Suscetibilidade antimicrobiana in vitro dos Staphylococcus coagulase negativa oculares / In vitro antimicrobial susceptibility of coagulase negative staphylococcal ocular isolates

OBJETIVO: Avaliar a suscetibilidade, in vitro, de Staphylococcus coagulase negativa (SCoN), isolados da conjuntiva e córnea, à meticilina, às fluoroquinolonas e aos aminoglicosídeos. MÉTODOS: Foram analisadas retrospectivamente 707 amostras oculares de SCoN quanto à suscetibilidade aos antimicrobianos pelo teste de disco difusão, durante o período de janeiro de 2000 a dezembro de 2003. RESULTADOS: Houve um aumento do número de SCoN em isolados da conjuntiva (n=57, ano de 2000 e n=153, ano de 2003) e da córnea (n=28, ano de 2000 e n=78, ano de 2003). A freqüência de SCoN resistentes à meticilina isolados da conjuntiva e da córnea, aumentou (1,8 a 19,6 por cento e 14,3 a 29,3 por cento respectivamente) durante o período avaliado. Não houve diferença estatisticamente significante nos anos estudados, nos percentuais de SCoN resistentes às fluoroquinolonas, nas conjuntivas (ofloxacina: 1,8 a 7,8 por cento e ciprofloxacina: 3,5 a 9,2 por cento) e nas córneas (ofloxacina: 14,3 a 9,0 por cento e ciprofloxacina:14,3 a 10,3 por cento). Avaliando-se os resultados das amostras isoladas da conjuntiva, observou-se um aumento na resistência à tobramicina: 15,8 a 34,6 por cento; e à gentamicina: 10,5 a 25,5 por cento; mas não houve mudança no perfil de resistência das amostras da córnea à tobramicina: 28,6 a 26,9 por cento e à gentamicina: 21,4 a 23,1 por cento). CONCLUSÃO: Houve diminuição na suscetibilidade in vitro dos SCoN para meticilina, tobramicina e gentamicina. As fluoroquinolonas, representadas pela ofloxacina e ciprofloxacina, demonstraram ter um padrão estável de suscetibilidade in vitro.

PURPOSE: To assess the in vitro susceptibility of conjunctival and corneal coagulase negative Staphylococcus (CoNS) to methicillin, fluoroquinolones and aminoglycosides. METHODS: A total of 707 conjunctival and corneal CoNS disk diffusion test results were retrospectively analyzed, from January 2000 through December 2003. RESULTS: From 2000 to 2003, there was an increase in number of CoNS isolated from conjunctiva (n=57 to n=153) and cornea (n=28 to n=78). The frequency of conjunctival and corneal methicillin-resistant CoNS also increased (1.8 to 19.6 percent and 14.3 to 29.3 percent, respectively). There was no statistically significant difference between fluoroquinolones-resistant CoNS percentages in conjunctiva (ofloxacin: 1.8 to 7.8 percent and ciprofloxacin: 3.5 to 9.2 percent) and cornea (ofloxacin: 14.3 to 9.0 percent and ciprofloxacin: 14.3 to 10.3 percent). Evaluating the results of the conjunctival samples, there was increased resistance to tobramycin (15.8 to 34.0 percent) and to gentamycin (10.5 to 25.5 percent). There was no change in resistance of corneal isolates to tobramycin (28.6 to 26.9 percent) and to gentamycin (21.4 to 23.1 percent). CONCLUSIONS: there was a decrease in in vitro CoNS susceptibility to methicillin, tobramycin and gentamycin. Fuoroquinolones represented by ofloxacin and ciprofloxacin demonstrated stable in vitro susceptibility.

Laboratory detection methods for methicillin resistance in coagulase negative Staphylococcus isolated from ophthalmic infections

PURPOSE: To evaluate different methods of oxacillin susceptibility testing of ocular isolates, considering polymerase chain reaction (PCR) as the 'gold standard', and to compare the in vitro susceptibility to oxacillin with that of other antimicrobials used in ophthalmologic practice. METHODS: The Vitek gram-positive identification card was used to identify ocular coagulase negative Staphylococcus species. The presence of the mecA gene was determined by the polymerase chain reaction assay with a combination of two primer sets (mecA and 16S rRNA) in a single region. Results were analyzed and compared with other oxacillin susceptibility methods: PBP2a detection by rapid slide latex agglutination test (SLA); oxacillin E-test; the Vitek automated gram-positive susceptibility card (GPS-105); the oxacillin salt agar screening test (OSAS) at a concentration of 6.0, 1.0 and 0.75 æg oxacillin per ml and the cefoxitin disk diffusion test (CDD). Automated susceptibility was also determined to other antimicrobial agents (fluoroquinolones, penicillin G, amoxicillin-ampicillin, cefazolin, ampicillin-sulbactam, erythromycin, clindamycin, gentamicin, tetracycline, trimethoprim-sulfamethoxazole, vancomycin and rifampin. RESULTS: Of the 69 CoNS isolates tested, 71 percent were mecA-positive and 29 percent mecA-negative. All methods tested had a statistically significant agreement with polymerase chain reaction. There was a tendency of positive polymerase chain reaction predomination among the S. epidermidis isolates in comparison to non-epidermidis isolates, although this was not statistically significant (78.3 percent vs. 56.5 percent; chi2= 2.54; P= 0.11). The oxacillin salt agar screening test (0.75 æg oxacillin/ml) showed the best performance, with 100 percent sensitivity and negative predictive value; 95 percent specificity and 98 percent positive predictive value. Using the E-test, the mecA-positive isolates were statistically significantly more...

OBJETIVOS: Avaliar os diferentes métodos de suscetibilidade à oxacillina, em isolados oculares, considerando a reação em cadeia da polimerase (PCR) como "padrão-ouro" e comparar a suscetibilidade in vitro para outros antimicrobianos de uso oftalmológico. MÉTODOS: O sistema automatizado Vitek foi utilizado para identificar as diferentes espécies de Staphylococcus coagulase negativo (SCoN). A presença do gene mecA foi determinado pela reação em cadeia da polimerase com a combinação de 2 "primer" sets (mecA e 16S rRNA) em uma única região. Estes resultados foram analisados e comparados com outros métodos de suscetibilidade à oxacilina: detecção da proteína PBP2a pelo teste de aglutinação em látex (SLA); E-test oxacilina; o sistema automatizado Vitek (GPS-105); o teste de triagem em ágar (OSAS) com oxacilina nas concentrações de 6,0, 1,0 e 0,75 æg oxacilina por ml e o teste de disco difusão com cefoxitina (CDD). A suscetibilidade automatizada foi obtida para os seguintes agentes antimicrobianos: fluorquinolonas, penicilina G, amoxicilina-ampicilina, cefazolina, ampicilina-sulbactam, eritromicina, clindamicina, gentamicina, tetraciclina, sulfametoxazol-trimetoprima, vancomicina e rifampicina. RESULTADOS: Dos 69 Staphylococcus coagulase negativo testados, 71 por cento foram mecA-positivos e 29 por cento, mecA-negativos. Todos os métodos testados apresentaram concordância estatisticamente significante com a reação em cadeia da polimerase. Houve tendência à predominância da positividade da reação em cadeia da polimerase entre os S. epidermidis comparado aos não-epidermidis, embora sem significância estatistica (78,3 por cento vs. 56,5 por cento; chi2= 2,54; p=0,11). O teste de triagem em ágar (0,75 æg oxacilina/ml) apresentou a melhor performance com resultados de: 100 por cento de sensibilidade e valor preditivo negativo, 95 por cento de especificidade e 98 por cento de valor preditivo positivo. Os isolados mecA-positivos foram estatisticamente...

Fluoroquinolone susceptibilities to methicillin-resistant and susceptible coagulase-negative Staphylococcus isolated from eye infection

PURPOSE: To evaluate the fluoroquinolone susceptibilities of ocular isolate coagulase-negative staphylococci (CoNS), identified at the Microbiology Laboratory - UNIFESP. DESIGN: Experimental laboratory investigation. METHODS: The minimum inhibitory concentrations (MICs) of 21 strains of methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci (MRCoNS) and 22 methicillin-sensitive coagulase-negative staphylococci (MSCoNS) to ciprofloxacin, ofloxacin, gatifloxacin and moxifloxacin were determined, using the E-test method standardized by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI/NCCLS). RESULTS: The MIC90s (µg/ml) for the second generation of tested fluoroquinolones were higher than the fourth generation, especially for the methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci group. CONCLUSION: Our results indicate that methicillin-sensitive coagulase-negative staphylococci are more susceptible to quinolones than are methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci and that fourth generation fluoroquinolones appear to be more potent, affecting even coagulase-negative staphylococcal strains resistant to second generation fluoroquinolones.

OBJETIVOS: Avaliar a suscetibilidade a fluorquinolonas dos Staphylococcus coagulase-negativo (SCoN) identificados no Laboratório de Microbiologia Ocular da Unifesp. MÉTODOS: Foi determinada a concentração inibitória mínima de 21 cepas de SCoN meticilina-resistentes e 22 meticilina-sensíveis para ciprofloxacina, ofloxacina, gatifloxacina e moxifloxacina, utilizando o E-test estandartizado pelo CLSI/NCCLS. RESULTADOS: Os MIC90 (µg/ml) de 43 SCoN isolados para fluorquinolonas de segunda geração foram maiores do que os de quarta geração, principalmente para o grupo dos meticilina-resistentes. CONCLUSÃO: Nossos resultados indicam que Staphylococcus coagulase-negativo meticilina-sensíveis são mais suscetíveis às quinolonas do que os Staphylococcus coagulase-negativo meticilina-resistentes, fluorquinolonas de quarta geração parecem ser mais potentes, cobrindo inclusive cepas de Staphylococcus coagulase-negativo resistentes à segunda geração de fluorquinolonas.

Molecular subtyping of Campylobacter jejuni subsp. jejuni strains isolated from different animal species in the state of São Paulo, Brazil

O objetivo do presente trabalho foi caracterizar geneticamente estirpes de Campylobacter jejuni subsp. jejuni isoladas de humanos e de diferentes origens animais (bovinas, suínas, cães, primatas, javalis, suínos e aves de corte). Um total de 828 amostras (fezes, carcaças, fetos abortados e útero histerectomizado) foram analisadas por métodos de rotina bacteriológica e 36 estirpes de C. jejuni foram isoladas. Trinta estirpes de origem fecal humana foram obtidas de laboratórios de análises clínicas da cidade de São Paulo. As 66 estirpes de C. jejuni isoladas foram submetidas à caracterização genética. Oligonucleotídeos baseados no gene fla A foram usados na reação de polimerase em cadeia (PCR) e amplificou um fragmento de 702 pb. Os produtos obtidos pela PCR foram avaliados pelas técnicas de seqüenciamento e análise genealógica. Análise da variabilidade genética das 66 estirpes revelou 44 diferentes subtipos de C. jejuni. Um subtipo de origem humana apresentou seqüência idêntica à de C. jejuni depositada no GenBank (GENBANK acesso número AF050186). A subtipagem das estirpes de C. jejuni baseadas no seqüenciamento da região variável do gene fla A e na análise do alinhamento das seqüências pelo método da Máxima Parcimônia, mostraram-se altamente discriminatórios fornecendo melhores condições para a correta diferenciação entre estirpes originárias de surto e as isoladas esporadicamente. Este foi o primeiro estudo de subtipagem molecular de estirpes de C. jejuni de origem humana e animal utilizando a técnica do seqüenciamento com análise genealógica realizado no Estado de São Paulo, Brasil.

Proteases (caseinase and elastase), hemolysins, adhesion and susceptibility to antimicrobials of Stenotrophomonas maltophilia isolates obtained from clinical specimens

Forty-six S. maltophilia isolates obtained from hospital clinical specimens were studied for protease (caseinase and elastase) production, hemolytic activity, adhesion to HEp-2 cells, plastic and glass. Susceptibility to antimicrobial agents was also evaluated. The majority of isolates were obtained from respiratory tract secretions of patients using medical devices. All the isolates grown overnight were able to hydrolyze casein at 30ºC and 37ºC. After 72h, all the isolates hydrolyzed elastase at 30ºC and 40 isolates (87 per cent) at 37ºC. Most of the isolates presented hemolytic activity after 96h of incubation at both temperatures. Rabbit blood showed the hightest hemolytic activity, after 96h 61(per cent) and 98(per cent) of tested isolates presented b-hemolysis at 30ºC and 37ºC, respectively. All isolates were susceptible to trimethoprim-sulfametoxazole and were resistant to most b-lactams tested. By the dilution method, S. maltophilia showed a high susceptibility to ticarcillin-clavulanate and a lower susceptibility to ciprofloxacin than the agar diffusion. The isolates showed adhesion to HEp-2 cells, plastic and glass. The proteolytic activities and adhesion to inanimate surfaces detected in S. maltophilia can be related to the pathogenesis of this bacterium and/or medical device colonization which favors the development of nosocomial infections.

Avaliaçäo in vitro de macrolídeos e antibióticos B-lactâmicos orais ante a microrganismos isolados no tato respiratório / In vitro evaluation of oral macrolides and B-lactam antibiotics against isolated Pathogens from the respiratory tract

No período de setembro de 1999 a julho de 2000, analisamos a atividade in vitro de seis antimicrobianos, respectivamente, azitromicina, claritromicina, amoxicilina, amoxicilina/ácido clavulânico, cefprozil e cefaclor ante a um total de 597 amostras bacterianas isoladas do trato respiratório superior e inferior de pacientes da comunidade, sem restriçäo de faixa etária, assim distribuídas: 247 cepas de H. influenzae, 147 S. aureus, 114 S. pneumoniae, 51 S. pyogenes e 38 M catarrhalis. A determinaçäo da Concentraçäo Inibitória Mínima (MIC) foi realizada pelo método do Etest e interpretadas de acordo com critérios padronizados pelo NCCLS. Entre as 247 cepas de H. influenzae, 9,7 porcento eram produtoras de B-lactamase, sendo que 100 porcento destas cepas foram sensíveis à amoxicilina/ác. clavulânico e cefaclor, 98 porcento à cefprozil, 96 porcento à azitromicina e 90 porcento à claritromicina. Das 147 cepas de S. aureus, 100 porcento eram sensíveis à oxacilina, amoxilina/ác. clavulânico, cefprozil e cefaclor, 71 porcento à claritromicina e 68 porcento à azitromicina. Entre as 114 cepas de S. peneumoniae, nenhuma cepa apresentou resistência total à penicilina, 14 cepas apresentaram resistência intermediária para penicilina, sendo que 100 porcento das cepas foram sensíveis à amoxicilina e amoxicilina/àc. clavulânico, 99 porcento à cefprozil e cefaclor, 88 porcento à azitromicina e 86 porcento à claritromicina. Entre as 14 cepas de pneumococos com resistência intermediária para penicilina, 3 cepas eram resistentes à azitromicina e 4 cepas à claritromicina. Entrre as 51 amostras de S. pyogenes, 4 cepas apresentaram resistência à azitromicina e claritromicina. Para M. catarrhalis, 100 porcento das cepas eram produtoras de B-lactamase e o MIC para azitromicina, claritromicina, amoxicilina, amoxicilina/ác. clavulânico, cefprozil e cefaclor foram 0,25; 0,25; 3; 0,25; 4 e 1,5 ug/ml, respectivamente.(au)

Avaliaçåo do "E Teste", um novo método para determinaçåo da concentraçÅo inibitória mínima de antimicrobianos / Evaluation of the \"E Test\", a new method for minimal inhibitory concentration (MIC) determination

O "E Teste" é um novo conceito para testes quantitativcos de sensibilidade, baseado em um gradiente pré definido do antibiótico incorporado em uma fita plástica. É usado para determinar a concentraçåo inibitória mínima (MIC) de antibióticos frente a bactérias crescendo em ágar. Os resultados obtidos pelo "E Teste" foram avaliados comparando-se com o método de diluiçåo em ágar e com o método da difusåo do disco, frente a 5 antimicrobianos e 50 bactérias. A correlaçåo entre as MICs pelos métodos da diluiçåo e "E Teste" foi boa, com 95,6 por cento dos resultados dentro de uma faixa de até 2 log2 das diluiçöes das drogas, num total de 250 testes. O "E Teste" é uma técnica versátil e confiável para determinaçåo de MICs de diferentes antibióticos em Laboratórios Clínicos de rotina

Ofloxacina no tratamento da uretrite gonocócica aguda masculina / Ofloxacin in the treatment of male acute gonococcal urethritis

Säo apresentados os resultados obtidos com o emprego de um derivado da quinolona, a Ofloxacina, no tratamento da uretrite gonocócica masculina, em estudo aberto de 20 pacientes que procuraram o Serviço de Doenças Sexualmente Transmissíveis da Faculade de Saúde Pública de Säo Paulo. A ausência de tratamento anterior, o exame bacterioscópico e a cultura em meio de Thayer-Martin modificado foram os critérios de inclusäo, sendo entäo administrada, dose única de 400 mg da Ofloxacina por via oral, havendo o desaparecimento da Neisseria gonorrhoeae em 24-48 horas, em 100% dos casos. Cefaléia passageira foi observada em dois pacientes. Os resultados observados levam a concluir que o medicamento apresenta-se como opçäo útil no tratamento da uretrite gonocócica aguda masculina

Perihepatitis gonocócica: caso clínico / Gonococical perihepatitis: clinical case

Los autores presentan la discusión de un caso de perihepatitis gonocócica (Síndrome de Fitz-Hugh-Curtis), registrado en la Sección de ETS de la Facultad de Salud Pública de la Universidad de Sao Paulo, Brasil

Sorogrupagem de Cryptococcus neoformans: nota epidemiológica / Cryptococcus neoformans serogrouping: epidemiologic note

Foram sorogrupados onze amostras de Cryptococcus neoformans, isolados de pacientes com SIDA, através dos meios glicina-cicloheximida-vermelho de fenol GCP), glicina-vermelho de fenol (GOP) e L-arginina-glicina-azul de bromotimol (CGB). Dez amostras foram isoladas a partir de líquido cefalorraquidiano, sendo nove provenientes de pacientes do sexo masculino e uma paciente do sexo feminino. Uma única amostra foi isolada de ferimento cutâneo. Todas as amostras se comportaram como pertencentes ao sorogrupo A-D

Biossegurança em laboratórios de DST / Biosafety in DST laboratories

O Laboratório de Doenças Sexualmente Transmissíveis (DST) caracteriza-se como uma unidade de microbiologia. Biossegurança em Laboratório de Microbiologia näo é simples programa de proteçäo individual, compreende um conjunto de preocupaçöes especiais que objetivam um amplo espectro de proteçäo. Säo documetnados casos de infecçöes acidentais inerentes a agentes etiológicos de que objetivam um amplo espectro de proteçäo. Säo documentados casos de infecçöes acidentais inerentes a agentes etiológicos de DST, em como fornecidas informaçöes quanto aos critérios e padröes de proteçäo a serem adotados nestes laboratórios

GO-SLIDER como meio de transporte, avaliaçäo técnica / GO-SLIDE as a transport medium, technical evaluation

Testa-se o GO-SLIDE, para cultura e transporte de Neisseria gonorrhoeae, como sistema de transporte. Säo estudadas as variáveis temperatura e tempo de transporte, sendo mantidos constante teor de umidade e de CO2. O sistema apresentou seu melhor rendimento entre 20,0-C e 35,0-C de temperatura de transporte

Neisseria gonorrhoeae produtora de penicilinase: primeira cepa isolada em Säo Paulo, SP (Brasil) / Penicillinase producing Neisseria gonorrhoeae: the 1st isolated strain in Säo Paulo, SP (Brazil)

Relata-se o primeiro caso identificado de Neisseria gonorrhoeae produtora de penicilinase (NGPP) no Estado de Säo Paulo, Brasil, demonstrando a necessidade de mensurar os índices de prevalência destas cepas na populaçäo

"Chlamydia trachomatis": estudo comparativo entre o isolamento em cultura de células e o exame direto, no diagnóstico da uretrite masculina / Chlamydia trachomatis: comparative study between isolation with cell culture and direct examination, in the diagnosis of male urethitis

Um método direto para identificaçäo de C. trachomatis em secreçöes uretrais, utilizando anticorpo monoclonal conjugado à fluoresceína, foi estudado comparativamente com o isolamento em cultura de células McCoy. Em 74 amostras consecutivas examinadas, näo selecionadas, houve correlaçäo de 90,6% entre os dois métodos. O teste direto demonstrou ser rápido, de técnica simples e de boa sensibilidade, o que o recomenda como de utilizaçäo rotineira em laboratórios que näo tenham condiçöes de realizar isolamento de clamídia em cultura celular

Estudo comparativo entre o ensaio imunoenzimático (ELISA) e o método tradicional no diagnóstico e controle de cura da gonorréia / Comparative study between an immunoenzimatic essay (ELISA) and the traditional method for the diagnosis and cure control of gonorrhea

Em quatro grupos distintos de pacientes, os autores comparam os métodos tradicionais de diagnóstico da gonorréia (bacterioscopia e cultura em meio seletivo) com a técnica imunoenzimática (ELISA). Os pacientes estudados foram divididos em grupos de acordo com o quadro clínico, sendo o estudo dirigido para negatividade esperada (A), positividade esperada (B), positividade e negatividade aleatórias (C) e finalmente o grupo de positividade esperada, antes (D1) e após o tratamento específico (D2). A comparaçäo se fez em termos de senibilidade e especificidade para os quatro grupos de pacientes estudados. Os resultados caracterizam o método imunoenzimático como eficaz no diagnóstico da gonorréia, mas de interpretaçäo cautelosa quando se trata de controle de cura

Endocardite infecciosa causada por Corynebacterium do grupo JK. relato de caso / Infective endocarditis caused by Corynebacterium group JK. a case report

Os autores relatam, pela primeira vez em nosso meio, um caso de endocardite infecciosa causada por Corynebacterium do grupo JK. Tratava-se de paciente de 70 anos submetido a um implante de prótese valvar aórtica (Starr-Edwards), 4 meses antes do início dos sintomas