Botulism in Brazil, 2000-2008: epidemiology, clinical findings and laboratorial diagnosis / Botulismo no Brasil, 2000-2008: epidemiologia, achados clínicos e diagnóstico laboratorial

Botulism is a rare and potentially lethal illness caused by Clostridium botulinum neurotoxin. We describe the findings of a laboratorial investigation of 117 suspected cases of botulism reported to the surveillance system in Brazil from January 2000 to October 2008. Data on the number and type of samples analyzed, type of toxins identified, reporting of the number of botulism cases and transmission sources are discussed. A total of 193 clinical samples and 81 food samples were analyzed for detection and identification of the botulism neurotoxin. Among the clinical samples, 22 (11.4 percent) presented the toxin (nine type A, five type AB and eight with an unidentified type); in food samples, eight (9.9 percent) were positive for the toxin (five type A, one type AB and two with an unidentified type). Of the 38 cases of suspected botulism in Brazil, 27 were confirmed by a mouse bioassay. Laboratorial botulism diagnosis is an important procedure to elucidate cases, especially food-borne botulism, to confirm clinical diagnosis and to identify toxins in food, helping sanitary control measures.

Botulismo é uma doença rara e potencialmente letal, resultante da ação de uma neurotoxina produzida pelo Clostridium botulinum. No presente estudo, estão descritos os resultados da investigação laboratorial de 117 casos suspeitos de botulismo notificados ao sistema de vigilância, ocorridos no Brasil no período de janeiro de 2000 a outubro de 2008. Os dados obtidos sobre as fontes de transmissão, os tipos de toxina identificados e de amostras analisadas serão discutidos. Foram analisadas 193 amostras clínicas e 81 amostras de alimentos para detecção e identificação de neurotoxina botulínica. Entre as amostras clínicas, 22 (11,4 por cento) amostras apresentaram resultado positivo para toxina (nove do tipo A, cinco do tipo AB e em oito o tipo não foi identificado) e entre as amostras de alimentos, oito (9,9 por cento) foram positivas (cinco do tipo A, uma do tipo AB e em duas o tipo não foi identificado). Dos 38 casos considerados positivos para botulismo, 27 foram confirmados pelo bioensaio em camundongo. O diagnóstico laboratorial de botulismo é importante para elucidação dos casos, principalmente de botulismo alimentar, para confirmação dos diagnósticos clínicos e identificação das toxinas nos alimentos, provendo subsídios para as medidas de controle sanitário.

Detecção de Vibrio cholerae O1 em ostras utizando anticorpo monoclonal em ensaio de aglutinação / Use of monoclonal antibody for detecting Vibrio cholerae O1 in oysters by means of agglutination test

O V. cholerae sorogrupo O1 é o agente etiológico da cólera pandêmica, sendo considerado dentre os víbrios patogênicos ao homem, o mais importante. Os sintomas das infecções por esta bactéria variam de diarréia branda a doença grave podendo até levar a óbito. Dentre os alimentos marinhos, as ostras representam uma das principais vias na transmissão de cólera. Os métodos convencionais para detecção do V. cholerae O1 são laboriosos e demorados havendo, portando, a necessidade de implantar métodos rápidos, sensíveis, específicos, simples e de baixo custo. O objetivo deste estudo foi avaliar a técnica de aglutinação de partículas de látex sensibilizadas com anticorpo monoclonal (AcMo) na detecção de V. cholerae O1 em ostras, contaminadas laboratorialmente. A técnica de aglutinação com látex sensibilizado detectou 1,2x102 UFC da bactéria (diluição 1/32). As amostras de ostras utilizadas para contaminação originalmente não continham V. cholerae, mas outras bactérias foram detectadas, tais como: Proteus mirabilis, Pseudomonas spp. e outros víbrios. O presente estudo demonstrou que a detecção de V. cholerae em alimentos foi reduzida para 18 horas, considerando que pela metodologia convencional a análise é finalizada, em média, em 7 dias. O AcMo produzido apresentou uma sensibilidade eespecificidade de 100% para V. cholerae.

Occurrence of Salmonella spp and Escherichia coli O157: H7 in raw meat marketed in São Paulo city, Brazil, and evaluation of its cold tolerance in ground beef

Among foodborne diseases, salmonellosis has been considered one of the major public health problems in many countries worldwide. Escherichia coli O157:H7 has been another important foodborne pathogen due to its increasing incidence as a human disease agent and its association with various kinds of foods, especially those from animal origin. Incidence of Salmonella spp. and E. coli O157:H7 in the raw meat (bovine, swine and chicken) marketed in São Paulo - Brazil was determined in 253 samples. Twenty-three samples (9.1%) were positive for Salmonella spp. Among these, 11 different serovars were identified, and S. Enteritidis was found to be the most prevalent. All the tested samples were negative for E. coli O157:H7. Salmonella Enteritidis (the predominant serovar) and E. coli O157:H7 were also tested for their cold-temperature sensitiveness in ground beef kept under refrigeration (4ºC) for 120 days and under freezing (-18ºC) for up to 90 days. E. coli O157:H7 inoculated into ground beef was more sensible to refrigeration and freezing temperatures than S. Enteritidis, but both maintained viability under freezing condition up to 90 days

Controle de qualidade em laboratório de microbiologia de alimentos e avaliação de desempenho de meios de cultura no isolamento de salmonella ssp / Quality control in food microbiology laboratory and evaluation of performance from the culture medium in the salmonella spp isolation

Os dados de laboratório devem ser reais e confiáveis, pois orientam os sistemas de controle de patógenos aplicáveis em toda a cadeia de produção de alimentos, especialmente para os de incidência e severidade consideráveis. Dentre as bactérias patogênicas de maior interesse à saúde pública estão as do gênero Salmonella, que podem estar presentes nos alimentos em baixos números ou em estado fisiológico de stress, dificultando seu isolamento. Diversos laboratórios de pesquisa têm se preocupado com a validação de métodos analíticos para seu isolamento de detecção, avaliando a eficiência dos meios de enriquecimento e de isolamento seletivo. Com este propósito, foi desenvolvido e avaliado o desempenho de uma mistura de Salmonella Typhimurium e microrganismos competidores/interferentes (E. coli, P.mirabilis, P.aeruginosa, C.freundii e S.aureus), mantidos sob congelamento à (-) 18 C por 30 dias, a fim de referendar e validar a metodologia usada para o isolamento de salmonelas a partir de alimentos. Os resultados diários foram satisfatórios quanto à recuperação da S. Typhimurium utilizada como controle e demonstraram que é possível o preparo prévio da mistura controle. Os testes ecométricos, de seletividade e produtividade e de recupração demonstraram a adequacidade geral dos meios de cultura e tempetaturas usados nas diferentes etapas analíticas. Observou-se que o caldo Rappaport-Vassiliadis modificado apresentou melhor desempenho, por inibir a formação de véu (crescimento invasor) de Proteus nos meios sólidos usados

Botulism: a laboratory investigation on biological and food samples from cases and outbreaks in Brazil (1982-2001)

Laboratory investigation of botulism from 1982 to 2001 confirmed the occurrence of eight positive outbreaks/cases of botulism in Brazil. From those, type A botulism was observed in seven of them. Biological material of one case (serum and feces) was positive in the first step of the bioassay, but the amount of sample was not sufficient for typification. One of the outbreaks that occurred in 2001 was negative for botulinum toxin in samples of serum, gastric washing and feces, collected eight days before the onset of the symptoms in the affected person who was clinically diagnosed as presenting the disease. Other two cases presenting compatible clinical diagnoses presented negative results. However, in those cases, the collection of samples was (1) after antiserum administration or (2) later than eight days of the onset of symptoms. Investigation was performed by mouse bioassay, as described in the Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods (compiled by American Public Health Association - APHA)11, using specific antiserum from Centers for Disease Control (CDC), USA

Estudo da ocorrência de contaminaçäo orgânica no estuário de Cananéia-SP, Brasil, como subsídio para a extraçäo, manejo e cultivo da ostra do mangue Crassostrea brasiliana: avaliaçäo da qualidade da água / Study of the occurence of organic contamination in the Cananéia-Säo Paulo estuary, Brasil, as subsidy for the extraction, handling and cultivation of the oyster of the swamp Crassostrea brasiliana: evaluation of water quality

Foram selecionados quatro pontos de coleta, no litoral sul do Estado de Säo Paulo, na cidade de Cananéia, para avaliar a qualidade da água, como subsídio para a extraçäo, manejo e cultivo de ostras: Porto Cubatäo, mais próximo dos locais de despejo de esgoto; Retiro, o mais distante; Boacica e Itapitangui, os dois pontos próximos à barra dos rios de mesmo nome. Foram coletadas amostras mensais em cada um dos pontos, com variaçöes entre os meses, no período compreendido entre 1995 e 1997. As amostragens foram aleatórias, no que se refere à maré. Os resultados obtidos foram analisados com relaçäo a possíveis variaçöes sazonais e a pluviosidade acumulada no período imediatamente anterior à coleta. Com exceçäo do ponto próximo da descarga de esgoto que apresentou níveis significativos de contaminaçäo durante todo o período avaliado, os demais apresentaram variaçöes sazonais, com tendência à reduçäo nos meses mais frios e menos chuvosos e aumento quando das precipitaçöes pluviométricas, com base nos dados obtidos, recomenda-se que o valor e utilidade do parâmetro de limite de coliformes deve ser discutido e reavaliado para a seleçäo de áreas marinhas com a finalidade de captaçäo, manejo e criaçäo de moluscos bivalves.

Salmonella: determinaçäo de sorotipos e resistência a agentes antimicrobianos de cepas isoladas de carcaças de frango comercializadas na regiäo de Säo José do Rio Preto - SP / Salmonella: serotyping and antimicrobial susceptibility patterns of strains isolated from chickem carcasse samples commercializede in the Säo José do Rio Preto area - SP

De abril de 1995 a dezembro de 1996, foram estudadas 160 amostras de carcaças de frango, comercializadas na Regiäo de Säo José do Rio Preto - SP. Foram determinados os sorotipos e perfis de sensibilidade aos agentes antimicrobianos de todas as cepas de Samonella isoladas. Das carcaças analisadas, 54,38(por cento) estavam contaminadas por Samonella. Foram identificados 18 diferentes sorotipos, dentre os quais Samonella Enteritidis correspondeu a 59,77(por cento). Verificou-se que 13,79 (por cento) das cepas de Samonella apresentaram resistência aos agentes antimicrobianos testados. Os resultados obtidos demonstraram o alto índice de contaminaçäo por Samonella em carne de frango. Considerando o consumo de alimentos de origem animal, principalmente de aves, por um grande número de pessoas, este fato possivelmente tem propiciado a ocorrência de numerosos surtos por S. Entidades na nossa regiäo, nos últimos anos

Observaçöes laboratoriais sobre surtos alimentares de Salmonella sp, ocorridos na Grande Säo Paulo, no periódo de 1994 a 1997 / Laboratorial observation about foodborne salmonellosis outbreaks in Great Säo Paulo city, from 1994 to 1997

As enfermidades transmitidas por alimentos (ETAs) causadas por salmonela säo consideradas um dos mais importantes problemas de Saúde Pública, tanto nos países em desenvolvimento como em países desenvolvidos. Significativos aumento no número de surtos por S. Enterititidis tem sido observado na Grande Säo Paulo desde 1994. Foram relatados no período de outubro de 1994 a junho de 1997, 18 surtos de ETAs causadas por Samonella envolvendo 23 alimentos, sendo que em 13 (72,2 por cento) surtos foram identificados Salmonella Enteritidis. Os alimentos envolvidos foram predominantemente de origem animal, em especial ovos e seus derivados. O método analítico empregado foi uma modificaçäo do descrito no "Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods", APHA. A relevância e a gravidade deste microrganismo como agente de ETA é discutido neste trabalho

Comparaçäo entre os caldos de enriquecimento "Tryptic soy" com 10 por cento de cloreto de sódio e giolitti-cantoni usados na determinaçäo de estafilococcus coagulase positiva em alimentos / Comparison of Tryptic soy Broth with 10 per cent salt and Giolitti-Cantoni Broth used in determination of coagulase positive staphylococci in foods

Foi comparada a eficiência entre dois meios de cultura: Tryptic Soy Broth com 10 por cento de cloreto de sódio (TSBS) e Giolitti-Cantoni Broth(GC) na detecçäo de Staphylococcus aureus em alimentos näo processados e processados térmicamente; portanto, passíveis de conter células injuriadas pelo calor e/ou pequena quantidade de microorganismos. A técnica utilizada foi a do Número Mais Provável, favorecendo a recuperaçäo do Staphilococcus aureus. O meio GC, além de suas substâncias enriquecedoras, apresenta um sistema inibitório mais acentuado que o TSBS, sendo constituído por cloreto de lítio, telurito de potássio combinado com glicina e condiçäo anaeróbica dada pela adiçäo de vaselina líquida sobre o meio já inoculado. Com essas propriedades o mesmo apresentou maior capacidade de recuperaçäo de S. aureus, como também obteve menor número de falsos positivos, quando comparado com o TSBS

Sardinhas em oleo comestivel. I. Avaliacao dos parametros fisico-quimicos oficiais relacionados com o exame microbiologico e estudo da compatibilidade produto-embalagem em relacao a compostos migrados / Sardines in edible oil. I. Evaluation of official physical-chemical parameters related with the microbiological examination and study of product-packaging compatibility in relation to migrated compounds

Neste trabalho sao relatados os resultados de determinacoes fisico-quimicas e microbiologicas, segundo a legislacao brasileira, durante um ano, em amostras de sardinha (Sardina pilchardus) enlatadas em oleo de soja, especialmente elaboradas. Foi avaliada a compatibilidade do produto com a embalagem (folha cromada revestida com verniz epoxi-fenolico) quanto aos compostos migrados. A embalagem mostrou-se adequada para este tipo de produto. Os niveis de ferro e cromo encontrados sugerem que estes metais, presentes no alimento, nao provem da embalagem. A analise microbiologica do produto apresentou resultados de acordo com a legislacao vigente. O teor de bases volateis totais (BVT), a partir do primeiro dia apos o processamento, foi superior ao limite maximo permitido (0,030 g/100g). A reacao de Eber para gas sulfidrico (H2S) mostrou-se inconclusiva, nao demonstrando correlacao com os niveis de BVT e/ou exame microbiologico. Tais resultados sugerem revisao do limite estabelecido para BVT, bem como o estudo de outros parametros de avaliacao da qualidade de pescado, pois o teor de BVT e/ou a reacao de H2S, isoladamente, nao asseguram a avaliacao eficiente deste tipo de produto

Avaliaçäo da composiçäo centesimal, do valor calórico total e das condiçöes higiênico-sanitárias de sopas desidratadas e pós para o preparo de alimentos destinados à merenda escolar no estado de Säo Paulo / Evaluation of centesimal composition, of total caloric values and of hygiene-surveillance conditions of dehydrated soup and poweder for food preparation intended to scholars meals in the Säo Paulo state

Foram analisadas 232 amostras, sendo 100 de sopas desidratadas e 132 de pós para o preparo de alimentos, de 11 diferentes fabricantes, destinados ao Programa da Merenda Escolar no Estado de Säo Paulo, nos anos de l989 e l990. A análise constou da determinaçäo da composiçäo centesimal, de microrganismos indicadores de higiene, Salmonelas, S. aureus e B. cereus, e do cálculo do valor calórico total. Significativa percela dos produtos analisados näo atendeu aos padröes mínimos exigidos pela Fundaçäo de Assistência ao Estudante-FAE, do Ministério da Educaçäo, principlamente, quanto aos teores de lipídios e proteínas, que só näo comprometem ainda mais os baixos valores calóricos encontrados face aos elevados conteúdos de carboidratos obtidos. Os dados microbiológicos revelam baixa incidência de amostras com esta implicaçäo (1,29 por cento do total). A origem e procedência dos bolores e bactérias do grupo coliforme (10² - 10ü/g) foi considerada indefinida. Sugere-se uniformizaçäo das normas e padröes vigentes, fixando-os preferencialmente por grupos de alimentos, bem como simplificaçäo das fórmulas dos referidos produtos, através da regionalizaçäo do cardápio, tendo como consequência o barateamento do custo, sem prejuízo do valor nutricional da merenda escolar

Isolamento de aspergillus spp aflatoxigênicos de produtos alimentícios - Säo Paulo, Capital / Isolation of aflatoxigênic Aspergillus spp from food products - Säo Paulo, capital

Foram analisadas 264 amostras de produtos alimentícios, tais como: condimentos, mel, pós para o preparo de alimentos, produtos amiláceos e outros. Destas amostras foram isoladas 269 cepas do gênero Aspergillus, sendo identificados nove grupos e quatro espécies. Após cultura em caldo extrato de levedura com 20% de sacarose ("yeast extract medium-sucrose"), foi efetuada análise, por cromatografia em camada delgada em sílica gel, para detecçäo de aflatoxinas em 215 cepas. A pesquisa de aflatoxinas revelou-se positiva em seis amostras (2,79%), como segue: duas amostras de mel, uma de condimento, duas de produtos amiláceos e uma de pó para o preparo de bebida láctea. As cepas aflatoxigênicas foram: 32,91%) de Aspergillus spp; 2(2,66%) do grupo flavus e 1(4,35%) de Aspergillus flavus, Link.

Estudo da inibiçäo de Staphilococcus aureus por Streptococcus lactis produtor de bacteriocina / Inhibition of Staphylococcus aureus by Streptococcus lactis producer of bacteriocin

Quatro cepas de S.lactis produtoras de bacteriocina foram avaliadas quanto à sua capacidade em inibir o desenvolvimento de 30 cepas de S. aureus provenientes de várias fontes. As técnicas utilizadas foram teste de inibiçäo, sendo que duas cepas de S. lactis (Sl5 e Sl51) apresentaram percentual de inibiçäode 41 e 58% respectivamente. No teste de crescimento associativo em leite, observou-se acentuada inibiçäo de três das cepas de S. aureus utilizadas (Sa16, Sa21 e Sa39), frente ao S. lacts (Sl51). A percentagem da populaçäo de S. aureus inibida após 9 horas de fermentaçäo variou de 87,5 a 96,6%

Aspectos higiênico-sanitários da água de poços cavados em diferentes áreas socioeconômicas de São Paulo / Sanitarian aspects of well's water of differents social-economical areas in Säo Paulo, Capital

Foram analisadas 248 amostras de água de poços cavados durante o período de um ano, coletadas de 12 pontos de cada uma das duas regiões socioeconômicas distintas: a, com redes de abastecimento de água tratada e serviço de esgoto recém-instaladas e b, sem estes serviços de saneamento. As amostras de cada ponto foram obtidas mensalmente. Os dados das determinações químicas mostraram que na região a, os níveis de nitrogênio obtidos pela análise química foram baixos e que, na região b, estes níveis foram significativos. Pela análise microbiológica, verificou-se que a presença de bactérias do grupo coliforme e dos indicadores de contaminação de origem fecal foram relativamente constantes; diferindo a distribuição de bacteriófagos anti-Escherichia coli e Shigella sonnei nas duas regiões, assim como a incidência de coliforme de origem fecal nos meses de inverno, em especial na região b (AU).

Botulismo: consideraçöes acerca de oito casos ocorridos no Triângulo Mineiro, Minas Gerais / Botulism: considerations about 8 cases ocurred in Triângulo Mineiro, Minas Gerais, Brazil

O botulismo constitui uma forma rara de intoxicaçäo alimentar, particularmente em nosso meio. A única epidemia comprovada desta doença no Brasil ocorreu na década de 1950, no Rio Grande do Sul, onde nove pessoas a adquiriram, após a ingestäo de conserva caseira de peixe. O presente estudo relata um surto de Botulismo Tipo A ocorrido em uma família de 8 membros, dos quais 7 contraíram esta toxinfecçäo após a ingestäo de carne suína conservada sob a forma de enlatado caseiro. Duas evoluiram para o óbito, e os restantes recuperaram-se após variável tempo de evoluçäo. Onze meses após, diagnósticou-se novo caso desta doença, cuja fonte da intoxicaçäo näo pôde ser detectada. Pretende-se com esta publicaçäo, divulgar a segunda epidemia comprovada de Botulismo no Brasil, e chamar atençäo para seu quadro clínico, diagnóstico e tratamento, praticamente desconhecidos em nosso meio

Pesquisa de toxina paralisante dos moluscos em pescado / Investigation of paralyzing toxin from molluscs in fish

A toxina paralisante dos moluscos foi pesquisada em amostras de ostras, mariscos e peixes, colhidas em diferentes praias do litoral paulista. Foram empregados dois procedimentos analíticos: o químico e o bioensaio. Em decorrência do aparecimento de manchas avermelhadas nas águas e mortalidade de peixes na região, no período de agosto a setembro de 1983, suspeitou-se do fenômeno de "maré vermelhra". A toxina não foi detectada em nenhuma das amostras, pelos dois métodos empregados, que permitem segurança dos resultados, considerando que os testes foram realizados com o padrão de saxi toxina (AU).

Staphylococcus aureus produtor de termonuclease em alimentos / Thermonuclease production by Staphylococcus aureus from foods

Foram testadas, quanto à produção de desoxirrtbonuclease (DNAse) e termonuclease (TNAse), 382 cepas de Staphylococcus aureU8, isoladas de 205 amostras de alimentos, separadas em grupos como segue: grupo a, 236 cepas isoladas de 158 amostras de alimentos não-causadores de enfermidades e, grupo b, 146 cepas isoladas de 47 amostras de alimentos recebidas para elucidação do agente causador de intoxicação alimentar, com sintomas clínicos nos afetados compatíveis aos causados pela en terotoxina estafilocócica. Considerando os resultados obtidos, no caso do grupo a, observou-se a presença de cepa não-produtora de DNAse e TNAse em amostra de macarrão e cepas produtoras de DNAse mas não de TNAse provenientes de leite em pó e bife frito, não sendo portanto 100% concordantes os resultados referentes à produção de DNAse e TNAse; no g.rupo b, verificou-se que todas as cepas demonstraram produção de DNAse e TNAse (AU).