A fisioterapia aquática como tratamento de reabilitação em pacientes com fibromialgia: uma revisão integrativa / Aquatic physiotherapy as a rehabilitation treatment in patients with fibromyalgia: an integrative review

Objetivo: Verificar o uso da fisioterapia aquática na reabilitação de pacientes com fibromialgia. Métodos: Trata-se de uma revisão integrativa da literatura, com a busca de artigos realizada nos meses de março e abril de 2020, nas bases de dados eletrônicos Physiotherapy Evidence Database (PEDro) e PubMed, utilizando-se os descritores indexados no Descritores em Ciências da Saúde (DeCS) e no Medical Subject Headings (MeSH). Os critérios de inclusão foram estudos com abordagens observacionais e intervencionistas, publicados entres os anos de 2010 e 2020, disponíveis em texto completo nos idiomas português e inglês. Excluíram-se artigos de revisão, anais de eventos, dissertações, teses e publicações duplicadas. Resultados: Foram encontrados 27 artigos. Após a leitura dos títulos e resumos, foram selecionados para leitura na íntegra e inclusos nesta revisão 8 estudos. Além do alívio da dor, foi verificado os efeitos da fisioterapia aquática em variáveis que otimizam a capacidade funcional e aumentam qualidade de vida. Conclusão: O uso da fisioterapia aquática na reabilitação de pacientes com fibromialgia promove efeitos benéficos como o alívio do quadro álgico, entre outros, influenciando positivamente na qualidade de vida dos indivíduos.

Applicability of papain solutions in immunohematology / Aplicabilidade de soluções de papaína em imuno-hematologia

ABSTRACT Objective: To compare the enzyme activity of different presentations of papain solution to validate in-house preparations. Methods: Two papain solutions were prepared, and the third presentation was a commercial solution. Tests were carried out with samples of red cells typed as weak RhD. Results: In-house prepared papain solutions showed similar enzyme reactivity, and statistically no differences compared to the enzyme activity of the commercial solution. Conclusion: Evaluating the cost-benefit ratio, the in-house prepared papain solutions present more economic advantages, and can be incorporated into immunohematological routines as a way to cope with periods of financial crisis and cost-containment policies.

RESUMO Objetivo: Comparar a atividade enzimática de diferentes apresentações de solução de papaína para validação de preparados in-house. Métodos: Foram preparadas duas soluções de papaína, e a terceira apresentação tratou-se de uma solução comercial. Os testes comparativos das reações enzimáticas foram realizados com amostras de hemácias tipadas como RhD fraco. Resultados: As soluções de papaína preparadas in-house apresentaram reatividade enzimática semelhante e estatisticamente sem diferenças em comparação com a atividade enzimática da solução comercial. Conclusão: Avaliando-se a relação entre custo e benefício, as soluções de papaína preparadas in-house são economicamente vantajosas, podendo ser incorporadas às rotinas imuno-hematológicas como forma de enfrentamento em períodos de crise financeira e em políticas de retenção de gastos.

Pilot study of homologous platelet gel in venous ulcers

Abstract: Background: Venous ulcers represent 70% of the lower limb ulcers. They are difficult to heal, requiring a correct diagnostic and therapeutic approach. Many products have been developed to healing, such as homologous platelet gel obtained from the platelet concentrate exceeding from blood transfusion. Objective: To evaluate the safety and efficacy of homologous platelet gel in venous ulcers compared with hydrocolloid dressing. Method: A pilot randomized clinical trial in patients with venous ulcers. Randomized groups (homologous platelet gel and hydrocolloid groups) were followed for 90 days and were assessed through the evolution of ulcerated area, qualitative analysis of vascularization and adverse events. Both groups used elastic compression. Results: We included 16 participants, with a total of 21 venous ulcers. Both treatments promoted a reduction of the areas of the ulcers in 90 days (mean 69%), there was significant difference between the groups concerning the gradual reduction of the ulcers areas, favorably to the hydrocolloid (70% vs 64%; p <0.01). There were some mild adverse events in both groups. Study limitations: Single-center study with a small number of patients, preventing more accurate assessment of the effects of platelet gel. Conclusion: The homologous platelet gel associated with the elastic compression can be an alternative to the venous ulcer treatment and is safe due to the occurrence of a few mild local adverse events and no serious adverse events. Clinical trials with larger numbers of patients must be performed to maintain the indication of this treatment for venous ulcer.

Acolhimento no processo de trabalho do enfermeiro da atenção básica: estudo qualitativo / Welcoming in the work process of the primary care nurse: qualitative study

Objetivos: analisar a percepção de enfermeiros da atenção básica de saúde sobre acolhimento no processo de trabalho. Métodos: pesquisa qualitativa, realizada com 21 enfermeiras de município do interior paulista. A análise dos dados pautou-se na vertente fenomenológica, modalidade estrutura do fenômeno. Resultados: o acolhimento no processo de trabalho revelou-se como sistematização do trabalho, escuta das necessidades do usuário e estabelecimento de vínculo,organização da demanda para que o usuário consiga agendamento à consulta médica, como demonstração de interesse pelas necessidades do usuário, além de atribuir valor ao mesmo por se tratar do cenário de atenção básica. Considerações finais: observa-se esforços dos diferentes atores para incorporar o acolhimento na mudança do modelo assistencial.

Produção científica em Educação Física e cultura: revisão sistemática / Scientific publication in physical education and culture: systematic review

Introdução: há a busca comum de se delinear um "retrato" da produção científica que possa ser útil para a área na busca de sistematizações possíveis. Bracht et al. (2012, p.31), entendem que tal tarefa é relevante para o desenvolvimento científico. Nessa perspectiva, é que esse estudo se debruça sobre a temática da EF e cultura na literatura acadêmica. Objetivo: compreender as características da produção científica sobre o tema Educação Física e cultura na literatura da América Latina e Caribe disponível no sítio eletrônico do Lilacs. Uma revisão sistemática foi desenvolvida e analisou 55 artigos a partir de oito itens: Periódicos e sua avaliação no sistema Qualis Capes, Área de conhecimento, País de origem dos pesquisadores, Tipo de estudo, Amostragem metodológica, Instrumentos de coleta de dados, Conceito de cultura e Adjetivos associados a ele. Resultados e discussão: verificamos que a produção científica nessa subárea é desvalorizada; a Educação é área privilegiada das publicações; a produção científica brasileira possui destaque nessa temática; há predominância de pesquisas conduzidas a partir de instrumentos de coletas de dados oriundos das Ciências Humanas; o conceito de cultura destaca a dimensão simbólica das relações humanas; o termo "cultura corporal" é o mais frequente nos manuscritos. Conclusão: embora a análise tenha abrangido as generalidades e especificidades da temática EF e cultura na literatura acadêmica, ressaltamos que há a necessidade de se tomar o máximo cuidado ao analisá-las, pois estes caminham mais ao encontro de tendências gerais do que de classificações. No entanto, podemos considerar que, mesmo com as limitações acima identificadas, o esforço empreendido tem validade. Trata-se, portanto, da elaboração de uma síntese do que tem sido produzido pela EF na sua relação com a cultura, o que abre caminhos interpretativos para essa temática.

Introduction: there is a common search to delineate a "picture" of scientific production that may be useful to the area in the search for possible systematizations. It is understood that such a task is relevant to scientific development. In this perspective, this study focuses on the theme of PE and culture in the academic literature. Objective: to understand the characteristics of scientific publication on the subject Physical Education and culture in the literature of Latin America and Caribbean available on the LILACS website. A systematic review was designed with 55 articles from eight analysis items: Journals and their review in the Qualis Capes system, knowledge field, researcher's home country, type of study, methodological sampling, data collection instruments, concept of culture, and adjectives associated with it. We found that the scientific publication in this subarea is undervalued; Education is privileged area of the publications; Brazilian scientific publication has highlighted this issue; there is a predominance of research conducted from data collection instruments arising from the Human Sciences; the concept of culture emphasizes the symbolic dimension of human relations; the "body culture" term is usual in the manuscripts. Conclusion: although the analysis covered the generalities and specificities of the EF and culture in the academic literature, we emphasize that there is a need to take the utmost care when analyzing them, since they are more in line with general tendencies than classifications. However, we can consider that, even with the limitations identified, the effort undertaken is valid. It is, therefore, the preparation of a synthesis of what has been produced by EF in its relationship with culture, which opens interpretive paths for this theme.

Platelet-rich plasma (PRP) applied during total knee arthroplasty / Plasma rico em Plaquetas (PRP) aplicado na artroplastia total do joelho

OBJECTIVE: To evaluate the efficacy of platelet-rich plasma regarding healing, pain and hemostasis after total knee arthroplasty, by means of a blinded randomized controlled and blinded clinical study. METHODS: Forty patients who were going to undergo implantation of a total knee prosthesis were selected and randomized. In 20 of these patients, platelet-rich plasma was applied before the joint capsule was closed. The hemoglobin (mg/dL) and hematocrit (%) levels were assayed before the operation and 24 and 48 h afterwards. The Womac questionnaire and a verbal pain scale were applied and knee range of motion measurements were made up to the second postoperative month. The statistical analysis compared the results with the aim of determining whether there were any differences between the groups at each of the evaluation times. RESULTS: The hemoglobin (mg/dL) and hematocrit (%) measurements made before the operation and 24 and 48 h afterwards did not show any significant differences between the groups (p > 0.05). The Womac questionnaire and the range of motion measured before the operation and up to the first two months also did not show any statistical differences between the groups (p > 0.05). The pain evaluation using the verbal scale showed that there was an advantage for the group that received platelet-rich plasma, 24 h, 48 h, one week, three weeks and two months after the operation (p < 0.05). CONCLUSIONS: In the manner in which the platelet-rich plasma was used, it was not shown to be effective for reducing bleeding or improving knee function after arthroplasty, in comparison with the controls. There was an advantage on the postoperative verbal pain scale. .

OBJETIVOS: Avaliar, por meio de um estudo clínico, randomizado, controlado e cego, a eficácia do plasma rico em plaquetas na cicatrização, dor e hemostasia após artroplastia total do joelho. MÉTODOS: Foram selecionados 40 pacientes que seriam submetidos a prótese total do joelho e randomizados. Em 20 desses pacientes foi aplicado o plasma rico em plaquetas antes do fechamento da cápsula articular. Foram feitas dosagens de hemoglobina (mg/dL) e hematócrito (%) no pré-operatório, após 24 e 48 horas da cirurgia. Foram aplicados o questionário Womac e a escala verbal da dor e medidas as amplitudes de movimento do joelho até o segundo mês pós-operatório. A análise estatística comparou os resultados a fim de comprovar haver diferença entre os grupos em cada um dos momentos da avaliação. RESULTADOS: Medidas do valor da hemoglobina (mg/dL) e hematócrito (%) feitas no pré-operatório, após 24 e 48 horas da cirurgia, não mostraram diferenças significativas entre os grupos (p > 0,05). O questionário Womac e a amplitude de movimento medida no pré-operatório e até os dois primeiros meses também não mostraram diferenças estatísticas entre os grupos (p > 0,05). A avaliação da dor por meio da escala verbal mostrou vantagem no grupo que usou o plasma rico em plaquetas após 24 e 48 horas, uma e três semanas e dois meses de pós-operatório (p < 0,05). CONCLUSÕES: Da maneira com que foi usado, o plasma rico em plaquetas não se mostrou efetivo para reduzir sangramento ou melhorar a função do joelho após a artroplastia em comparação com os controles. Houve vantagem na escala verbal de dor pós-operatória. .

Light-emitting diode effects on combined decellularization of tracheae. A novel approach to obtain biological scaffolds

PURPOSE: To obtain a decellularized tracheal scaffold associating traditional approaches with the novel light-emitting diode (LED) proposal. METHODS: This study was performed with New Zealand adult rabbits weighing 3.0 - 4.0 kg. Different protocols (22) were used combining physical (agitation and LED irradiation), chemical (SDS and Triton X-100 detergents), and enzymatic methods (DNase and RNase). RESULTS: Generally, the cells surrounding soft tissues were successfully removed, but none protocol removed cells from the tracheal cartilage. However, longer protocols were more effective. The cost-benefits relation of the enzymatic processes was not favorable. It was possible to find out that the cartilaginous tissue submitted to the irradiation with LED 630nm and 475 nm showed an increased number of gaps without cells, but several cells were observed to be still present. CONCLUSION: The light-emitting diode is a promising tool for decellularization of soft tissues. .

Lazer e cultura: a atuação do profissional de educação física / Leisure and culture: the role of the physical education professional

Este trabalho tem como objetivo identificar e refletir sobre a atuação do profissional de Educação Física atuante no âmbito do lazer, tendo como base um referencial sociocultural. Historicamente a intervenção deste profissional tem sido orientada por uma visão funcionalista e/ou assistencialista. Para contrapor essas visões partimos de revisão de literatura e de um referencial sociocultural que tem sido base para as produções de um grupo de pesquisa brasileiro. Como resultado, concluimos que a atuação do profissional de Educação Física é de realizar uma mediação de significados a partir dos conteúdos do lazer. Esse trabalho contribui para a revisão de valores e conceitos por parte dos profissionais atuantes no âmbito do lazer.

This work aims to identify and rethink the role of physical education professional acting within the scope of leisure, based on a socio-cultural reference. Historically, the intervention done by this professional has been guided by a functionalist and/or welfare view. To counter these views, we start from a literature review and a socio-cultural reference that has been used as the basis for the academic production done by a Brazilian research group. As a result, we conclude that the role of physical education professional is to conduct a pedagogical mediation for leisure. This work contributes to the revision of values and concepts of professionals working within the domain of leisure.

Formação profissional em lazer: produção acadêmica no período de 2005 a 2009 / Training in leisure: academic production in the period 2005 to 2009

O objetivo deste trabalho é verificar como a questão da formação profissional para atuação no lazer vem sendo discutida no âmbito acadêmico, no período de 2005 a 2009. O lazer é uma área que tem se expandido cada vez mais no Brasil, no entanto, a qualificação de profissionais que atuam nesse campo é um ponto a ser discutido e revisto, tendo em vista que muitos profissionais compreendem o lazer como sinônimo de jogos e brincadeiras. O presente trabalho configura-se como uma pesquisa de natureza qualitativa e quantitativa. Quanto ao tipo, caracteriza-se como pesquisa bibliográfica. A questão da formação profissional evidenciou-se na maioria dos trabalhos, de maneira crítica, alertando para problemas existentes com relação à formação dos profissionais. Uma das críticas apontadas salienta a visão restrita do lazer por parte dos alunos/profissionais.

The objective of this study is to understand how the subject of training on leisure activities has been discussed in the academic community, in the time of the 2005 the 2009. Leisure is an area that has increasingly expanded in Brazil, however, the training of professionals working in the is an issue to be discussed and reviewed, given that many professionals understand leisure as a synonym for fun and games. This work is based on a qualitative and quantitative research. It can be characterized as bibliographic research. The subject of training was critically evidenced by most studies, indicating that problems exist regarding the training of professionals. One of the criticisms emphasizes the restricted vision of leisure by the students / professionals.

Produção acadêmica sobre lazer no brasil: pensando a questão da formação profissional / Academic research on leisure in brazil: considering the professional formation

Esse trabalho tem como objetivo avaliar como tem sido discutida a questão da formação profissional para atuação em lazer no âmbito acadêmico em nosso país. Verificou-se que as pesquisas em lazer emergem a partir de 1970, período em que o Brasil começou a ter efetivamente sistematização e organização das produções acadêmicas nesse campo. Trata-se de um trabalho de revisão de literatura, caracterizando uma discussão de natureza qualitativa. A compreensão do lazer a partir da reflexão teoria-prática, de modo a rever conceitos e valores, faz parte do desafio do profissional que se dedicar em atuar em tal campo.

This work aims to assess how the professional formation on leisure activities has been discussed in the academic sphere in our country. It has been found that research on leisure emerged from 1970, a period when Brazil began to take systematic and effective organization for academic productions in this . This is a work of literature review, featuring a discussion of qualitative nature. The understanding of leisure from the theory and practice, to review concepts and values, is part of the challenge of the professional who engages in this .

Tabalho, HIV/AIDS: enfrentamento e dificuldades relatadas por mulheres / Work and HIV/AIDS: coping and difficulties reported by women / Tabajo, VIH/SIDA: afrontamiento y dificultades señaladas por las mujeres

A AIDS está entre as principais causas de mortalidade em mulheres de idade fértil, o que demonstra a magnitude com que essa infecção tem atingido a população feminina. Esta pesquisa visou compreender o papel do trabalho no enfrentamento da aids entre mulheres. A pesquisa foi realizada no Grupo Humanitário de Incentivo à Vida (GHIV), com 10 mulheres com idade entre 27 e 57 anos e tempo de soropositividade entre 5 e 10 anos. Análises de conteúdos da transcrição na íntegra das entrevistas permitiram identificar as seguintes categorias temáticas: “Sentidos do trabalho”; “Suporte psicossocial e preconceito”; e “Tratamento e absenteísmo”. Como resultado, o trabalho é visto como um lugar de acolhimento e suporte, mas também como um ambiente hostil, com o preconceito ainda visível. A implantação de programas nas instituições, visando minimizar a estigmatização e a discriminação, é vista como uma alternativa para a manutenção da qualidade de vida das pessoas soropositivas.

AIDS is among the leading causes of mortality in women of childbearing age, demonstrating the extent to which this infection has reached the female population. This research aimed at understanding the role of work in responding to AIDS among women. The survey was conducted in the Humanitarian Group of Incentive Life (GHIV), with 10 women, aged between 27 and 57 years and duration of seropositivity between 5 and 10 years. Analysis of the contents of the full transcript of the interviews have identified the following themes: meanings of work, psychosocial support prejudice, treatment and absenteeism as a result, work is seen as a place of welcome and support, but also a hostile environment, with prejudice still visible. The need to develop programs in institutions in order to minimize stigmatization and discrimination is seen as an alternative to maintaining the quality of life of people living with HIV.

El SIDA es una de las principales causas de mortalidad en mujeres en edad fértil, lo que demuestra la magnitud del impacto que esta infección ha llegado a tener en la población femenina. Esta investigación tuvo como objetivo determinar el papel que juega el trabajo en la lucha contra el SIDA entre las mujeres. La encuesta fue realizada por el Grupo Humanitário de Incentivo a la Vida (GHIV), a 10 mujeres seropositivas. El análisis de las transcripciones literales de las entrevistas permitió identificar categorías temáticas. Como resultado, el sitio de trabajo es visto no sólo como un lugar de acogida y apoyo, sino también como un ambiente hostil en donde el sesgo hacia los seropositivos sigue siendo evidente. La necesidad de implementar programas que minimicen el estigma y la discriminación es una alternativa para mejorar la calidad de vida de las mujeres portadoras del VIH.

Lazer e meio ambiente: um estudo a partir dos anais do Encontro Nacional de Recreação e Lazer (Enarel) / Leisure and environment: a study based on the annals from The National Meeting of Recreation and Leisure (Enarel)

Este projeto vincula-se ao Grupo de Pesquisa em Lazer (GPL) e tem por objetivo verificar as produções referentes à temática "lazer e meio ambiente" publicadas nos anais do Encontro Nacional de Recreação e Lazer de 1995 e de 1998 a 2008, buscando identificar se a qualidade dos trabalhos vem acompanhando, proporcionalmente, o aumento de sua quantidade. A pesquisa foi bibliográfica, com a utilização de fichas para mapeamento de dados. Nas análises, verificamos que a temática vem sendo estudada com afinco, sobretudo na última década, com a concentração de produções das instituições de ensino superior e, em sua maioria, em forma de pôsteres, com um baixo aproveitamento das produções em outras esferas. Nas comunicações orais há um aprofundamento e uma ampla percepção dos assuntos, demonstrando não apenas conhecimento técnico das esferas desenvolvidas pelo estudo, mas também suas relações com outras esferas humanas e/ou ambientais.

This project is linked to the Research Group on Leisure and aims at analyzing the literature regarding "leisure and environment" published in annals of the National Meeting of Recreation and Leisure in the years of 1995 and from 1998 to 2008. The objective was to identify whether the quality of these studies is proportionally following their rise in quantity. This bibliographical study made use of data mapping files. The analysis showed that the theme has been studied persistently, especially during the last decade. Productions are focused on institutions of higher education, and mostly in a poster format, which leads to a decreased usefulness of the content in other areas. In oral communication, there is greater depth and a wider perception of the topics, demonstrating not only technical knowledge of the areas developed by the study, but also of their relations with other human and environmental manifestations.

Padronização de dosagem de produto de degradação fibrinogênio/fibrina humano / Human fibrin/fibrinogen degradation product dosage standardization

A hemostasia contribui para integridade e fluidez sanguinea. Após ativação de plaquetas, fatores da coagulação e células endoteliais ocorrem reações enzimáticas gerando trombina e fibrina, principal constituinte do trombo. A plasmina remove o coágulo degradando a fibrina em produtos solúveis (sistema fibrinolítico) e fragmentados (Produtos de Degradação da Fibrina - PDF) onde o Dímero D é o mais estável. Por isso torna-se um importante indicador do risco vascular. Realizaram-se 2 protocolos: LAMB F (Fibrinogênio) e Lamb D (Fragmentado D) produzindo 2786 hibridos com atividade anti PDF. Os hibridos selecionados foram submetidos à técnica de immunoblotting onde foram utilizadas as fontes de antigenos diferentes (Fib comercial, Fib purificado in house, Fragmento D, líquido de drenagem rico em PDF. Com base no reconhecimento das frações protéicas, selecionou-se 2 híbridos (LAMB F1 - 120 e LAMB D3-6), que foram clonados e expandidos em cultura (in vitro) e ascite (in vivo) para obtenção de altas concentrações de AcMm. O líquido ascítico foi purificado (coluna de afinidade)e os anticorpos acoplados em esferas (beads) de agarose. Testes qualitativos foram realizados em paralelo com o produto comercial (Dimer Test Dade Behring) utilizando 20 amostras de pacientes (15 PDF normal e 05 PDF alterado). Os resultados mostraram 100% de concordância entre o produto comercial e os anticorpos anti-PDF produzido no laboratório.

Gel de plaquetas: arcabouço 3D para cultura celular / Platelet gel: 3D scaffold for cell culture

INTRODUÇÃO: O reparo tissular é o objetivo final da cirurgia. A cultura celular requer arcabouço mecânico que dê suporte ao crescimento celular e difusão dos nutrientes. O uso do plasma rico em plaquetas (PRP) como um arcabouço 3D possui diversas vantagens: é material biológico, de fácil absorção pós-transplante, rico em fatores de crescimento, em especial PDGF- ββ e TGF-β que estimula síntese de matriz extracelular na cartilagem. OBJETIVO: Desenvolver arcabouço 3D à base de PRP. MATERIAIS E MÉTODOS: Duas formas foram idealizadas: Sphere e Carpet. Condições estéreis foram utilizadas. O gel de plaquetas permaneceu em cultura celular, observado diariamente em microscópio invertido. RESULTADOS: Ambos arcabouços obtiveram sucesso, com aspectos positivos e negativos. DISCUSSÃO: A forma Sphere não aderiu ao plástico. Observou-se retração do gel e investigação ao microscópio dificultada devido às áreas opacas no campo visual. A forma Carpet não aderiu ao plástico e apresentou-se translúcida. O tempo de estudo foi de 20 dias. CONCLUSÕES: A produção de um arcabouço 3D PRP foi um sucesso, e trata-se de uma alternativa que necessita ser mais utilizado e investigado para que se consolide em uma rota eficiente e confiável na tecnologia de engenharia tissular, particularmente em cultura de tecido cartilaginoso.

INTRODUCTION: Tissue repair has been the ultimate goal of surgery. Cell culture requires a mechanical scaffold that supports cell growth and nutrient diffusion. Using platelet-rich plasma (PRP) as a 3D scaffold presents various advantages: it is a biological material, easily absorbed after transplantation, rich in growth factors, in particular, PDGF-ββ and TGF-β that stimulate extracellular matrix synthesis in cartilage culture. OBJECTIVE: To develop a PRP 3D scaffold. Material and METHODS: Two forms were idealized: Sphere and Carpet. Sterile conditions were used. The platelet gel remained in culture conditions, observed at an inverted microscope on a daily basis. RESULTS: Both forms were successful because they produced a 3D environment that supports cell growth, with positive and negative features. DISCUSSION: The Sphere form didn't attach to the plate. Gel retraction was observed and the investigation at the microscope was difficult, because of the opaque areas in the optical field. The Carpet form didn't retract, and didn't produce opaque areas. Follow-up time was 20 days. CONCLUSIONS: The production of a PRP 3D scaffold was successful, and this is an alternative requiring further investigation in order to establish an efficient and reliable route in tissue engineering technology, particularly in cartilage tissue culture.

Cultura de condrócitos em arcabouço tridimensional: hidrogel de alginato / Chondrocyte cultures in tridimensional scaffold: alginate hydrogel

OBJETIVOS: O presente estudo teve como objetivo cultivar condrócitos retirados da articulação do joelho de coelhos encapsulados em hidrogel de alginato (HA) e caracterizar a produção de matriz extracelular (ECM). MÉTODOS: A cartilagem articular foi removida do joelho de coelhos, com três a seis meses, fragmentada em pedaços de 1mm e submetida à digestão enzimática. Uma concentração de 1x106 céls/mL foram ressuspensas em uma solução de alginato de sódio a 1,5 por cento (w/v), em seguida fez-se o processo de gelatinização em CaCl2 (102 mM), permitindo a formação do HA e cultivo em meio DMEM-F12 durante quatro semanas. A distribuição das células e a ECM foram acessadas através das secções histológicas coradas com e azul de toluidina hematoxilina e eosina (HE). RESULTADOS: Houve um aumento no número e na viabilidade dos condrócitos durante as quatro semanas de cultura. Através das análises histológicas dos HAs corados com azul de toluidina e HE foi possível observar a distribuição definida dos condrócitos no hidrogel, assemelhando-se a grupos isógenos e formação de matriz territorial. CONCLUSÃO: Este estudo demonstrou a eficiência do HA como arcabouço para ser usado na cultura de condrócitos, constituindo uma alternativa no reparo de lesões na cartilagem articular.

OBJECTIVES: The aim of this study was to culture chondrocytes from knee joint cartilage of rabbits encapsulated in alginate hydrogel (HA) and to characterize the production of extracelular matrix (ECM). METHODS: Joint cartilage was obtained from rabbits' knees, three to six months old, fragmented into 1-mm pieces and submitted to enzymatic digestion. A concentration of 1x106 cells/mL were re-suspended into a 1.5 percent (w/v) sodium alginate solution, followed by gel formation process with CaCl2 (102 mM), allowing HA to build for culturing it into a DMEM-F12 medium for four weeks. The distribution of cells and ECM were assessed from histological slices stained toluidine blue and hematoxyline-eosin (HE). RESULTS: There was an increase of the number and viability of the chondrocytes during the four weeks of culture. By assessing the histological sections stained with toluidine blue and HE, we could note the definitive distribution of chondrocytes in the hydrogel, similarly to isogenous groups and territorial matrix formation. CONCLUSION: In this study, the alginate was shown to be an effective scaffold for use in chondrocytes culture, constituting an alternative for repairing joint cartilage defects.

Induction and recovery time for dourados Salminus brasiliensis (Cuvier, 1816) submitted to different concentrations of clove oil Eugenia sp - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v30i3.485 / Tempo de indução e de recuperação de dourados Salminus brasiliensis (Cuvier, 1816), submetidos a diferentes concentrações de óleo de cravo Eugenia sp. - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v30i3.485

The present study evaluated five different concentrations (20, 30, 40, 50 and 60 mg L-1) of clove oil as an anesthetic for dourado juveniles, using induction and recovery time to determine the ideal concentration. Significant difference (p 0.05) was observed among 20, 30, 40 and 60 mg L-1 levels of clove oil. However, 50 mg L-1 concentration did not show significant difference in comparison to 40 and 60 mg L-1. Regarding recovery time, the shortest time was verified in the concentration of 20 mg L-1. Clove oil is effective and safe as an anesthetic for dourado juveniles in levels between 40 and 60 mg L-1.

O presente estudo avaliou o óleo de cravo como anestésico para juvenis de dourado em cinco diferentes concentrações (20, 30, 40, 50 e 60 mg L-¹), utilizando como critério para determinação da concentração ideal os tempos de indução e de recuperação ao efeito do anestésico. Em relação aos tempos de indução, verificou-se diferença significativa (p 0,05) entre as concentrações de 20, 30, 40 e 60 mg L-¹ de óleo de cravo. No entanto, a concentração de 50 mg L-¹ não diferiu estatisticamente dos níveis de 40 e 60 mg L-¹. Quanto à recuperação, o menor tempo foi verificado para a concentração de 20 mg L-¹. O óleo de cravo é eficiente e seguro como anestésico para juvenis de dourado, quando utilizado entre 40 a 60 mg L-¹.

Conjugação e validação de controle isotípico IgG1-FITC para uso em citometria de fluxo / Conjugation and validation of IgG1-FITC isotype control to be used in flow cytometry

Em meados da década de 50 iniciou-se o desenvolvimento da citometria de fluxo, tecnologia que permite verificar características físico-químicas de células ou partículas suspensas em meio fluido. Esta tecnologia utiliza anticorpos monoclonais marcados com fluorocromos como ferramenta de investigação em diversas análises e necessita de controles isotípicos para definição da região negativa (background). Estes controles são constituídos por imunoglobulinas de mesmo isotipo e fluorocromo dos anticorpos testes, sendo o isotiocianato de fluoresceína (FITC) o marcador fluorescente mais utilizado na conjugação de anticorpos. Os controles isotípicos têm como função definir a fluorescência inespecífica (células negativas) e as regiões fluorescentes (células positivas). No presente estudo foi selecionado anticorpo monoclonal murino (AcMm) dirigido contra antígeno eritrocitário canino, produzido no Laboratório de Anticorpos Monoclonais do Hemocentro de Botucatu, o qual reage positivamente com hemácias de cães, mas nunca com leucócitos humanos, tendo, portanto, potencial utilidade como controle negativo em citometria de fluxo. A purificação do AcMm da subclasse IgG1 foi feita por cromatografia de afinidade em Proteína-A Sepharose, e o controle da purificação realizado por eletroforese em géis de ágarose e poliacrilamida (SDS-PAGE). A imunoglobulina purificada foi conjugada ao FITC e filtrado em coluna de Sephadex G-25 para separação das proteínas marcadas e não-marcadas. O AcMm conjugado foi testado contra hemácias de cães, e o êxito da conjugação comprovado por testes de fluorescência, sendo a mediana de positividade de 94,70. Frente a leucócitos humanos a mediana de positividade foi 0,03 contra 0,50 dos reagentes comerciais. Os testes estatísticos não-paramétricos de Wilcoxon e correlação de Spearman comprovaram a eficiência e validam o controle isotípico produzido em comparação aos reagentes comerciais testados.

It was during the 1950's that the development of flow cytometry started, technology that allow to measure physiochemical characteristics of cells or suspended particles in fluid. This technology uses monoclonal antibodies labeled by fluorochromes as investigation tool in several analysis and needs isotype controls to define the negative region (background). These controls are constituted by immunoglobulins of the same isotype and fluorochrome from test antibodies, being fluorescein isothiocyanate (FITC) the most fluorescent marker used in antibody conjugations. The isotype controls have the function to define the unspecific fluorescence (negative cells) and the fluorescent regions (positive cells). In this study was selected monoclonal antibody (mAb) against canine erythrocyte antigen, produced in the Monoclonal Antibodies Laboratory - Blood Center of Botucatu, which reacts positively with dog red blood cells, but never with human leukocytes, having therefore, utility potential as negative control in flow cytometry. The purification mAb of IgG1 subclass was made by affinity chromatography in Sepharose Protein-A and the purification control was performed by electrophoresis in ágarose and polyacrylamide gels (SDS-PAGE). The purified immunoglobulin was conjugated to FITC and after was filtered in Sephadex G25 column to separation of labeled and unlabeled proteins. The conjugated mAb was tested against dog red blood cells and the conjugation success was verified by fluorescence tests, being the median positivity of 94.70. To the human leucocytes the positivity median was 0.03 against 0.50 of the commercial reagents. The nonparametric statistical tests of Wilcoxon and the correlation Spearman showed the efficiency and validate the isotype control produced in relation to the tested commercial reagents.

Reinserção no mercado de trabalho: barreiras e silêncio no enfrentamento da exclusão por pessoas com hiv/aids / Replacement in the work market: barriers and silence in the coping of the exclusion people with HIV/AIDS

RESUMO: As pessoas que vivem com HIV/aids, além de enfrentar as dificuldades decorrentes da infecção pelo vírus, têm que lidar com problemas de ordem econômica, como a exclusão do mercado de trabalho. Tal exclusão traz como conseqüências as dificuldades materiais e o afastamento do portador do convívio social, prejudicando a auto-estima e o acesso a alguns recursos psicossociais para o enfrentamento ao HIV/aids. Apesar da transmissão ser pouco provável nos locais de trabalho, esse fato tem sido usado por empregadores como pretexto para demissão ou recusa destas pessoas. Esta pesquisa teve como objetivo identificar dificuldades encontradas para a reinserção de pessoas soropositivas ao HIV no mercado de trabalho. Foram realizadas entrevistas semi-estruturadas com 10 pessoas, de ambos os sexos, com tempo médio de 5 anos de soropositividade ao HIV, média de 34 anos de idade e escolaridade mínima de ensino fundamental. As entrevistas foram feitas de acordo com procedimentos de evocação/enunciação/verificação, visando eliminar os efeitos de indução de respostas. Os resultados indicam que absenteísmo, estigmatização, atrasos, danos à saúde provocados por doenças oportunistas e efeitos colaterais de medicamentos são fortes determinantes das dificuldades para a reinserção no mercado de trabalho. Também, o medo de estigmatização ou rejeição impede a socialização do status de soropositividade para com os colegas de trabalho e chefias, determinando uma falta de perspectiva quanto às oportunidades para conseguir um novo emprego. Tais resultados constituem elementos subsidiários importantes para a concepção de programas que visam a recolocação e orientação dessas pessoas no mercado de trabalho.

Obtenção e caracterização de anticorpo monoclonal murino anti-fator VIII da coagulação sangüínea / Attainment and characterization of murine monoclonal anti-factor VIII antibodies

Entre os avanços da engenharia celular e biotecnologia nas últimas décadas, destaca-se a produção de anticorpos monoclonais murinos (AcMm) utilizados no aprimoramento diagnóstico nas rotinas laboratoriais. A produção de fator VIII de alta pureza sempre foi o desejo e a preocupação das indústrias de hemoderivados para tratamento de pacientes portadores de hemofilia A, porém este produto inexiste no Brasil, sendo necessária sua obtenção no mercado internacional a custos elevados. O trabalho tem por objetivo a produção de AcMm anti-fator VIII humano (FVIII H) através da expansão dos clones e caracterização imunoquímica do anticorpo. Camundongos Balb/c foram imunizados com FVIII H purificado como também proveniente de crioprecipitado e as células esplênicas dos animais foram fusionadas com células mielomatosas murinas segundo o método descrito por Kohler e Milstein para produção de híbridos em cultura. Foram testados 1.983 híbridos dos quais 105 foram submetidos à clonagem. Destes, 39 obtiveram monoclonalidade e 7 destes clones foram caracterizados através de técnicas de immunoblotting. Foram submetidas à purificação por cromatografia três imunoglobulinas de diferentes classes pertencentes aos clones LAMB1-10A1A4, LAMB1-17A1A1 e LAMB1-24A2A1. A imunoglobulina purificada pertencente ao clone LAMB1-10A1A4 foi adsorvida em coluna de imunoafinidade para purificação de concentrado de FVIII proveniente de crioprecipitado plasmático.

Among the advances in cellular engineering and biotechnology over the last decades, the production of murine monoclonal antibodies (AcMm), used to improve laboratory diagnoses, stands out. The production of very pure factor VIII has always been a concern of suppliers of blood products to treat patients with hemophilia A and this product is still not produced in Brazil. Hence, it can only be attained on the international market at a high cost. The aim of this work was to produce AcMm anti-factor VIII human (FVIIIh) by expanding clones and characterizing the antibodies by immunochemistry. Balb/c mice were immunized with FVIII both purified and from cryoprecipitation and the splenic cells of the animals were fused with myelomatous murine cells according to the method described by Kohler and Milstein to produce hybrids in a culture. A total of 1983 hybrids were tested and 105 were selected for cloning. Of these, 39 developed monoclonality and 7 of these clones were characterized through immunoblotting techniques. Three immunoglobulins from different classes, LAMB1-10A1A4, LAMB1-17A1A1 and LAMB1-24A2A1, were submitted to chromatography for purification. The purified immunoglobulin from the LAMB1-10A1A4 clone was adsorbed in the immunoaffinity column to purify the factor VIII concentrate coming from the plasmatic cryoprecipitate.