Metalotioninas en Perna viridis (Bivalvia: Mytilidae): variación estacional y su relación con la biología reproductiva / Metallothioneins in Perna viridis (Bivalvia: Mytilidae): seasonal variation and its relation to reproductive biology

Metallothionein is a cytosolic protein found in a variety of tissues and have been involved in the regulation of essential trace metals such as copper and zinc, and in the detoxification of essential and nonessential metals. With the aim to study their seasonal variation and their possible role in reproductive behavior, we evaluated metallothioneins (Mts) in Perna viridis, taken from Rio Caribe and Chacopata localities in the North coast of Sucre state, Venezuela. A total of 325 samples were obtained from February to December 2003. We determined the following biometric indices in bivalves: Condition Index (CI), meat yield (RC) and dry weight-length relationship (PSL). Besides, Mts in whole tissue were separated by molecular exclusion chromatography, Sephadex G-50 and quantified by saturation with cadmium. Our results showed that the biometric indices (RC and PSL) had seasonal variations between localities and maturity stages, with the exception of IC. No significant differences were found between sexes. Mts showed seasonal variations between localities, with the highest concentrations between February and March, and minimum ones between September and December, coinciding with the respectively high and low productivity periods in the area. The mussels from Rio Caribe had higher Mts concentration than those from Chacopata. Furthermore, immature mussels showed the highest Mts concentration while the lowest was found in spawned specimens. We found a significant negative relationship between Mts and CI. Our results demonstrated that MTs in Perna viridis are influenced by the condition index and reproductive status, as well as physicochemical factors in the marine environment.

Las metalotioninas (Mts) son proteínas de baja masa molecular que juegan un rol importante en la detoxificación de metales, en vista de su papel ecotoxicológico se evaluaron las metalotioneínas (MTs) en 350 ejemplares del bivalvo Perna viridis en dos localidades de la costa norte del estado Sucre, desde febrero hasta diciembre 2003. Se determinaron los índices biométricos: índice de condición (IC), rendimiento de carne (RC) y relación peso seco-talla (PSL). Las Mts fueron separadas por cromatografía de exclusión molecular, Sephadex G-50 y se cuantificaron por saturación con cadmio. Los índices biométricos (RC y PSL) mostraron variaciones estacionales, entre localidades y estados de madurez, con la excepción del CI. No se encontraron diferencias significativas entre sexos. Las Mts mostraron variaciones estacionales, con concentraciones más elevadas entre febrero y marzo y mínimos entre septiembre y diciembre, que coincidieron con los períodos de alta y baja productividad en el área, respectivamente. Los mejillones de Río Caribe presentaron una mayor concentración de Mts que los de Chacopata. Los mejillones inmaduros mostraron la mayor concentración de Mts y la más baja en los desovados. Se encontró una relación negativa y significativa entre Mts y CI. Los resultados demuestran que las Mts de Perna viridis están influidas por el índice de condición y la condición reproductiva, asi como también pot los factores físico-químicos del ambiente marino.

Crecimiento somático y relación ARN/ADN en estadios juveniles de Eucinostomus argenteus (Pisces: Gerreidae) en dos localidades del Caribe de Venezuela / Somatic growth and RNA/DNA rate of Eucinostomus argenteus (Pisces: Gerreidae) juveniles stages at two localities of the Venezuelan

Somatic growth and RNA/DNA rate of Eucinostomus argenteus (Pisces: Gerreidae) juveniles stages at two localities of the Venezuelan Caribbean. In order to evaluate the association among growth indices of marine fishes at early life stages, the somatic growth rate and physiological conditions of Eucinostomus argenteus were estimated at two Venezuelan North-East zones: Mochima Bay and Cariaco Gulf. The age and somatic growth rate were estimated based on daily growth increments in sagitta otoliths. The physiological conditions were evaluated with proteins concentrations and RNA/DNA rate, which were estimated by spectrofluorometric and fluorometric techniques, respectively, on muscle tissue. Juvenile standard length ranged from 9.80 to 39.20mm from 21 to 73 days of age. At all the study localities there were significant and positive correlations between age, otolith diameter and body size, and fitted to a linear regression model. The values of recent growth rate ranged from 0.178 to 0.418mm day-1, backcalculated growth rate oscillated between 0.295-0.393mm day-1, and RNA/DNA rate ranged from 1.65 to 6.97. Differences were not found between study zones, but there were differences between localities. Despite the fact that there was no correlation between juvenile´s somatic growth and RNA/DNA rates, the reported values suggesting a E. argenteus juvenile’s positive growth in their natural habitat at localities studied. Nevertheless, in some localities values that indicate poor nutritional conditions were registered, which could affect other future demographic rates as survivor and fecundity.

Con la finalidad de evaluar la asociación de índices de crecimiento en estadios tempranos de peces marinos, se estimó la tasa de crecimiento somático y las condiciones fisiológicas de Eucinostomus argenteus en dos zonas del nor-oriente venezolano: Bahía de Mochima y Golfo de Cariaco. La edad y el crecimiento fueron estimados basados en análisis de otolitos sagitta. Las condiciones fisiológicas fueron evaluadas por medio de las concentraciones de proteínas y la relación ARN/ADN, empleando técnicas espectofotométricas y fluorométricas sobre tejido muscular. Las relaciones entre tallas con la edad y el diámetro de los otolitos resultaron positivas, significativas y ajustadas a un modelo de regresión lineal. Los valores de la tasa de crecimiento reciente oscilaron entre 0.178 y 0.418mm día-1, la tasa de crecimiento retrocalculado varió entre 0.295 y 0.393mm día-1, y la tasa ARN/ADN osciló entre 1.65 y 6.97. No se registraron diferencias entre las zonas de estudio, sin embargo se reportaron diferencias entre localidades. A pesar de no encontrarse correlación entre la tasa de crecimiento y la relación ARN/ADN, los valores reportados sugieren crecimiento positivo de los individuos silvestres en las localidades evaluadas. No obstante, ciertas localidades mostraron valores que indican pobres condiciones nutricionales, pudiendo afectarse a futuro otras tasas vitales.

Determinación de tioles totales y tioles solubles en ácido en el pez colossoma macropomum (cuvier, 1818) expuesto a cadmio / Total and Soluble Thiols in Acid Determination on the Freshwater Fish Colossoma macropomum (Cuvier, 1818) Exposed to Cadmium

En el presente estudio se evaluó la distribución de tioles totales y de tioles solubles en ácido en diferentes tejidos del pez dulceacuícola Colossoma macropomum en condiciones de cultivo, y aclimatados en el laboratorio durante 15 y 30 días, y el efecto del cadmio sobre estos parámetros en organismos expuestos durante 21 días y depurados 15 días después de la exposición al metal. La distribución de tioles totales (TT) y de tioles solubles en ácido (TSA) varió con las condiciones ambientales en las cuales se encontraban los organismos, observándose que en peces en cultivo, los mayores valores de TT se presentan en el plasma>músculo>branquias, en peces aclimatados a condiciones de laboratorio (15 días), se observó la siguiente distribución: branquias>músculo>hígado>plasma>riñón y en peces aclimatados 30 días fue branquias>riñón>hígado>músculo>plasma. Para los TSA, la distribución fue la siguiente: organismos provenientes de condiciones de cultivo: músculo>plasma>hígado>branquias. En los peces con 15 días de aclimatación: hígado>branquias>músculo; el riñón y el plasma presentaron valores cercano a cero. En peces con 30 días de aclimatación fue branquias>músculo>hígado>riñón>plasma. La exposición crónica a cadmio produjo un aumento significativo de la concentración de TT y de TSA en el plasma. Los organismos depurados 15 días disminuyeron la concentración de TSA en plasma no así la de TT. La determinación de tioles, podría considerarse un importante parámetro auxiliar, en el diagnóstico y monitoreo de peces expuestos a ambientes contaminados por cadmio.

In this study was evaluated the distribution of total thiols (TT) and acid soluble thiols (AST) in tissues of the freshwater fish Colossoma macropomum providing of cultivation and acclimated in laboratory by 15 and 30 days, as well, was evaluated the effect of cadmium on these parameters in Cd-exposure fishes during 21 days and in Cd-depuration fishes (15 days). TT and AST showed variations with environmental conditions; In Farmer fishes were, TT: plasm>muscle>gills; acclimated fishes (15 days): gills>muscle>liver>plasm>kidney and acclimated fishes (30 days): gills>kidney>liver>muscle>plasm. The distribution of AST was: farmer fishes: muscle>plasm>liver>gills. Acclimated fishes (15 days): liver>gills>muscle; the kidney and the plasm presented near values to zero, and acclimated fishes (30 days) was gills>muscle>liver>kidney>plasm. Cadmium exposition produced a significant increase in the TT and TSA concentration of plasm. Cd-depured fishes showed a decrease in plasm TSA concentration but not in plasm TT concentration. Thiol assays could be considered an important parameter in the diagnosis and monitor of fishes environmental Cd exposed.

Efecto del cadmio y de la temperatura sobre el conteo de células sanguíneas del pez dulceacuícola Colossoma macropomum / Cadmium and temperature effect on blood cell counts of freshwater fish Colossoma macropomum

En este trabajo se evaluó el efecto del cadmio y de la temperatura sobre la fragilidad osmótica y el número de células sanguíneas, en el pez Colossoma macropomum. Los organismos fueron expuestos a 0,5 mg/L de cloruro de cadmio durante 24 días y a dos temperaturas (25 y 30ºC). A los 0; 10 y 24 días de exposición, se les tomó muestras de sangre para determinar la curva de fragilidad osmótica, el conteo diferencial de células blancas y el conteo de reticulocitos. Los eritrocitos presentaron principios de hemólisis a 90 mmol/L de NaCl y hemólisis total a10 mmol/L. El porcentaje de linfocitos fue >62 por ciento, incrementándose en los peces expuestos a cadmio, no obstante, el porcentaje absoluto (controles y expuestos) de linfocitos, disminuyó a los 24 días de experimentación, siendo más significativo a la temperatura de 30°C. Después de los neutrófilos, los trombocitos fueron el tercer tipo celular encontrado, sobre los cuales, ni el cadmio ni la temperatura, tuvieron efecto significativo. Sin embargo, el número absoluto de estas células aumentó en los organismos mantenidos a 25°C/24 días; contrario a lo observado en los peces a 30°C/24 días, quienes registraron un descenso de 4 por cierto en su abundancia. Los peces expuestos a Cd/30°C revelaron un significativo aumento de trombocitos en comparación con los expuestos Cd/25ºC. Los reticulocitos disminuyeron por la exposición al metal. El cadmio y la temperatura ejercen un efecto sinérgico sobre el número de trombocitos y afectan individualmente la producción de reticulocitos en el pez.

In this work, the cadmium (CD) and temperature effect on the red cell osmotic fragility and blood cells count in the tropical fish Colossoma macropomum were evaluated. The fishes were exposed to 0.5 mg/L of cadmium chloride during 24 days and two temperatures (25 and 30°C). At 0; 10 and 24 days of Cd exposure, blood samples were taken from fishes to determine the osmotic fragility curve, the differential white cell and reticulocyte count. The erythrocytes osmotic fragility began at 90 mmol/L of NaCl and total hemolysis was observed at 10 mmol/L of NaCl. Lymphocytes were the more abundant cells (>62%). These cells increased in Cd-exposed fish; moreover, the lymphocytes absolute percentage (control and exposed) decrease at 24 days of experimentation, being more significant at 30°C. After the granulocytes acidophils, trombocytes were the third cellular type, they were not affect by Cd neither temperature. However, trombocyte absolute number increased than fishes at 25°C/24 d as fishes at 30°C/24. On the other hand, the Cd/30°C exposed fishes showed a significant increase of thrombocytes. Both, cadmium and temperature affect thrombocyte number. The reticulocytes decrease due to cadmium exposed fishes. A synergic effect is produced by Cd and temperature on trombocytes; however, these factors exert an individual effect in fish reticulocytes.

Tasa de crecimiento en larvas de Sardinella aurita valenciennes, 1847 (pisces: clupeidae) del Morro de Puerto Santo Venezuela / Growth rate of Sardinella aurita valenciennes, 1847 (pisces: clupeidae) larvae in Morro of Puerto Santo Venezuela

Se analizó y relacionó los cambios diarios en la microestructura de anillos de crecimiento de los otolitos sagitta de larvas de Sardinella aurita con el crecimiento somático y bioquímico. El crecimiento somático fue expresado como longitud/edad y el crecimiento bioquímico con la relación ARN/ADN (Bulow, 1970). Se determinó la edad y el crecimiento en 221 larvas colectadas en el Morro de Puerto Santo, Venezuela, mediante análisis de los incrementos diarios en los otolitos sagitta y los caracteres morfométricos. Los ácidos nucleicos y la relación ARN/ADN se determinaron por fluorescencia. La estructura de tallas de las larvas estuvo comprendida entre 2,2 y 17mm LS para las edades de 1 a 23 días. El aumento de talla (longitud estándar, LS en mm) en función de la edad está representado por LS= 2,76+0,60xedad (r²= 0,83; P<0,001). Las larvas presentaron una tasa de crecimiento instantáneo y una tasa de crecimiento retrocalculada de 0,60 y 0,69mm/día, respectivamente. Los niveles promedio de los ácidos nucleicos fueron de ARN/larva= 1,53 µg y ADN/larva= 0,62µg, y ARN/ADN= 2,61. Se encontró una estrecha relación entre la tasa de crecimiento de los otolitos sagitta y el cociente ARN/ADN (r²= 0,83; P<0,001). Los parámetros calculados de crecimiento larval de S. aurita están dentro de los intervalos registrados para la especie y para otros clupeidos en distintas latitudes,

Estrés oxidativo como posible causante de retinopatía en ratas en desarrollo sometidas a hiperoxia / The effect of oxidative stress on retinal and choroidal cytoarchitecture was evaluated, and the levels of reduced glutathione (GSH) analyzed, in rats subjected to hyperoxygenation (80 ±1% O2). Groups of rats were oxygenated from birth (day 0) to days 6, 9, 12 or 14 of life, while others were kept under normal O2 (controls). GSH blood concentration was determined in each period. Retinal and choroidal histology was studied in 30 day-old rats. GSH concentration was significantly lower in rats oxygenated on days 0-6 and 0-9 than in controls. However, rats kept under high O2 on days 0-12 and 0-14 showed similar values to the controls, possibly due to an adaptive process. In the retina and choroid of rats exposed to O2 on days 0-9, 0-12 and 0-14, capillary vasoconstriction was observed, as well as tight junction weakening in choroidal capillaries leading to hemorrhage. The retina from rats subjected to hyperoxigenation from 0-12 days showed vacuolized horizontal cells with damaged mitochondria and swollen nuclear envelopes. The results show severe structural damage in the retina and choroid when animals are subjected to high O2 levels. / Avaliou-se o efeito do estresse oxidativo sobre a citoarquitetura retiniana e coroidal e analisou-se os níveis de glutation reduzido (GSH) em eritrócitos de ratos submetidos a hiperóxia (80 ±1% O2). Grupos destas foram oxigenados desde o dia do seu nascimento (0) até o dia 6, 9, 12 o 14 de vida, e outras se colocaram em normoxia (controles). Em cada um de estes períodos se determinou a concentração do GSH. A histologia da retina e a coróides se realizou em ratos de 30 dias. As concentrações de GSH em ratos oxigenados de 0-6 e 0-9 dias, foram significativamente mais baixas que nos controles. No entanto, nos grupos de 0-12 e 0-14 dias de hiperóxia mostraram valores similares aos controles, possivelmente como um processo adaptativo. Na retina e coróides de ratos expostos de 0-9, 0-12 e 0-14 dias, se evidenciaram processos de vasoconstrição capilar, assim como debilitação das uniões estreitas dos endotélios capilares coróides, conduzindo a hemorragia. A retina dos ratos submetidos a hiperóxia de 0-12 dias, apresentou células horizontais vacuolizadas, com mitocôndrias alteradas e as envolturas nucleares dilatadas. Os resultados evidenciam os severos danos estruturais que sofrem a retina e a coróides quando os animais são submetidas a altos níveis de oxigenação.

Se evaluó el efecto del estrés oxidativo sobre la citoarquitectura retiniana y coroidal y se analizó los niveles de glutatión reducido (GSH) en eritrocitos de ratas sometidas a hiperoxia (80 ±1% O2). Grupos de éstas fueron oxigenados desde el día de su nacimiento (0) hasta el día 6, 9, 12 o 14 de vida, y otras se colocaron en normoxia (controles). En cada uno de estos períodos se determinó la concentración del GSH. La histología de la retina y la coroides se realizó en ratas de 30 días. Las concentraciones de GSH en ratas oxigenadas de 0-6 y 0-9 días, fueron significativamente más bajas que en los controles. No obstante, en los grupos de 0-12 y 0-14 días de hiperoxia mostraron valores similares a los controles, posiblemente como un proceso adaptativo. En la retina y coroides de ratas expuestas de 0-9, 0-12 y 0-14 días, se evidenciaron procesos de vasoconstricción en capilares retinianos y coroideos, así como debilitamiento de las uniones estrechas de los endotelios capilares coroideos, conduciendo a hemorragia. La retina de las ratas sometidas a hiperoxia de 0-12 días, presentó células horizontales vacuolizadas, con mitocondrias alteradas y las envolturas nucleares dilatadas. Estos resultados evidencian los severos daños estructurales que sufren la retina y la coroides cuando son sometidas a altos niveles de hiperoxia.

Relacion ARN/ADN como indice de condicion fisiologica del hibrido de la cachama Colossoma macropomum y el morocoto piaractus brachypomus durante el desarrollo embrionario / RNA/DNA ratio as an index of physiological condition of Colossoma macropomum and Piaractus branchypomus (Pisces: Characiformes) during embryonic development

We evaluated RNA/DNA ratio as an index of physiological condition during larval development of a hybrid between the fishes Colossoma macropomum (cachama) and Piaractus brachypomus (morocoto). The samples were obtained by induced reproductive technology and the eggs were maintained in acrylic conical incubator with a continuous waterflow. Embryonic development, from egg fertilization to cell division and hatch out, took 12 hours 20 minutes at 29.5 degrees C, dissolved oxygen contents of 6.0 ppm and pH 7.5. Nucleic acids quantification was determined by fluorometry with ethidium bromide and Hoechst 33258 dyes. We observed significant changes of RNA/DNA ratios during all stages of the embryonic larval development. Therefore, RNA/DNA relation is an useful technique to evaluate physiological condition in short period and could be utilized as nutritional condition and/or instantaneous growth for routine check to verify the health status in early life of cultivated species

Morfología bucofaríngea y hábitos alimentarios de Micropogonias furnieri (Pisces: Sciaenidae) en la costa norte del Estado Sucre, Venezuela / Oropharyngeal morphology and food habits of Micropogonias furnieri (Pisces: Sciaenidae) in the North coast of Estado Sucre, Venezuela

Morphology of the mandibular and pharyngeal region, and the feeding habits of Micropogonias furnieri were examined in 256 male and female specimens, between 28.7 and 54.3 cm total length, collected around Morro Puerto Santo, in northeast Sucre State, Venezuela (10 degrees 45'00" N-63 degrees 8'0" W), from May 1989 to April 1990. Micropogonias furnieri has a small ventral mouth; protrusible premaxillary and dentary; first branchial arches with 21 to 27 gill rakers, generally 24 to 25; and 7 to 11 pyloric caecae. The index of vacuity was low, with mean value of 7.00. The mean intestinal index was 0.72, indicative of carnivorous species. Analysis of frequency of occurrence, indicates preference for crustaceans (45.70), mainly crabs (34.90), followed by polychaetes (28.00), fishes (11.41) and occasionally mollusks and echinoderms (4.0 and 3.9, respectively). The diet of this species did not vary with sex.