect of TAA in rats more than the use of probiotics or silymarin alone.

La tioacetamida (TAA) es uno de los agentes fungicidas más comunes que inducen lesiones hepáticas que varían desde inflamación, necrosis y fibrosis hasta cirrosis. Muchos estudios recientes informaron el efecto beneficioso de los probióticos y la silimarina sobre la hepatotoxicidad independientemente de los agentes causantes. Por lo tanto, el presente estudio tuvo como objetivo evaluar el papel paliativo de los probióticos y / o silimarina en la hepatotoxicidad inducida por TAA en ratas a través de métodos histológicos e inmunohistoquímicos. Para este experimento se usaron veinticinco ratas albinas y se dividieron en cinco grupos (n = 5 ratas / grupo); el grupo I se usó como control negativo; en el grupo II se administró por vía oral agua destilada durante seis semanas y luego se inyectó TAA (200 mg / kg b.wt./ 5 ml solución salina fisiológica / IP) dos veces por semana durante otras seis semanas; el grupo III se trató con probióticos, dosis diaria de 135 mg / kg b.wt. por vía oral en agua potable, durante seis semanas y luego fue inyectado con TAA (dosis del grupo II), dos veces por semana durante otras seis semanas; el grupo IV se trató con silimarina, con una dosis de 200 mg / kg b.wt por vía oral 4 veces por semana durante seis semanas, luego se inyectó TAA (dosificación del grupo II), dos veces por semana durante otras seis semanas; y el grupo V, se trató con una combinación de ambos probióticos y silimarina con la misma dosis que en los grupos III y IV, respectivamente, luego fueron inyectados con TAA (dosificación del grupo II), dos veces por semana durante otras seis semanas. Histológicamente, la TAA indujo la degeneración de los hepatocitos, la infiltración de células inflamatorias y el parénquima pseudolobular, así como también una apoptosis alta y tasas de proliferación bajas que se probaron mediante tinción inmunohistoquímica para caspasa 3 y ki-67, respectivamente. Los probióticos y / o la silimarina mejoraron la característica histológica de los hepatocitos, redujeron la apoptosis y estimularon la proliferación. En base a estos resultados, concluimos que el uso de la combinación de probióticos y silimarina mejora el efecto hepatotóxico del TAA en ratas más que el uso de probióticos o silimarina individualmente.

Expression of neuronal and non-neuronal markers in the vomeronasal organs of one-humped camel (Camelus dromedarius) and Egyptian water buffalo (Bubalus bubalis) / Expresión de marcadores neuronales y no neuronales en los órganos vomeronasales del camello jorobado y el búfalo egipcio de agua

Fourteen vomeronasal organs (VNOs) of adult males one-humped camels (Camelus dromedarius) and Egyptian water buffaloes (Bubalus bubalis) (n=7/each) were examined immunohistochemically with neuronal markers; synaptophysin (SYP) and glial fibrillary acidic protein (GFAP) to clarify the distribution of the vomeronasal (VN) receptor cells and nerve fibers, in addition to elucidate the existence of non-neuronal elements via S-100 and endothelial nitric oxide synthase (eNOS). In both animals, the VNO was lined medially with VN sensory (olfactory) epithelium and non-sensory (respiratory) epithelium laterally. Immunohistochemically, both animals showed SYP immunolabeling only in the receptor cells of VN sensory epithelium while GFAP labeled the ensheathing cells of the nerve fibers of VNOs. Both S-100 and eNOS labeled non-neuronal elements of the VNO; the supporting cells of sensory epithelium and the VN glands. In view of these observations, we postulate that the VNOs of both animals contain various cells populations that express several neuronal and non-neuronal markers. As well as, SYP and GFAP are suggested as markers for receptor cells and ensheathing cells of nerves of the VNOs respectively. However, no clear differences can be detected in the expressions of neuronal and non-neuronal markers in VNOs of camel and buffalo since they are ruminant species.

En este estudio fueron examinados 14 órganos vomeronasales (OVN) de machos adultos de camellos de una joroba (Camelus dromedarius) y búfalos egipcios de agua (Bubalus bubalis) (n = 7 / cada uno) por inmunohistoquímica con marcadores neuronales, sinaptofisina (SIP) y proteína ácida fibrilar glial (PAFG), para identificar la distribución vomeronasal (VN) del receptor de células y fibras nerviosas, además de dilucidar la existencia de elementos no neuronales a través de S-100 y óxido nítrico sintasa endotelial (ONSe). En ambos animales, el OVN se encuentra alineado en sentido medial con el epitelio sensorial (olfato) y lateralmente con el epitelio no sensorial (respiratorio). En el estudio inmunohistoquímico, ambos animales mostraron marcadores inmunológicos solamente en las células receptoras del epitelio sensorial VN, mientras que la proteína ácida fibrilar glial marcaba las fibras nerviosas de OVN. Tanto el S-100 como la óxido nítrico sintasa endotelial, marcaron elementos no neuronales del OVN, las células de revestimiento del epitelio sensorial y las glándulas VN. En relación a estas observaciones, se postula que los OVN de ambos animales contienen células que expresan varios marcadores neuronales y no neuronales. SIP y la PAFG se sugieren como marcadores para células receptoras y las células gliales de nervios del OVN, respectivamente. Sin embargo, debido a que son especies de rumiantes, no existen diferencias claras que se puedan detectar en las expresiones de los marcadores neuronales y no neuronales en el OVN de camello y búfalo.