Imunocitoquímica e imunohistoquímica para o diagnóstico laboratorial da leishmaniose tegumentar / Immunocytochemistry and immunohistochemistry for laboratorial diagnosis of cutaneous leishmaniasis

0 aumento significativo do número de casos notificados da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) e a expansão geográfica da endemia tem motivado o desenvolvimento de novas tecnologias para auxiliar no diagnóstico das leishmanioses, visando minimizar as restrições apresentadas pelos testes diagnósticos disponíveis nos serviços de saúde. 0 presente trabalho empregou imunocitoquimica e imunohistoquímica (ICQ/IHQ) como métodos diagnósticos laboratoriais para LTA. Amostras de culturas de Leishmania in vitro e cortes histológicos de lesões em animais infectados experimentalmente foram submetidos a ICQ/IHQ, utilizando anticorpos policlonais desenvolvidos para este estudo e o complexo avidina-biotina modificado (Ultra Streptavidin®). Em comparação com outras técnicas empregadas para o diagnóstico da LTA, nos casos avaliados, a IHQ apresentou resultados semelhantes aos da histopatologia com coloração HE, com sensibilidade de 33,3% para formas amastigotas. Quando considerada a presenva de antígenos de Leishmania no padrão celular, a IHQ apresentou uma sensibilidade de 83,3%, significativamente maior que na histopatologia e compatível com metodos padrão ouro de cultura e PCR. As metodologias de ICQ/IHQ desenvolvidas neste trabalho foram capazes de demonstrar em biópsias de lesões, a presença de formas amastigotas e antígenos de Leishmania, oferecendo contribuição adicional ao diagnóstico da LTA, sendo de facil aplicação e podendo ser utilizada no sistema público de saúde.

The significant increase in cutaneous leishmaniasis (CL) notified cases and the geographic expansion of this endemy has motivated the development of new techniques to help in leishmaniasis diagnosis, seeking the minimization of the restrictions imposed by the diagnostic tests available at the health services. The current study applied immunocytochemistry and immunohystochemistry methods (ICC/IHC) for laboratory diagnosis of CL. Imprints and histological sections from tissue infected with Leishmania were submitted to ICC/IHC methods using polyclonal antibodies developed for this study and a modified avidin-biotin complex (Ultra Streptavidin®). The samples also were submitted for routinely stained hematoxylin and eosin (H&E) specimens and gold standard methods (culture and PCR). Compared with other useful techniques for the CL diagnosis, ICC/IHC showed the same sensitivity results (33%) as H&E stain for amastigotes recognition. When the presence of Leishmania antigens was evaluated, ICC/IHC presented 83,3% sensitivity, i.e., higher than that detected by histopathology and equivalent with gold standard methods (culture and PCR). The ICC/IHC techniques developed in the current study were able to recognize amastigote forms and also Leishmania antigens in lesion biopsies, offering an additional help to CL diagnosis and it can be easily applied in the public health system.

Avaliação da sensibilidade e especificidade da metodologia de enzimaimunoensaio com micropartículas para dosagem de ferritinas / Sensibility and specificity evaluation of microparticle enzyme immunoassay method for ferritin measurement

A ferritina é a principal preteína envolvida no armazenamento de ferro, sendo encontrada no meio intracelular e também como um constituinte normal do plasma, fluídos corporais e das hemácias circulantes. Ferritinas derivadas de diferentes tecidos apresentam distintas propriedades como: estrutura primária, teor de fosfato no núcleo mineral, mobilidade eletroforética e proporção relativa de subunidades H e L, determinando diferenças estruturais, imunológicas, em ponto isoelétrico e capacidade oxidativa. estudos demonstram a relação direta entre a concentração de ferritina no soro e os estoques de ferro nos tecidos. Os sistemas comerciais disponíveis para a dosagem de ferritina plasmática nos laboratórios clínicos, estão baseados em ensaios imunoenzimáticos utilizando anticorpos antiferritina específicos ligados à enzimas. neste trabalho, avaliamos se a metodologia de enzimaimunoensaio com micropartículas (MEIA), do sistema ASXYM - Abbott Laboratories, quantifica adequadamente ferritinas em função do tecido de origem (baço, fígado e coração), e se alguns medicamentos, especialemente de uso prolongado, podem influenciar na metodologia. Os resultados das dosagens de ferritinas teciduais indicaram especificadade e sensibilidade para ferritina de baço (93 a 100%), porém não quantificando adequadamente as ferritinas de fígado (10%) e coração (0%). No estudo de interferência causada por medicamentos (nitrofurantoína, metronidazol, paracetamol, aciclovir e ciprofloxacina), observou-se que em concentrãções específicas de fármaco e proteína ocorre interferência significativa da ciprofloxacina na metodologia e, como consequência, nos resultados.

Repercussöes otorrinolaringológicas do abuso de cocaína e/ou crack em dependentes de drogas / Otorhinolaryngological repercussions of the abuse of cocaine and/or crack in addicted to drugs

A prevalência de pacientes viciados em cocaína e/ou crack parece estar aumentando; protanto, o médico deve estar preparado para diagnosticar o uso de drogas. Objetivos. Determinar se existem sinais típicos de uso de cocaína e/ou crack no trato respiratório superior ou na orofaringe em exame otorrinolaringológico comum. Orientar o médico no diagnóstico dos pacientes viciados nessas drogas. Métodos. Foram estudados 18 pacientes viciados em cocaína e/ou crack, que estavam internados em clínica psiquiátrica, através de anamnese e exame otorrinolaringológico simples (rinoscopia anterior e orofaringoscopia). Resultados. Foi impossível estabelecer uma correlação entre o tempo de uso, quantidade e freqüência no uso das drogas quanto aos sintomas e exame otorrinolaringológico. Conclusão. Devido à inespecíficidade no exame otorrinolaringológico do paciente viciado em cocaína e/ou crack, é necessário que o médico suspeite do abuso de drogas na história clínica; caso contrário, poderá não realizar este importante diagnóstico.