Assessment of HER-2 status in invasive breast cancer in Brazil / Avaliação de HER-2 no câncer de mama invasivo no Brasil

Summary Objective: To characterize the frequency of HER-2-positive breast cancer in Brazil. Method: In this prospective observational study, we first ascertained the HER-2 status of invasive breast cancer specimens by automated immunohistochemistry (IHC). For specimens classified as 2+ by IHC, we performed in situ hybridization (ISH). Results: From February, 2011 to December, 2012, 1,495 breast specimens were registered, and 1,310 samples collected at 24 centers were analyzed. Median patient age was 54 years, and the majority of samples were obtained from segmental (46.9%) or radical mastectomy (34.4%). The predominant histological type was invasive breast carcinoma of no special type (85%), 64.3% had tubule formation (grade 3), and estrogen/progesterone receptors (ER/PR) were positive in 77.4/67.8% of the specimens analyzed, respectively. Using IHC, we found a negative HER-2 status (0 or 1+) in 72.2% of specimens, and 3+ in 18.5%; the 9.3% scored as 2+ were further analyzed by ISH, of which 15.7% were positive (thus, 20.0% of samples were HER-2- -positive by either method). We found no association between HER-2 scores and menopausal status or histological type. Tumors classified as 3+ came from younger patients, and had higher histological grade and less frequent expression of ER/PR. In the North region of Brazil, 34.7% of samples were 3+, with lower frequencies in the other four regions of the country. Conclusion: Our findings provide estimates for the frequency of HER-2 positivity in Brazil and raise the hypothesis that biological differences may underlie the different distribution of breast-cancer phenotypes among different Brazilian regions.

Resumo Objetivo: Estimar a frequência de câncer de mama positivo para HER-2 no Brasil. Método: Neste estudo observacional e prospectivo, verificamos o escore de HER-2 de espécimes de câncer de mama invasivo por imuno-histoquímica automatizada (IHQ). Para amostras classificadas como 2+ por IHQ, fizemos hibridização in situ (HIS). Resultados: De fevereiro de 2011 a dezembro de 2012, 1.495 espécimes de mama foram registrados, e 1.310 amostras coletadas por 24 centros foram analisadas. A idade mediana das pacientes foi 54 anos, e a maioria das amostras foram obtidas a partir de mastectomia segmentar (46,9%) ou radical (34,4%). O tipo histológico predominante foi o carcinoma invasivo da mama, sem tipo especial (85%); 64,3% tinham formação de túbulos (grau 3); e os receptores de estrógeno (RE)/progesterona (RP) foram positivos em 77,4%/67,8% das amostras analisadas. Por IHQ, encontramos HER-2 negativo (0 ou 1+) em 72,2% das amostras, e 3+ em 18,5%; os 9,3% de casos classificados como 2+ foram analisados por HIS, e 15,7% deles foram positivos (assim, 20,0% das amostras foram positivas para HER-2 por qualquer método). Não encontramos associação entre escores de HER-2 e estado menopausal ou tipo histológico. Tumores classificados como 3+ vieram de pacientes mais jovens, tinham maior grau histológico e foi menos frequente a expressão de RE/RP. Na região Norte do Brasil, 34,7% das amostras foram 3+, com frequências mais baixas nas outras quatro regiões do país. Conclusão: Nossos resultados permitem estimar a frequência de positividade do HER-2 no Brasil, gerando a hipótese de que pode haver diferenças biológicas subjacentes à distribuição dos fenótipos de câncer de mama entre as diferentes regiões brasileiras.

Association between age and survival in a cohort of Brazilian patients with operable breast cancer / Associação entre idade e sobrevida em uma coorte de pacientes brasileiras com câncer de mama operável / Asociación entre edad y supervivencia en una cohorte de pacientes brasileñas con cáncer de mama operable

Whether age is an independent prognostic factor in breast cancer is a matter of debate. This is a retrospective cohort study of 767 breast cancer patients, stages I-III, treated at the Hospital das Clínicas, Minas Gerais Federal University, Belo Horizonte, Minas Gerais State, Brazil, from 2001 to 2008, aiming to study the relationship between age and survival. We included variables related to patients, tumors, and types of treatment. Different sets of Cox models were used for survival analysis. Hazard ratios (HR) and 95%CI were calculated. The relationship between age and breast cancer survival did not change substantially in any of them. In the model that accounted for all variables, women aged 70 and older (HR = 1.51, 95%CI: 1.04-2.18), and 35 or younger (HR = 1.78, 95%CI: 1.05-3.01) had shorter cancer specific survival than patients aged between 36 and 69. In addition, older age, having at least one comorbidity, and being white were associated with a higher risk of dying from other causes. In conclusion, shorter breast cancer survival is expected among the youngest and oldest patients.

É discutível se idade é um fator prognóstico independente para câncer de mama. Conduzimos uma coorte retrospectiva de 767 pacientes com câncer de mama, estádios I-III, tratadas no Hospital das Clínicas, Universidade Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil, de 2001 a 2008, para estudar a relação entre idade e sobrevida. Incluímos variáveis relacionadas às pacientes, aos tumores e ao tratamento. Diferentes conjuntos de modelos de Cox foram construídos. As razões de risco (RR) e IC95% foram calculados. A relação entre idade e sobrevida por câncer de mama não foi alterada substancialmente entre os modelos de Cox. No modelo com todas as variáveis explicativas, as mulheres de 70 anos ou mais (RR = 1,51; IC95%: 1,04-2,18) e até 35 anos (RR = 1,78; IC95%: 1,05-3,01) tiveram sobrevida causa-específica mais curta que as de 36-69 anos. Idades a partir de 70 anos, ter ao menos uma comorbidade e ser branca foram associadas a risco maior de óbito por outras causas. Em conclusão, as pacientes mais jovens e as mais idosas parecem ter sobrevida mais curta por câncer de mama.

Es discutible si la edad es un factor pronóstico independiente para el cáncer de mama. Se realizó sobre una cohorte retrospectiva de 767 pacientes con cáncer de mama, etapas I-III, atendidas en el Hospital de Clínicas, Universidad Federal de Minas Gerais, Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil, entre 2001 y 2008, para estudiar la relación entre edad y supervivencia. Incluimos variables relacionadas con las pacientes, los tumores y el tratamiento. Se construyeron diferentes conjuntos de modelos de Cox. Se calcularon los cocientes de riesgo (CR) e IC95%. La relación entre edad y supervivencia del cáncer de mama no ha cambiado substancialmente en los modelos. En el modelo con todas las variables, las mujeres de 70 años o más (CR = 1,51; IC95%: 1,04-2,18) y 35 años o menos (CR = 1,78; IC95%: 1,05-3,01) tuvieron menor supervivencia por cáncer de mama que las de 36 a 69 años. Tener edad avanzada, al menos una comorbilidad, y ser de piel blanca se asociaron a un mayor riesgo de morir por otras causas. En conclusión, las mujeres más jóvenes y las mayores parecen tener menor supervivencia de cáncer de mama.

Immunohistochemical profile of high-grade ductal carcinoma in situ of the breast

OBJECTIVE: To determine the frequency of the immunohistochemical profiles of a series of high-grade ductal carcinoma in situ of the breast. METHODS: One hundred and twenty-one cases of high-grade ductal carcinoma in situ, pure or associated with invasive mammary carcinoma, were identified from 2003 to 2008 and examined with immunohistochemistry for estrogen receptor, human epidermal growth factor receptor 2, cytokeratin 5, and epidermal growth factor receptor. The tumors were placed into five subgroups: luminal A, luminal B, HER2, basal-like, and “not classified”. RESULTS: The frequencies of the immunophenotypes of pure ductal carcinoma in situ were the following: luminal A (24/42 cases; 57.1%), luminal B (05/42 cases; 11.9%), HER2 (07/42 cases; 16.7%), basal-like phenotype (00/42 cases; 0%), and “not classified” (06/42 cases; 14.3%). The immunophenotypes of ductal carcinoma in situ associated with invasive carcinoma were the following: luminal A (46/79 cases; 58.2%), luminal B (10/79 cases; 12.7%), HER2 (06/79 cases; 7.6%), basal-like (06/79 cases; 7.6%), and “not classified” (11/79 cases; 13.9%). There was no significant difference in the immunophenotype frequencies between pure ductal carcinoma in situ and ductal carcinoma in situ associated with invasive carcinoma (p>0.05). High agreement was observed in immunophenotypes between both components (kappa=0.867). CONCLUSION: The most common immunophenotype of pure ductal carcinoma in situ was luminal A, followed by HER2. The basal-like phenotype was observed only in ductal carcinoma in situ associated with invasive carcinoma, which had a similar phenotype. .

Consultoria em patologia cirúrgica mamária: variabilidade interobservador no diagnóstico de lesões proliferativas intraductais atípicas / Consultation in breast surgical pathology: interobserver diagnostic variability of atypical intraductal proliferative lesions

OBJETIVO: Avaliar a concordância nos diagnósticos histopatológicos de lesões mamárias proliferativas intraductais entre patologistas gerais e especialistas em patologia mamária. MÉTODOS: Trata-se de estudo observacional e transversal, com análise de 209 lesões encaminhadas ao Laboratório de Patologia Mamária da Faculdade de Medicina da Universidade Federal de Minas Gerais para consultoria, no período de 2007 a 2011, comparando os diagnósticos originais com os após a revisão. Foram incluídos apenas os casos com solicitação formal de revisão e que apresentavam diagnóstico histopatológico no laudo original ou de revisão de lesões proliferativas, carcinoma ductal in situ puro, carcinoma ductal in situ com microinvasão ou associado a carcinoma invasor. A concordância percentual e o índice kappa foram utilizados para a análise estatística. RESULTADOS: Observamos moderada concordância nos diagnósticos originais de benignidade ou malignidade versus os diagnósticos de revisão (kappa=0,5; concordância percentual=83%). Após a revisão, o diagnóstico de malignidade foi confirmado em 140/163 casos (86%) e o diagnóstico de benignidade foi confirmado em 34/46 casos (74%). Quanto aos diagnósticos específicos, observamos concordância moderada entre o laudo original e de revisão (136/209 casos; kappa=0,5; concordância percentual=65%). A maior discordância foi observada nos casos de carcinoma ductal in situ com microinvasão (6/6 casos; 100%). Grande discordância foi observada nos casos de hiperplasia ductal atípica (16/30 casos; 53%) e carcinoma ductal in situ (25/75 casos; 33%). Em relação ao grau histológico do carcinoma ductal in situ, observou-se boa concordância entre os laudos originais e de revisão (29/39 casos; kappa=0,6; concordância percentual=74%). CONCLUSÃO: Nossos dados confirmam que as lesões mamárias proliferativas intraductais, em especial as hiperplasias ductais atípicas, o carcinoma ductal in situ e o carcinoma ductal in situ com microinvasão apresentam relevantes discordâncias nos diagnósticos histopatológicos, que podem induzir o clínico a erros nas decisões terapêuticas.

PURPOSE: To evaluate the agreement about the histopathological diagnosis of intraductal proliferative breast lesions between general pathologists and a specialist in breast pathology. METHODS: This was an observational, cross-sectional study of 209 lesions received in consultation at the Breast Pathology Laboratory of the School of Medicine, Federal University of Minas Gerais, from 2007 to 2011, comparing the original diagnosis and the review. We included only cases with a formal request for review and cases in which the original diagnosis or reviewer's diagnosis showed proliferative lesions, pure ductal carcinoma in situ, ductal carcinoma in situ associated with microinvasion or associated with invasive carcinoma. The kappa index and percent concordance were used in the statistical analyses. RESULTS: A moderate agreement was observed between the original histopathological diagnosis and the second opinion (kappa=0.5; percentual concordance=83%). After the review, the diagnosis of malignancy was confirmed in 140/163 cases (86%) and the diagnosis of benign lesions was confirmed in 34/46 cases (74%). Regarding specific diagnosis, we observed moderate agreement between the original diagnosis and the reviewer's diagnosis (136/209 cases; kappa=0.5; percent concordance=65%). The highest disagreement was observed in cases of ductal carcinoma in situ with microinvasion (6/6 cases; 100%). Important discordance was observed in cases of atypical ductal hyperplasia (16/30 cases; 53%) and ductal carcinoma in situ (25/75 cases; 33%). Regarding the histological grade of ductal carcinoma in situ, we observed good agreement between the original diagnosis and the review (29/39 cases; kappa=0.6, percent agreement=74%). CONCLUSION: Our data confirm that intraductal proliferative breast lesions, especially atypical ductal hyperplasia, ductal carcinoma in situ and ductal carcinoma in situ with microinvasion show relevant discrepancies in the histopathological diagnoses, which may induce errors in therapeutic decisions.

Changes in mastectomy rates at a Brazilian public hospital over 20 years (1989 to 2008) / Mudanças nas taxas de mastectomia em um hospital público brasileiro ao longo de 20 anos (1989 a 2008)

CONTEXT AND OBJECTIVE: Recently, breast-conserving surgery (BCS) has been replacing mastectomy for breast cancer treatment. The aim of this study was to evaluate the changes in mastectomy and BCS rates and the factors relating to these shifts. DESIGN AND SETTING: A retrospective study in a Brazilian public hospital. METHODS: Pathological records from female patients who underwent surgery for breast cancer at Hospital das Clínicas, Universidade Federal de Minas Gerais (HC-UFMG), between 1989 and 2008 were reviewed. The mastectomy and BCS rates were calculated. The chi-square test was used to assess factors associated with type of surgical treatment and to compare trends in treatment type over the years. Logistic regression was used for multivariate analysis. RESULTS: From 1989 to 2008, 2050 breast cancer surgical specimens were received in our service, corresponding to 1973 patients; 1324 (64.6%) of them were from mastectomy and 726 (35.4%) from BCS. A shift from mastectomy towards BCS was observed (P < 0.001). In multivariate analysis, earlier year of surgery (P < 0.001), larger tumor size (P < 0.001), having at least one positive axillary lymph node (P < 0.001) and patients' age greater than 68 years (P = 0.007) were predictors of mastectomy. CONCLUSIONS: There was a shift from mastectomy towards BCS in our institution over the years. This may reflect consolidation of BCS (plus radiotherapy) as an equivalent treatment to mastectomy in terms of survival and a shift to earlier diagnosis for the disease.

CONTEXTO E OBJETIVO: Recentemente, a cirurgia conservadora tem substituído a mastectomia para tratamento cirúrgico do câncer de mama. O objetivo deste estudo é avaliar as mudanças nas taxas de mastectomia e cirurgia conservadora e os fatores relacionados a essas mudanças. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Estudo retrospectivo em hospital público brasileiro. MÉTODOS: Dados patológicos das pacientes submetidas a cirurgia para câncer de mama no Hospital das Clínicas, Universidade Federal de Minas Gerais (HC-UFMG), de 1989 a 2008, foram revistos. As taxas de mastectomia e cirurgia conservadora foram calculadas. O teste qui-quadrado foi usado para avaliar fatores relacionados ao tipo de tratamento cirúrgico empregado e comparar tendências de tipo de tratamento ao longo dos anos. Regressão logística foi usada para análise multivariada. RESULTADOS: De 1989 a 2008, 2.050 espécimes cirúrgicos de câncer de mama foram recebidos em nosso serviço, correspondentes a 1.973 pacientes; 1.324 (64,6%) correspondentes a mastectomia e 726 (35,4%) correspondentes a cirurgia conservadora. A cirurgia conservadora se tornou mais frequente ao longo dos anos (P < 0,001). Em análise multivariada, ano mais precoce da cirurgia (P < 0,001), maior tamanho tumoral (P < 0,001), ter ao menos um linfonodo axilar positivo (P < 0,001) e idade maior de 68 anos (P = 0,007) foram preditores de mastectomia. CONCLUSÕES: As cirurgias conservadoras se tornaram mais frequentes em relação às mastectomias ao longo dos anos. Isso pode refletir a consolidação da cirurgia conservadora (associada a radioterapia) como equivalente à mastectomia em termos de sobrevida, bem como diagnóstico mais precoce da doença.

Comparação de três modelos matemáticos para predição de metástases em linfonodos não sentinela em pacientes com câncer de mama e linfonodo sentinela positivo / Comparison of three mathematical models for prediction of non-sentinel lymph node metastasis in patients with breast cancer and positive sentinel lymph node

Objetivo: foi comparar um "Nomograma Brasileiro" desenvolvido para este estudo com o "Nomograma do Memorial Sloan Kettering Câncer Center" e o Stanford Online Calculator na predição de metástases em linfonodos não sentinela em um mesmo grupo populacional de pacientes brasileiras com câncer de mama e linfonodo sentinela positivo. Métodos: foram incluídas 261 pacientes com resultado positivo na biópsia do linfonodo sentinela e submetidas ao esvaziamento axilar em dois centros brasileiros de tratamento de câncer de mama, das quais 92 (35%) apresentaram metástases em linfonodos não sentinela. O "Nomograma Brasileiro", e o "Nomograma do Memorial Sloan Kettering Câncer Center" e o Stanford Online Calculator foram aplicados para calcular a probabilidade de metástases em linfonodos não sentinela. A acurácia de cada modelo foi calculada pela área sob a curva ROC (AUC). Resultados: o "Nomograma Brasileiro", e o "Nomograma do Memorial Sloan Kettering Câncer Center" e o Stanford Online Calculator apresentaram valores da AUC de 0,694 (IC95%0,629-0,760; p<0,0001), 0,626 (IC95% 0,555-0,697; p<0,001) e 0,619 (IC95% 0,548 -689;p=0,002), respectivamente. Conclusões: os três modelos apresentaram uma discriminação razoável na predição de metástases em linfonodos não sentinela em pacientes com câncer de mama. O "Nomograma Brasileiro apresentou a melhor acurácia entre os modelos testados, mas precisa ser validado em populações de pacientes diferentes daquelas utilizadas em sua construção.

Existe alteração no mecanismo de adesão celular mediado pela E-caderina nas neoplasias cervicais de pacientes soropositivas para o HIV? / Is there any change in the cell adhesion method mediated by e-cadherin in cervical neoplasia of HIV-infected patients?

OBJETIVOS: avaliar a expressão da E-caderina em lesões do colo uterino em pacientes portadoras da infecção pelo vírus HIV. MÉTODOS: foi realizado um estudo com 77 pacientes apresentando o HPV cervical, sendo 40 soropositivas e 37 soronegativas para o HIV, todas submetidas à colposcopia e biópsia de colo uterino. O material obtido foi encaminhado para histopatologia e imunoistoquímica. Foram realizados cortes e montagem em lâminas silanizadas, e o observador foi blindado para a sorologia da paciente. Foram utilizados os anticorpos E-caderina, marca DAKO, clone NHC-38, com diluição de 1:400, e o sistema de polímeros Novolink (Novocastra). A expressão de E-caderina foi avaliada na membrana da célula epitelial, através da extensão da área corada. Utilizou-se o teste do χ2 com correção de Yates ou o teste de Fisher, para comparação de proporções na análise univariada. Foram incluídas no modelo de regressão logística todas as variáveis com valor p<0,25, chamado de modelo inicial. Foi utilizado o pacote estatístico SPSS e adotado o nível de significância estatística de 5 por cento. RESULTADOS: a expressão da E-caderina foi identificada em até 1/3 interno do epitélio em 59,3 por cento dos casos e em até 2/3 do epitélio em 11,1 por cento dos casos, mas em 29,6 por cento dos casos a expressão foi identificada em toda a espessura do epitélio entre as pacientes soronegativas para o HIV. Por outro lado, nas pacientes soropositivas para o HIV, verificou-se 45,9 por cento com expressão em até 1/3 do epitélio, 13,5 por cento com expressão até 2/3 do epitélio e 40,5 por cento em toda a espessura do epitélio. A expressão da E-caderina não foi diferente entre os dois grupos (p=0,5). A análise multivariada, contudo, identificou associação significativa entre as lesões cervicais de alto grau e a expressão da E-caderina em 2/3 e 3/3 do epitélio (p<0,001; χ2=36,9). CONCLUSÕES: a expressão da E-caderina na membrana das células epiteliais não está associada à infeção pelo vírus da imunodeficiência humana, e sim ao grau da lesão intraepitelial cervical.

PURPOSE: to evaluate the expression of E-cadherin in cervical lesions of patients suffering from HIV infection. METHODS: we conducted a study with 77 patients with cervical HPV infection, 40 of them were HIV seropositive and 37 HIV seronegative who underwent colposcopy and a biopsy of the cervix. The material obtained by biopsy of the cervix was sent for histopathologic and immunohistochemical study. Sections were obtained and mounted on silanized slides and examined by an observer who was blind to patient serology. E-cadherin antibody, clone NHC-38 diluted 1:400 (DAKO) and the Novolink polymer system (Novocastra) were used. The expression of E-cadherin was determined on the epithelial cell membrane based on the extent of the stained area. The χ2 test with Yates correction or the Fisher's Exact test was used for comparison of the proportion in univariate analysis. All the variables with p<0.25 were included in the logistic regression model, called initial model. The analyses were carried out using the SPSS software, with the level of significance set at 5 percent. RESULTS: the expression of E-cadherin was observed in up to the internal 1/3 of the epithelium in 59.3 percent of cases and in up to 2/3 of the epithelium in 11.1 percent of cases, but in 29.6 percent of cases the expression was identified throughout the thickness of the epithelium in HIV-seronegative patients. In contrast, in HIV-seropositive patients, 45.9 percent showed expression up to 1/3 of the epithelium, 13.5 percent showed expression in up to 2/3 of the epithelium, and 40.5 percent showed expression throughout the thickness of the epithelium. E-cadherin expression did not differ between groups (p=0.5). However, the multivariate analysis identified a significant association between high-grade cervical injury and E-cadherin expression in 2/3 and 3/3 of the epithelium (p=0.001; χ2=36.9). CONCLUSIONS: the expression of E-cadherin in the epithelial cell membrane is not associated with infection by the human immunodeficiency virus, but with the degree of intraepithelial cervical injury.

The use of the immunohistochemical biotin-free visualization systems for estrogen receptor evaluation of breast cancer

Background: A novel generation of immunohistochemical visualization systems based on a biotin-free polymeric (BFP) technology has recently been released. We have compared the new BFP and the classical streptavidin-biotin (SAB) systems to evaluate estrogen receptor in breast carcinomas. Methods: Serial sections from a tissue microarray containing 320 invasive breast carcinomas were stained by immunohistochemistry for estrogen receptor using the rabbit monoclonal antibody SP1. Eleven different visualization systems were used, including seven BFP systems (six second-generation: DAKO Advance TM , Leica Novolink TM, Zymed SuperPicTureTM , Zymed PicTure Max TM , Biogenex Super Sensitive Non-Biotin HRP TM , CellMarque Mouse/Rabbit Polydetector HRP/DABTM ; one first-generation: DAKO EnVision+TM) and four SAB systems (DAKO LSAB+TM ; Signet EasyPathTM ; Biogenex Super SensitiveTM and CellMarque Mouse/Rabbit Immunodetector HRP/DABTM). All visualization systems were used following the instructions provided by the manufacturers. All slides were scanned using Zeiss Mirax Scan™, and the intensity of immunohistochemistry staining was automatically quantified using HistoQuant™ software. The cytoplasm staining was visually evaluated as absent (0), weak (1), moderate (2), or strong (3). Results: The BFP Advance and Novolink , and the SAB LSAB + showed the highest staining intensity among all the systems (P<0.01). However, LSAB+ showed the highest cytoplasm staining among those used (p<0.01). .. The BFP Advance and Novolink showed the strongest staining intensity and, followed by all the other second-generation BFPs, represent a powerful tool for immunohistochemistry standardization of estrogen receptor evaluation of breast carcinomas.

Contribuição da imuno-histoquímica na avaliação de fatores prognósticos e preditivos do câncer de mama e no diagnóstico de lesões mamárias / Contribution of immunohistochemistry to the assessment of prognostic and predictive factors of breast cancer and to the diagnosis of mammary lesions

OBJETIVO: Fazer análise crítica da contribuição da imuno-histoquímica na avaliação de fatores preditivos/prognósticos do câncer de mama, na pesquisa de micrometástases em linfonodos sentinela e no diagnóstico diferencial de lesões mamárias. MÉTODOS: Foi realizado estudo observacional retrospectivo de todos os casos de lesões mamárias e linfonodos sentinelas submetidas a estudo imuno-histoquímico no Laboratório de Patologia Mamária da Faculdade de Medicina da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG) entre 2001 e 2007. Os casos foram classificados de acordo com a indicação do estudo imuno-histoquímico em três categorias: avaliação de fatores preditivos/prognósticos, pesquisa de células epiteliais metastáticas em linfonodos sentinela e definição diagnóstica. RESULTADOS: Foram realizados exames imuno-histoquímicos de 1.294 casos, totalizando 4.101 reações com 21 anticorpos diferentes. Na maioria dos casos, a imuno-histoquímica foi realizada para avaliação de fatores preditivos/prognósticos (1.106 casos, 85,5 por cento), seguido de pesquisa de células epiteliais metastáticas em linfonodos sentinelas (134 casos, 10,6 por cento) e diagnóstico diferencial de lesões mamárias (51 casos, 3,9 por cento). Obtiveram-se reações de boa qualidade com importante contribuição do estudo imuno-histoquímico em 1.247 casos (96,4 por cento). Em 47 casos (3,6 por cento), o resultado foi inconclusivo devido a problemas de fixação (autólise) da fase pré-analítica. CONCLUSÃO: Nossos dados confirmam ser o estudo imuno-histoquímico importante ferramenta para avaliação de fatores preditivos e prognósticos do câncer de mama, pesquisa de micrometástases em linfonodos sentinelas e diagnóstico diferencial de lesões mamárias. A maior utilização da imuno-histoquímica foi para avaliação de fatores preditivos e prognósticos do câncer de mama.

OBJECTIVE: To critically analyze the contribution of immunohistochemistry to the assessment of prognostic and predictive factors of breast cancer, to the search for micrometastases in sentinel lymph nodes, and to the differential diagnosis of mammary lesions. METHODS: An observational retrospective study was carried out reviewing all cases of mammary lesions submitted to immunohistochemistry at the Breast Pathology Laboratory of Federal University of Minas Gerais between 2001 and 2007. According to immunohistochemistry indication, the cases were classified into three categories: assessment of prognostic and predictive factors, search for epithelial metastatic cells in sentinel lymph nodes and differential diagnosis. RESULTS: Immunohistochemistry was performed in 1,294 cases, with 4,101 reactions using 21 different antibodies. In most cases, immunohistochemistry was conducted to assess predictive/prognostic factors (1,106 cases, 85.5 percent), followed by search for epithelial metastatic cells in sentinel lymph nodes (134 cases, 10.6 percent) and differential diagnosis of breast lesions (51 cases, 3.9 percent). Good quality reactions, with significant contribution to the immunohistochemistry study, were obtained in 1,247 cases (96.4 percent). In 47 cases (3.6 percent) the results were inconclusive due to fixation problems (autolysis) in the pre-analytical phase. CONCLUSION: Our data confirm that the immunohistochemical study is an important tool to the assessment of predictive and prognostic factors, search for micrometastases in sentinel lymph nodes, and differential diagnosis of mammary lesions. The widest use of immunohistochemistry was in the assessment of predictive and prognostic factors of breast cancer.

Imunofenótipo e evolução de câncer de mama: comparação entre mulheres muito jovens e mulheres na pós-menopausa / Immunophenotype and evolution of breast carcinomas: a comparison between very young and postmenopausal women

OBJETIVO: avaliar características clínicas, patológicas e moleculares de carcinomas mamários em mulheres muito jovens em comparação a tumores de mulheres na pós-menopausa. MÉTODOS: foram selecionados 106 casos de câncer de mama de mulheres jovens e 130 casos de mulheres pós-menopausa. Foram analisados dados clínicos (idade ao diagnóstico, estadiamento, ocorrência de metástases, tempo de sobrevida global e livre de doença), anátomo-patológicos (tamanho do tumor, tipo e grau histológico do tumor primário) e marcadores moleculares (receptores de estrógeno e progesterona, HER2, p53, p63, citoqueratinas 5 e 14 e EGFR) com uso da imunoistoquímica empregando microarranjo de tecido. Foi analisada a relação entre as características clínico-patológicas, imunoistoquímicas e de sobrevidas global e livre de doença. RESULTADOS: as pacientes muito jovens apresentaram maior frequência de nuliparidade (p=0,03), maior diâmetro dos tumores (p≤0,000), estadiamento clínico mais avançado (p=0,01), maior número de linfonodos positivos (p=0,001) e tumores pouco diferenciados (p=0,004). A maioria das pacientes jovens recebeu tratamento com quimioterapia (90,8%) e radioterapia (85,2%) e em menor proporção com tamoxifeno (31,5%), comparado às mulheres na pós-menopausa. Observamos baixa positividade para o receptor de estrógeno (49,1%; p=0,01) e alta positividade para a proteína HER2 (28,7%; p=0,03) nas mulheres jovens. O fenótipo triplo-negativo foi observado em 29,6% no grupo jovem e em 20% nas mulheres na pós-menopausa. Os tumores de fenótipo basal foram mais frequentes nas mulheres jovens (50%). As metástases sistêmicas ocorreram em 55,3% dos casos nas jovens e em 39,2% nas idosas. As sobrevidas global e livre de doença em cinco anos foram, respectivamente, 63 e 39% para as mulheres jovens e 75 e 67% para o grupo de mulheres na pós-menopausa...

PURPOSE: the objective of this study was to evaluate the clinical, pathological and molecular characteristics in very young women and postmenopausal women with breast cancer. METHODS: we selected 106 cases of breast cancer of very young women (≤35 years) and 130 cases of postmenopausal women. We evaluated clinical characteristics of patients (age at diagnosis, ethnic group, family history of breast cancer, staging, presence of distant metastases, overall and disease-free survival), pathological characteristics of tumors (tumor size, histological type and grade, axillary lymph nodes status) and expression of molecular markers (hormone receptors, HER2, p53, p63, cytokeratins 5 and 14, and EGFR), using immunohistochemistry and tissue microarray. RESULTS: when comparing clinicopathologic variables between the age groups, younger women demonstrated greater frequency of nulliparity (p=0.03), larger tumors (p≤0.000), higher stage disease (p=0.01), lymph node positivity (p=0.001), and higher grade tumors (p=0.004). Most of the young patients received chemotherapy (90.8%) and radiotherapy (85.2%) and less tamoxifen therapy (31.5%) comparing with postmenopausal women. Lower estrogen receptor positivity 49.1% (p=0.01) and higher HER2 overexpression 28.7% (p=0.03) were observed in young women. In 32 young patients (29.6%) and in 20% of the posmenopausal women, the breast carcinomas were of the triple-negative phenotype (p=0.034). In 16 young women (50%) and in 10 postmenopausal women (7.7%), the tumors expressed positivity for cytokeratin 5 and/or 14, basal phenotype (p=0.064). Systemic metastases were detected in 55.3% of the young women and in 39.2% of the postmenopausal women. Breast cancer overall survival and disease-free survival in five years were, respectively, 63 and 39% for young women and 75 and 67% for postmenopausal women. CONCLUSIONS: breast cancer arising in very young women showed negative clinicobiological characteristics and more aggressive tumors.

Carcinomas mamários de tipo basal: perfil clínico-patológico e evolutivo / Basal-like breast cancers: clinicopathological features and outcome

OBJETIVO: Investigar a frequência de carcinomas mamários de fenótipo basal em uma série de tumores triplo-negativos (TTN), definidos pela negatividade para receptores de estrógeno (RE), de progesterona (RP) e HER2. MÉTODOS: Selecionamos 140 TTN, obtendo-se características clínico-patológicas e sobrevida. Microarranjo de tecido (2 cilindros de cada tumor) foi construído e submetido à imunoistoquímica para RE, RP, HER2, citoqueratinas (Cks) 5 e 14, EGFR, p63 e p53. Consideramos carcinomas de fenótipo basal os tumores negativos para RE, RP e HER2, e positivos para CK5. RESULTADOS: Encontramos 105 carcinomas de fenótipo basal entre 140 TTN (frequência=75 por cento). A idade média das pacientes foi de 54,8 anos, sendo que 34,3 por cento estavam na pré-menopausa. A maioria dos tumores foi classificada como carcinoma ductal invasor de alto grau. Os TTN exibiram positividade para CK5 (75,0 por cento), CK14 (29 por cento), EGFR (36,4 por cento), p63 (28,6 por cento) e p53 (67,1 por cento). Estadiamento avançado da doença foi observado em 52 pacientes (50 por cento), com diâmetro tumoral maior que 5 cm em 41 casos (39 por cento) e metástases axilares em 61 casos (59,2 por cento). Seguimento clínico foi obtido em 89 pacientes (média=51 meses). Destas, 45 pacientes (50,5 por cento) evoluíram sem doença; 6 (6,7 por cento) estavam vivas com doença e 38 (42,6 por cento) morreram pelo câncer. Recidiva sistêmica ocorreu em 42 pacientes (47,1 por cento), sendo pulmões, cérebro e ossos os principais sítios de metástases. As médias das sobrevidas global e livre de doença foram de 36 e 28 meses, respectivamente. CONCLUSÕES: Nosso estudo confirma comportamento clínico agressivo e elevada frequência dos carcinomas de fenótipo basal entre os TTN, semelhante ao descrito em casuísticas norte-americanas e europeias.

OBJECTIVE: The aim of our study was to investigate basal phenotype in a series of triple-negative (estrogen and progesterone receptors-negative and HER2-negative) invasive mammary carcinomas. METHODS: We selected 140 previously tested triple-negative tumors. Clinical, histopathological and survival data were obtained. A tissue microarray containing 2 cylinders from each tumor was constructed and immunohistochemistry for estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR), HER2, cytokeratins (CK) 5 and 14, EGFR, p63, and p53 was performed. We considered basal like-cancers (BLC) those tumors that were ER/PR/HER2-negative and CK5-positive. RESULTS: We found 105 cases of BLC from 140 triple-negative tumors (frequency=75.0 percent). The mean age at diagnosis was 54.8 years-old and 34.3 percent were premenopausal women. The majority of tumors were high grade (83.7 percent) and of ductal/no-special-type (80.8 percent). Triple-negative tumors showed immunoreactivity for CK5 (75.0 percent), CK14 (29.0 percent), EGFR (28.6 percent), p63 (28.6 percent), and p53 (67.1 percent). Tumor size larger than 5cm was observed in 41 cases (39.0 percent) and axillary metastases were detected in 61 patients (59.2 percent). Follow-up was recorded for 89 patients (mean=51 months): 45 patients (50.5 percent) with no evidence of disease; 6 patients (6.7 percent) were alive with disease; and 38 patients (42.6 percent) died of the disease. Relapse was detected in 42 women (47.1 percent), lungs, brain, and bones being the most common sites of metastasis. The mean overall survival was 36 months and the mean disease-free interval was 28 months. CONCLUSION: Our findings confirmed that BLC are poor prognosis and highly-frequent carcinomas among triple-negative tumors, similar to data previously reported in North American and European patients.

Rabbit antibodies for hormone receptors and HER2 evaluation in breast cancer / Anticorpos de coelho para avaliação de receptores hormonais e HER2 em câncer de mama

BACKGROUND: Novel rabbit monoclonal antibodies (RabMab) for estrogen (ER), progesterone (PR) receptors and HER2 evaluation by immunohistochemistry have recently been commercially released. We compared the RabMab anti-ER, anti-PR and anti-HER2 to mouse monoclonal antibodies (Mab) using tissue microarrays (TMA) of breast carcinomas. METHODS: Two TMA containing breast carcinomas were built. Sections were immunostained using anti-ER and anti-PR, Mab and RabMab. The sections stained for ER and PR were evaluated considering positive those tumors in which more than 1 percent of the tumor cell nuclei stained moderate or strong. For HER2, the immunostained sections were evaluated using the ASCO/CAP guidelines for HER2. Chromogenic in situ hybridization (CISH) was used as the gold standard for HER2 evaluation. CISH was evaluated using the Zymed HER2 CISH interpretation guidelines. RESULTS: RabMab against ER have similar staining patterns compared to the 6F11 (Mab), but stronger than 1D5 (Mab) from three different suppliers. The RabMab against PR provide stronger and sharper immunohistochemical signals compared to Mab. The detection of HER2 protein overexpression was more prevalent with the polyclonal antibodies and RabMab than with the Mab. These were more specific than the RabMab, which were more sensitive when compared to CISH. CONCLUSION: The novel RabMab against ER and PR showed higher intensity of staining than the Mab. The RabMab against HER2 is more sensitive than Mab, however, Mab presented more specificity than RabMab when compared to CISH for HER2 evaluation of breast carcinomas.

OBJETIVOS: Novos anticorpos monoclonais de coelho (RabMab) para a avaliação imuno-histoquímica de receptores de estrógeno (RE), progesterona (RP) e HER2 foram lançados comercialmente. Comparamos os RabMab anti-RE, anti-RP e anti-HER2 com os anticorpos monoclonais de camundongo (Mab) utilizando tissue microarrays (TMA) de carcinomas de mama. MÉTODOS: Foram construídos dois TMAs de carcinomas de mama. As secções foram marcadas usando anti-RE, anti-RP e anti-HER2, Mab e RabMab através de imuno-histoquímica. As secções marcadas para RE e RP foram avaliadas considerando positivos aqueles tumores nos quais mais de 1 por cento dos núcleos coraram moderadamente ou forte. Para HER2, as secções foram avaliadas utilizando as recomendações da ASCO/CAP para HER2. Hibridização in situ cromogênica (CISH) foi usada como padrão-ouro para avaliação de HER2. CISH foi avaliado utilizando as recomendações da Zymed. RESULTADOS: Os RabMab anti-RE apresentam intensidade de coloração semelhante ao 6F11 (Mab), porém maior que o 1D5 (Mab) proveniente de três diferentes fabricantes. Os RabMab anti-RP apresentaram sinal imunoistoquímico mais forte e delimitado comparado aos Mab. A detecção da superexpressão da proteína HER2 foi mais prevalente entre os anticorpos policlonais e RabMab, que se mostraram mais sensíveis quando comparados com o CISH. CONCLUSÃO: Os novos RabMab anti-RE e RP proporcionaram maior intensidade de coloração que os Mab. O RabMab anti-HER2 apresentou maior sensibilidade que os Mab, porém os Mab apresentaram maior especificidade quando comparados com o CISH para a avaliação de HER2 em carcinomas de mama.

Morbidade entre a pós-biópsia de linfonodo sentinela e a dissecção axilar no câncer de mama / Morbidity after sentinel node biopsy and axillary dissection in breast cancer

OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi avaliar a morbidade cirúrgica pós-biópsia de linfonodo sentinela (BLS) ou dissecção axilar com (DA-NP) e sem preservação do nervo intercostobraquial (DA-NS). MÉTODOS: Fez-se estudo coorte prospectivo com 108 pacientes divididas em três grupos: BLS (n=35), DA-NP (n=36) e DA-NS (n=37). Foram avaliadas ocorrência de déficit sensorial, dor, linfedema, seroma e infecção no membro superior homolateral à cirurgia. Monofilamentos de Semmes-Weinstein foram usados para avaliar o déficit sensorial, perimetria braquial foi feita para avaliação da presença de linfedema e aplicado questionário de dor. Para análise estatística foram utilizados os testes ANOVA e Kruskal-Wallis. Foi feita análise bivariada e multivariada. RESULTADOS: Pelo menos uma complicação pós-cirúrgica, imediata ou tardia, ocorreu em 45/108 (41,7 por cento) pacientes avaliadas. A complicação mais comum foi dor. Houve diferença estatisticamente significante entre os três grupos somente quanto ao déficit sensorial (p=0,04). Dor, linfedema e déficit sensorial ocorreram com maior freqüência no grupo DA-NS. As pacientes dos grupos BLS e DA-NP não apresentaram diferenças estatisticamente significantes para nenhuma das variáveis analisadas. A pesquisa com os monofilamentos mostrou sensibilidade cutânea preservada em 28/35 pacientes do grupo BLS, em 25/36 pacientes do grupo DA-NP e em 10/37 pacientes do grupo DA-NS (p<0,001). CONCLUSÃO: A secção do nervo está relacionada a maior déficit sensorial havendo diferença estatisticamente significante entre os três grupos, o que não demonstrou ser significante com os demais critérios avaliados dentre os grupos analisados.

BACKGROUND: The aim of this study was to evaluate the morbidity after sentinel node biopsy (SNB) and axillary dissection with (AD-NS) or without sparing the intercostobrachial nerve (AD-NOS). Methods: A prospective cohort study was performed on 108 patients divided into three groups: SNB (n=35), AD-NS (n=36) and AD-NOS (n=37). We evaluated the incidence of sensory loss, pain, lymphedema, seroma formation and infection in the arm homolateral to the breast surgery. Semmes-Weinstein monofilaments were used to assess the sensory loss; brachial perimetry was used to evaluate presence of lymphedema and a pain questionnaire was administered. ANOVA and Kruskal-Wallis statistical tests were used. Bivariate and Multivariate analyses were performed. RESULTS: After surgery at least one complication was reported by 45/108 (41.7 percent) patients. Pain was the outcome more often reported by patients. In the three groups a significant difference was observed only regarding sensory loss (p=0.04). Pain, lymphedema, and sensory loss were more frequently found in the AD-NOS group. No significant difference was observed between SNB and AD-NS groups. Semmes-Weinstein monofilaments showed preservation of cutaneous sensitivity in 28/35 patients from the SNB group, in 25/36 patients from AD-NS group but in only 10/37 patients from AD-NOS group (p<0.001). CONCLUSION: The ICB section is associated with higher sensory loss, with statistically significant difference between the groups that were not shown to be significant with the others complications.

Importância da segunda opinião em patologia cirúrgica mamária e suas implicações terapêuticas / Importance of a second opinion in breast surgical pathology and therapeutic implications

OBJETIVO: avaliar a concordância dos diagnósticos histopatológicos de lesões mamárias entre patologistas da comunidade e especialista em patologia mamária. MÉTODOS: foi realizado um estudo observacional, tipo coorte retrospectivo de 329 casos de lesões mamárias recebidas em consultoria para segunda opinião. Foram recebidas lâminas originais (152 casos), blocos de parafina (59 casos) ou lâminas e blocos (118 casos). Os casos foram revistos e os diagnósticos originais e os de revisão comparados, se avaliando a concordância no diagnóstico principal e na graduação nuclear dos casos de carcinoma ductal in situ e graduação histológica dos casos de carcinoma invasivo. Foram incluídos apenas casos com requisição de exame contendo dados clínicos e laudo anatomopatológico original final ou provisório. Para análise estatística foram usados o índice de kappa e a concordância percentual. RESULTADOS: a comparação geral entre os diagnósticos histopatológicos originais e pós-revisão evidenciou moderada concordância (índice de kappa=0,48) e concordância percentual de 59,9 por cento. Os diagnósticos de malignidade foram confirmados em 185/225 casos (82,2 por cento) e de lesões benignas em 89/104 casos (85,6 por cento). A maior concordância diagnóstica foi observada nos casos de carcinoma invasor (81 por cento) e as maiores discordâncias nos casos de carcinoma ductal in situ com microinvasão (74 por cento), carcinoma/neoplasia lobular in situ (70 por cento) e hiperplasias epiteliais atípicas (61 por cento). A análise do grau nuclear de 61 casos de carcinoma ductal in situ evidenciou moderada concordância (índice de kappa=0,52, concordância percentual=68,8 por cento). Foi observada boa concordância em relação ao grau histológico no carcinoma invasivo (índice de kappa=0,61, concordância percentual=74,3 por cento). CONCLUSÕES: os resultados mostram maior concordância no diagnóstico do carcinoma invasivo e menor concordância no diagnóstico de carcinoma ductal ...

PURPOSE: to evaluate the agreement between histopathologic diagnoses of breast lesions made by general pathologists and by a specialist in breast pathology. METHODS: a cohort retrospective study comparing histopathologic diagnoses of 329 cases of breast lesions received in consultation for a second opinion was carried out. The material received for consultation included slides (152 cases), paraffin blocks (59 cases) or slides and blocks (118 cases). Cases were reviewed and the original diagnoses and diagnoses from a specialist in breast pathology were compared. The main diagnoses, nuclear grade of ductal carcinoma in situ, and the histopathologic grade of invasive mammary carcinomas were evaluated. The kappa index and percentual concordance were used in the statistical analyses. RESULTS: a moderate agreement was observed between the original histopathologic diagnoses and the second opinion (kappa index=0.48; percentual concordance=59.9 percent). The diagnosis of malignancy was confirmed in 185/225 cases (82.2 percent) and diagnosis of benign lesions was confirmed in 89/104 cases (85.6 percent). The highest agreement was observed in the diagnosis of invasive mammary carcinomas (81 percent) and the highest disagreement was observed among diagnoses of ductal carcinoma in situ with microinvasion (74 percent), lobular carcinoma in situ (70 percent), and atypical epithelial hyperplasias (61 percent). There was a moderate agreement in the nuclear grade of ductal carcinoma in situ (kappa index=0.52; percentual concordance=68.8 percent), and good concordance in the histologic grade of invasive carcinomas (kappa index=0.61; percentual concordance=74.3). CONCLUSIONS: the results show higher concordance rate in the diagnosis of invasive carcinomas and lower concordance in the diagnosis of ductal carcinoma in situ with microinvasion and premalignant breast lesions, especially lobular neoplasia in situ, and atypical epithelial hyperplasias.

Treinamento e critérios padronizados aprimoram o diagnóstico de lesões pré-malignas da mama / Training and standardized criteria improve the diagnosis of premalignant breast lesions

OBJETIVO: analisar a variabilidade interobservador no diagnóstico histopatológico de lesões mamárias consideradas pré-malignas antes e após o treinamento com o uso de critérios diagnósticos padronizados. MÉTODOS: foram utilizadas lâminas contendo cortes histológicos representativos de três tipos de lesões mamárias (hiperplasia ductal atípica, carcinoma ductal in situ e carcinoma ductal in situ com microinvasão) revistas por um especialista internacional em patologia mamária e cujos diagnósticos foram considerados como padrão de referência. As mesmas lâminas foram avaliadas em dois tempos por cinco patologistas da comunidade que receberam um protocolo específico para classificar as lesões. Na primeira avaliação, os casos foram analisados e classificados usando critérios específicos adotados em cada serviço. Num segundo tempo, os patologistas receberam um tutorial contendo critérios diagnósticos e imagens representativas e novamente classificaram as lesões empregando os critérios padronizados. Foi realizada análise interobservador usando concordância percentual e o índice de Kappa ponderado. RESULTADOS: houve grande variabilidade diagnóstica entre os patologistas na análise inicial sem o uso de critérios diagnósticos padronizados quanto ao diagnóstico, grau nuclear e grau histológico (os índices de Kappa ponderado quanto ao diagnóstico variaram de 0,15 a 0,40). Na segunda avaliação, utilizando-se critérios padronizados, houve significativa melhora na concordância diagnóstica entre os cinco patologistas quanto ao diagnóstico, grau nuclear e grau histológico (os índices de Kappa ponderado quanto ao diagnóstico variaram de 0,42 a 0,80). CONCLUSÕES: a concordância interobservador no diagnóstico e classificação das lesões pré-malignas da mama pode ser melhorada com o treinamento específico e o uso de critérios histopatológicos padronizados.

PURPOSE: to analyze interobserver variability in the histopathological diagnosis of premalignant breast lesions before and after training with diagnostic standardized criteria. METHODS: Slides containing histological sections representative of three kinds of breast lesions (atypical ductal hyperplasia, ductal carcinoma in situ and ductal carcinoma in situ with microinvasion), revised by an international specialist in breast pathology whose diagnoses were considered as golden standard, have been used. The same slides have been evaluated at two different times by five pathologists from the community according to a specific protocol for classifying the lesions. In the first evaluation, the cases were analyzed and classified according to the specific criteria adopted in each service. At the second time, the pathologists were given a tutorial containing diagnostic criteria and representative images, and the lesions were classified again, employing the standardized criteria. Interobserver analysis using percent agreement and weighted Kappa index has been performed. RESULTS: There has been a large diagnostic variation among the pathologists in the initial analysis without the use of standardized diagnostic criteria concerning the diagnostic, nuclear grade and histological grade (weighted Kappa indexes related to diagnosis varied from 0.15 to 0.40). In the second evaluation using standardized criteria, there has been a significant improvement in the diagnostic concordance among the five pathologists concerning the diagnosis, nuclear grade and histological grade (weighted Kappa indexes related to diagnosis have varied from 0.42 to 0.80). CONCLUSIONS: interobserver concordance related to diagnosis and classification of breast premalignant lesions may be improved with specific training and the use of standardized histopathological criteria.

Marcadores moleculares em câncer de mama preditivos de metástases axilares / Molecular features of breast cancer predictive of lymph node metastases

OBJETIVO: Avaliar e relacionar fatores morfológicos e moleculares de câncer de mama preditivos de metástases em linfonodos axilares. MÉTODOS: Selecionamos 123 casos de carcinomas mamários invasores subdivididos em três grupos de acordo com o status axilar (pacientes com macrometástases, com micrometástases e linfonodo-negativas). Avaliamos e correlacionamos a presença de metástases axilares com fatores morfológicos (tamanho do tumor, tipo e grau histológicos, invasão linfática e sangüínea em lâminas coradas pela hematoxilina e eosina) e moleculares do tumor primário (receptores de estrógeno e progesterona, Ki67, p53, E-caderina, Her2, e invasão linfática e sangüínea em lâminas coradas pela imunoistoquímica, para D2-40 e CD31). RESULTADOS: A ocorrência de metástases axilares esteve positivamente relacionada à embolização neoplásica em vasos linfáticos em lâminas coradas pela hematoxilina e eosina (HE), quando analisamos os casos com metástases e sem metástases (p=0,04), e, quando eles eram analisados em três subgrupos (p=0,002). Também identificamos relação positiva e estatisticamente significativa entre a presença de metástases axilares e invasão de vasos sangüíneos em lâminas coradas pelo CD31 (p=0,02). As demais variáveis moleculares e morfológicas não mostraram relação estatisticamente significativa com a presença de metástases. CONCLUSÃO: A invasão neoplásica em vasos linfáticos e sangüíneos identificadas em cortes histológicos corados pela HE e por marcadores imunoistoquímicos relaciona-se positivamente com a ocorrência de metástases, e é preditivo de metástases em linfonodos axilares em câncer de mama.

OBJECTIVE: The aim of our study was to analyze morphologic and molecular markers of breast cancer relating them to the presence of metastases in axillary lymph nodes. METHODS: We selected 123 cases of invasive mammary carcinomas stratified into three subgroups: with macrometastases, with micrometastases, and lymph node negative. Presence of metastases was evaluated relating them with morphologic factors (size of primary tumor, type and grade, presence of lymphatic and blood vessel invasion in hematoxylin and eosin-stained slides) and molecular factors of primary tumor (estrogen and progesterone receptors, E-cadherin, Ki67, p53, Her2 expression, and the presence of lymphatic and blood vessel invasion in immunostained sections for D2-40 and CD31). RESULTS: Axillary lymph node metastases were positively related to the presence of lymphatic vessel invasion in hematoxylin and eosin (H&E)-stained slides, when analyzed with or without metastases (p=0.04) and when analyzed in the three subgroups (p=0.002). Lymph node metastases were also positively related to presence of blood vessel invasion identified by immunohistochemistry (IHC) for CD31 (p=0.02). However other morphologic and molecular factors were not related to the presence of axillary node metastases. CONCLUSION: Lymphatic and blood vessel invasion identified in H&E and IHC-stained slides are positively related to the rmetastatic status of axillary lymph nodes and are predictive of axillary lymph node metastases in breast cancer.

Predictive factors of breast cancer evaluated by immunohistochemistry: [review] / Fatores preditivos do câncer de mama avaliados pela imuno-histoquímica: [revisão]

Hormone receptor and Her2 protein overexpression evaluated by immunohistochemistry (IHC) is widely validated as a predictive factor in breast cancer. The quality of the IHC reaction is influenced by tissue fixation and processing. Over- and underfixation deeply affect IHC results. Antigen retrieval may improve IHC but it does not recover tissue from autolysis or overfixation. The choice of primary antibody for IHC as to its sensitivity and specificity in relation to therapeutic response represents an important stage. Apart from mouse monoclonal antibodies, new rabbit monoclonal antibodies are commercially available, such as clones anti-ER SP1 and B644, anti-PR SP2 and B645 and anti-Her2 SP3 and 4B5. They represent an alternative to hormone receptor and Her2 evaluation by IHC. New polymeric non-biotinylated detection systems are also available and allow accurate and strong marking with no stromal and no non-specific cytoplasmic staining due to endogenous biotin. The most recommended cut off for estrogen and progesterone receptors (ER and PR) is more than 1 percent of positive cells with moderate or strong staining intensity (Allred's scoring system). New guidelines for Her2 evaluation by IHC show a cut off of more than 30 percent of positive cells with strong intensity (3+) that correlates better with gene amplification. The 2+ cases are now considered indeterminate and should be confirmed by fluorescence in situ hybridisation (FISH) or chromogenic in situ hybridisation CISH. A quality control of pre-analytical, analytical and post-analytical phases of IHC is recommended in order to optimize results.

A superexpressão de receptores hormonais e Her2 avaliada pela imuno-histoquímica (IHQ) é amplamente validada como fator preditivo em câncer de mama. A qualidade da reação imuno-histoquímica é influenciada pela fixação do tecido e seu processamento. A fixação insuficiente ou demasiada afeta profundamente os resultados da IHQ. A reativação antigênica pode melhorar os resultados da IHQ, porém não recupera tecidos com autólise ou com excessiva fixação. A escolha do anticorpo primário para a IHQ, considerando sua sensibilidade e sua especificidade de acordo com a resposta terapêutica, representa uma importante etapa. Além de anticorpos monoclonais de camundongo, novos anticorpos monoclonais de coelho são comercialmente disponíveis, tais como clones SP1 e B644 anti-RE, SP2 e B645 anti-RP, e SP3 e 4B5 anti-Her2. Eles representam uma alternativa para avaliação de receptores hormonais e Her2 através da IHQ. Novos sistemas de detecção poliméricos não-biotinilados também são disponíveis e permitem marcação exata e forte sem marcação estromal ou citoplasmática inespecífica devido à biotina endógena. O cut off mais recomendado para receptor de estrogênio (RE) e receptor de progesterona (RP) é acima de 1 por cento de células positivas com marcação moderada ou forte (sistema de escore de Allred). Novas recomendações para avaliação de Her2 através da IHQ apontam um cut off de mais de 30 por cento de células positivas com marcação forte (3+), que melhor se relaciona com amplificação gênica. Os casos 2+ são agora considerados indeterminados e devem ser confirmados por hibridação in situ por fluorescência (FISH) ou hibridização in situ colorimétrica (CISH). Um controle de qualidade de fases pré-analítica, analítica e pós-analítica da IHQ é recomendado para a otimização dos resultados.