ABSTRACT
Abstract This study aimed to evaluate the antimicrobial activity of calcium hypochlorite (Ca (OCl)2) and sodium hypochlorite (NaOCl) using confocal laser scanning microscopy (CLSM) and dentin organic matrix alteration by picrosirius staining and light microscopy (LM). Samples of human extracted teeth were infected with Enterococcus faecalis by centrifugation of the bacterial suspension and were treated with Ca(OCl)2 or NaOCl at 0.5%, 2.5%, and 6% for 15, 30, and 60 seconds. CLSM and viability staining were used to quantitatively analyze the proportions of dead/live bacteria in the canal lumen and border of the root canal. The data were analyzed by ANOVA and Fisher test. For LM analysis, one hundred bovine teeth were randomly divided into 10 test groups (n=10): G1- Without treatment; G2- 17% EDTA; G3- 6% NaOCl; G4- 6% NaOCl + EDTA; G5- 0.5% Ca(OCl)2; G6- 0.5% Ca(OCl)2 + EDTA; G7- 2.5% Ca(OCl)2; G8- 2.5% Ca(OCl)2 + EDTA; G9- 6% Ca(OCl)2; G10- 6% Ca(OCl)2 + EDTA. The samples were fragmented and stained with Picrosirius. Data were analyzed by Kruskal-Wallis and Dunn (P<0.05). There was a strong correlation between the results of the canal lumen and the border of the root canal (r=0.962). Both hypochlorites at a concentration of 0.5% showed less microbial reduction compared to 2.5% and 6% (P<0.05). There was less antimicrobial activity at 15 seconds compared to 30 and 60 seconds (P<0.05). Ca(OCl)2 and NaOCl showed similar results at the same concentrations (P>0.05). In conclusion, Ca(OCl)2 caused fewer alterations to the dentin organic matrix at concentrations of 0.5% and 2.5%. Ca(OCl)2 presents antimicrobial activity similar to NaOCl, and collagen damage is concentration-dependent.
Resumo Este estudo teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana do hipoclorito de cálcio (Ca(OCl)2) e do hipoclorito de sódio (NaOCl) usando a microscopia confocal a laser (MCVL) e a alteração da matriz orgânica da dentina por meio da coloração com picrosirius e microscopia óptica (MO). Amostras de dentes humanos extraídos foram infectados com Enterococcus faecalis por centrifugação da suspensão bacteriana. As amostras foram tratadas com Ca(OCl)2 ou NaOCl a 0,5%, 2,5% e 6% durante 15, 30 e 60 segundos. A MCVLe a coloração de viabilidade foram utilizadas para analisar quantitativamente as proporções de bactérias vivas/mortas no lúmen do canal e no bordo do canal radicular. Os dados foram analisados por ANOVA e teste de Fisher LSD. Para análise de MO, cem dentes bovinos foram divididos aleatoriamente em 10 grupos teste (n=10): G1- Sem tratamento; G2- 17% de EDTA; G3- 6% de NaOCl; G4- 6% de NaOCl + EDTA; G5- 0,5% de Ca(OCl)2; G6- 0,5% de Ca(OCl)2 + EDTA; G7- 2,5% de Ca(OCl)2; G8- 2,5% de Ca(OCl)2 + EDTA; G9- 6% de Ca(OCl)2; G10- 6% de Ca(OCl)2 + EDTA. As amostras foram fragmentadas e coradas com Picrosirius. Os dados foram analisados por Kruskal-Wallis e teste de Dunn (P<0,05). Houve uma forte correlação nos resultados do lúmen do canal e na borda do canal radicular (r=0,962). Ambos os hipocloritos, a uma concentração de 0,5%, mostraram menor redução microbiana em comparação com 2,5% e 6% (P<0,05). Houve menor atividade antimicrobiana aos 15 segundos em comparação com 30 e 60 segundos (P<0,05). Em conclusão, o Ca(OCl)2 e o NaOCl apresentaram resultados semelhantes nas mesmas concentrações (P>0,05). O Ca(OCl)2 causou menos alterações na matriz orgânica da dentina em concentrações de 0,5% e 2,5%. O Ca(OCl)2 apresenta atividade antimicrobiana semelhante ao NaOCl, e os danos ao colágeno dependem da concentraçã
ABSTRACT
Abstract The aim of this study was to compare the efficacy of grape seed extract (GSE), calcium hypochlorite [Ca(ClO)2], and sodium hypochlorite (NaOCl) irrigant solutions with rotary or reciprocating instrumentation for disinfection of root canals inoculated with Enterococcus faecalis. The mesiobuccal root canals of mandibular molars were prepared and inoculated with Enterococcus faecalis for 21 days. The roots were then randomly divided into the following eight experimental groups (n=11) according to the instrumentation technique and disinfection protocol: ProTaper Next or Reciproc R25 with sodium chloride (control group), 6% NaOCl, 6% Ca(ClO)2, or 50% GSE used for irrigation during instrumentation. The antimicrobial activity was determined on the basis of a reduction in colony-forming units (CFUs) counted on bacterial samples collected before and after root canal instrumentation and expressed as a percentage of reduction. Data were evaluated by two-way ANOVA followed by Tukey HSD post-hoc tests (p<0.05). No significant differences were observed in bacterial reduction between the ProTaper Next and Reciproc R25 systems (p>0.05), regardless of the irrigant solution used. Furthermore, all active solutions (6% NaOCl, 50% GSE, and 6% Ca(ClO)2) showed similar potential to reduce bacterial counts (p>0.05) and were significantly more effective than sodium chloride (control) (p<0.05). The results suggest that the GSE and Ca(ClO)2 have potential clinical application as irrigant solutions in endodontic therapy since they present bactericidal efficacy against Enterococcus faecalis.
Resumo O objetivo deste estudo foi comparar a eficácia do extrato de semente de uva (ESU), hipoclorito de cálcio [Ca(ClO)2] e hipoclorito de sódio (NaOCl) como soluções irrigadores quando utilizadas com instrumentos reciprocantes e rotatórios para desinfecção de canais radiculares infectados com Enterococcus faecalis. Raízes mesio-vestibulares de molares inferiores foram preparados e inoculados com E. faecalis por 21 dias. As raízes foram aleatoriamente divididas em 8 grupos (n=11) de acordo com a técnica de instrumentação e protocolo de irrigação: ProTaper Next ou Reciproc R25 associados com soro fisiológico (grupo controle), Ca(ClO)2 6%, NaOCl 6% ou ESU 50%. A atividade antimicrobiana foi determinada pela redução do número de Unidades Formadoras de Colonias (UFCs) coletadas antes e após a instrumentação e expressas em porcentagens de redução. Os dados foram analisados estatisticamente pelos testes ANOVA seguido pelo teste complementar de Tukey HSD (p<0,05). Não foi encontrado diferença estatisticamente significante na redução bacteriana entre os sistemas ProTaper Next e Reciproc R25 (p>0.05), independente da solução irrigadora usada. Além disso, todas as soluções ativas (NaOCl, ESU e Ca(ClO)2) mostraram similar potencial em reduzir a quantidade de bactérias (p>0.05) e foram significativamente mais efetivas que o soro fisiológico (p<0.05). Pode-se concluir que o ESU e o Ca(ClO)2 apresentam potencial para aplicação clínica como irrigantes endodônticos uma vez que apresentaram efetividade antimicrobiana contra o E. faecalis.