Estudio de casos de paracoccidioidomicosis infantil diagnosticados en el área de la Gran Caracas Venezuela / Study paracoccidioidomycosis diagnosed cases of childhood in the area of Greater Caracas Venezuela

La paracoccidioidomicosis pocas veces afecta niños y no es de denuncia obligatoria. Su verdadero impacto en la población infantil es desconocido. El objetivo fue determinar en número de casos de paracoccidioidomicosis infantil diagnosticados en centros de salud de la Gran Caracas, en niños con edades entre 0-15 años. Se evaluaron historias de niños con paracoccidioidomicosis, provenientes de hospitales de la Gran Caracas. Se revisaron 420 historias con diagnóstico de paracoccidioidomicosis, de las cuales 33 (7,9%) fueron niños menores de 15 años, siendo la media de edad 7,97 años. El género masculino predominó (69,7%), la razón masculino-femenino fue 1,5:1 en niños con edades de 0-7 años y 5,5:1 entre 8-15 años. La mayoría procedían del estado Miranda, 11 (35,5%) seguido del Distrito Capital 9 (29,1%). En 26 casos se clasificó la enfermedad, encontrando que 24 (92,3%) desarrollaron la forma aguda. Las principales manifestaciones clínicas precisadas en 25 historias fueron: fiebre 18 (72%) adenomegalias 16 (64%), hepatomegalia 12 (48,0%) y esplenomegalia 11 (44%). De 24 casos que tenían datos de laboratorio se observó que la eosinofilia y la anemia fueron los principales hallazgos. El diagnóstico micológico se realizó por serología en 24 (72,7%) casos, biopsia 11 (45,8%), examen directo 3 (12,5%) y cultivo 1 (4,2%). La paracoccidioidomicosis infantil es una entidad infrecuente, la cual se observa en 7,9% de los casos. Las manifestaciones más frecuentes son fiebre, adenomegalias y hepatoesplenomegalia. El diagnóstico de la paracoccidioidomicosis aguda infantil, siempre debe ser considerado en niños con edades de 0-15 años, en Venezuela.

Paracoccidioidomycosis rarely affects children, and it is not a notifiable disease. Its real impact in the child population is unknown. The aim of the study was to determine the number of paracoccidioidomycosis cases diagnosed in various health centers in Great Caracas, in children between 0-15 years. We reviewed 420 records with diagnosis of paracoccidioidomycosis from Hospital of Caracas. 33 (7,9%) were from children less than 15 years old. Age average 7,97 years. Male gender accounted for 69.7%, with a male: female relation of 1.5:1 in children between 0-7 years and 5,5:1 between 8-15 years. Most of the patients 11 (35,5%) came from Miranda state, followed bu Distrito Capital 9 (29,1%). In 26 patients the disease could be classified, from which 24 (92,3%) developed the acute form. Clinical manifestations, recorded in 25 cases were: fever 18 (72%), enlarged lymph nodes 16 (64%), hepatomegaly 12 (48,0%) and splenomegaly 11 (44%). From 24 cases in which laboratory data was recorded, eosinophilia and anemia were the most relevent findings. Mycological diagnosis was performed by serology in 24 (72,7%) cases, biopsy 11 (45,8%), direct examination 3 (12,5%) and culture 1 (4,2%). Child paracoccidioidomycosis is a rare disease, observed in 7, )% of cases. Most relevant clinical manifestations are fever, enlarged lymph nodes and hepatosplenomegaly. Acute paracoccidioidomycosis must be considered as a possible diagnosis in children between 0-15 years, in endemic countries such as Venezuela.

Humoral response of paracoccidioidomycosis sera in hamsters with different Venezuelan isolates

Humoral response of paracoccidioidomycosis sera in hamsters with different Venezuelan isolates. Paracoccidioidomycosis (PCM) is a progressive systemic mycosis caused by the fungus Paraccocidioides brasiliensis (Pb), endemic to Venezuela and Latin America. In this study, eight different Venezuelan isolates obtained from patients with PCM, were inoculated intraperitoneally in Syrian hamsters (Cricetus auratus) and studied by immune-serum. Each strain was collected by gently scraping the surface of the culture medium (Sabouraud Dextrose Agar) and suspended in 3ml of 0.15 M phosphate-buffered saline. The antigen obtained was called Paraccocidioides brasiliensis Crude Antigen (CAP). Immunoblotting results showed that the immune-sera from hamsters recognized at least 3 bands: one over 200 kDa, and two of 80 and 15-20 kDa. This study suggests that IgG anti-CAP can reveal a significant variability in the eight Venezuelan isolates. Sera from 88 infected hamsters were evaluated by ELISA with eight different CAPs and Western blot with CAP 37383. ELISA results showed that, the antigen of the virulent isolate 37383 had the highest percentage (38%) of positivity, while the non-virulent isolate 1458 had the lowest one (13.6%). Furthermore, scanning densitometry revealed that the isolate 37383 had less bands than the non-virulent isolates. These results suggest that the ELISA test with CAP 37383 can detect circulating antibodies, and that this virulent isolate may be useful for the diagnosis of PCM, and to monitor disease responses to treatments. Rev. Biol. Trop. 57 (3): 505-513. Epub 2009 September 30.

La Paracoccidioidomicosis (PCM), es una micosis sistémica causada por el hongo Paraccocidioides brasiliensis (Pb), endémica en Venezuela y Latino América. En este estudio ocho diferentes aislados venezolanos, obtenidos de pacientes con PCM, fueron inoculados intraperitonealmente en hámsteres y fueron estudiados por ELISA e inmunoblotting. Los antígenos obtenidos de P. brasiliensis fueron llamados, Antígeno Crudo (CAP). Los resultados del immunoblotting mostraron que los sueros inmunes de hámsteres reconocieron al menos tres bandas: una sobre 200, y otras de 80, y 15-20 kDa. Este estudio sugiere que la IgG anti-CAP muestra una variabilidad en los ocho aislados Venezolanos. Sueros de 88 hámsteres infectados fueron evaluados usando ELISA, el antígeno del aislado virulento 37383 mostró el más alto porcentaje de positividad (38%) en los sueros de los hámsteres estudiados. El aislado novirulento 1458 mostró un porcentaje bajo de positividad (13.6%). Además, un escaneo densitométrico reveló que el aislado 37383 tiene menos bandas que el otro aislado no-virulento. Por lo tanto, estos resultados sugieren que el ensayo de ELISA con CAP 37383 puede detectar anticuerpos circulantes y este aislado virulento puede ser útil para el diagnostico de PCM, y para el monitoreo de la respuesta al tratamiento de la enfermedad.

Factores predisponentes para la adquisición de candida albicans en el tracto urinario de pacientes adultos hospitalizados en el Hospital Universitario de Maracaibo durante el periodo 1999-2001 / Pre-disposition factors for the acquisition of candida albicans in the urinary tract of adult patients hospitalized in the Maracaibo University Hospital over the period 1999-2001

Con el fin de estudiar los factores que predisponen al paciente para la adquisición de Candida albicans en el tracto urinario, se realizó una investigación de tipo retrospectiva en el Hospital Universitario de Maracaibo durante el período 1999-2001. Para tal fin se tomó una muestra de 53 pacientes: 28 que mostraron la presencia de Candida albicans (Ca+) y 25 que no la mostraron (control), con una edad promedio de 42 años. Las variables estudiadas fueron sexo, tiempo de hospitalización (TH), ingreso a UCI (IU), uso de sonda vesical (SV), tiempo de colocación de sonda vesical (TCSV), uso de antibióticos (UA),tiempo de uso de antibióticos (TUAB) y número de antibióticos (NAB). Los datos se registraron en un instrumento tipo cuestionario. Los análisis estadísticos de los resultados mostraron que en los pacientes Ca+las variables: TH, TCSV, YUAB, NAB, IU y sexo femenino fueron más frecuentes. El análisis discriminante de las variables estudiadas permitió establecer relación estadísticamente significativa con la variables TCSV, TUAB y NAB, aunque esta última variable no tiene influencia en el modelo al analizar la ecuación discriminante. La prueba de Ji-Cuadrada indicó que hubo dependencia entre el sexo femenino, TCSV mayor a 10 días, NAB, mayor o igual a 2, TUAB mayor a 14 días. La remoción temprana de la sonda vesical y el adecuado uso de antibióticos durante la hospitalización, como medios de prevención podrían evitar la adquisición de C. albicans en la orina de pacientes hospitalizados.

Susceptibilidad antifúngica en dermatofitos / Antifungal susceptibility of dermatophytes

No existe hasta los momentos una prueba estandarizada para realizar la susceptibilidad antifúngica de los dermatofitos. El objetivo de este estudio fue implementar la técnica de los pozos de difusión para el estudio de la susceptibilidad de los dermatofitos. Se utilizaron un total de 100 aislados de dermatofitos (74 Trichophyton rubrum, 18 Trichophyton mentagrophytes, 1 Trichophyton tonsurans, 5 Microsporum canis y 2 Epidermophyton floccosum) provenientes de muestras clínicas aisladas e identificadas en la Sección de Micología Médica, IMT. Se empleó la técnica de los pozos de difusión con los siguientes antimicóticos: Griseofulvina, Terbinafina, Fluconazol e Itraconazol. Se aplicaron los criterios de interpretación acordados por la NCCLS. El inóculo, se estandarizó utilizando el peso como unidad. El medio Agar Staib demostró ser el más adecuado, al obtenerse un mejor crecimiento de los aislados en un 97%. Esta es la primera vez, que se utiliza el peso como medida para cuantificar el inóculo en los dermatofitos. La mayor sensibilidad se evidenció ante Terbinafina seguido de Griseofulvina e Itraconazol. No se demostró sensibilidad alguna ante el Fluconazol. Sin embargo se requieren más estudios en los cuales se relacione la susceptibilidad "in vitro" con los resultados "in vivo".

Estudio de 40 casos de Histoplasmosis en niños y revisión de la literatura / Study of 40 cases of histoplasmosis in children and literature review

En niños, la histoplasmosis es la micosis profunda más frecuente en nuestro país. No es de denuncia obligatoria, por lo que existe un gran subregistro. El objetivo de este trabajo es reportar los casos de histoplasmosis diagnosticados en niños en la Sección de Micología Médica del Instituto de Medicina Tropical (IMT). Universidad Central de Venezuela (UCV), entre julio 2004 y julio 2005, con la finalidad de dar a conocer los principales aspectos de esta entidad a la población médica, en especial a los pediatras. Se evaluaron los pacientes en edad pediátrica (0-18 años) que fueron traídos a la consulta de la Sección y las muestras biológicas que se recibieron en el lapso antes mencionado. Se realizó examen mitológico y se siguió la evolución con el tratamiento. Se encontraron 40 casos de histoplasmosis con edades comprendidas entre 14 días y 16 años, 15 del genero femenino y 25 del genero masculino. Seis eran menores de 1 año, la mayoría (25 casos) provenientes del Distrito capital. Dieciocho presentaron la forma de histoplasmosis diseminada de los cuales 4 fallecieron. Quince presentaron la forma pulmonar aguda y 5 meningitis crónica. Seis pacientes estaban desnutridos, 4 presentaron VIH y 4 tenían tuberculosis. En 18 pacientes se desconoce comorbilidad. Nueve pacientes tenían aumento de la VSG, 7 anemia, 5 leucopenia y 2 pancitopenia. Los datos epidemiológicos fueron sugestivos de histoplasmosis en todos los casos. Se reportaron 40 casos de histoplasmosis en niños, diagnósticados en la Sección de Micología Médica del IMT-UCV. La forma clínica más frecuente fue la histoplasmosis diseminada. Ante la presencia de niños con las características descritas, debe pensarse en histoplasmosis como diagnóstico diferencial, relacionando la epidemiología, clínica, radiología y exámenes de laboratorio. Es necesario practicar mitológico para confirmar la presencia de esta enfermedad.

Identification of cryptococcus neoformans isolates using staib agar without creatinine

En micología, el cultivo es la mejor manera de realizar el diagnóstico definitivo de una micosis. Muchos tipos de medios han sido desarrollandos y modificados de tal fin, utilizando las propiedades bioquímicas de los hongos para reconocerlos. Este último ha sido ampliamente usado para identificación del género cryptococcus y en otros hongos. El objetivo de este estudio fue demostrar la utilidad del agar Staib y de un medio de Staib modificado, sin creatinina, en el aislamiento e identificación de hongos patógenos. Cuarenta y seis aislados de Cryptoccocus neoformans más un control fueron identificados por criterios morfológicos y bioquímicos, usando la prueba de ureasa (agar urea christensen) y cultivo en medio Sablac. Las cepas fueron transferidas a placas de agar Staib estandar y de agar Staib sin creatinina. Las placas fueron evaluadas a tempreratura ambiente (26-28ºC) durante una semana y luego fueron evaluadas las características morfolóficas de las colonias y producción de fenoloxidasa. En 43 (91.5 por ciento) de las cepas estudiadas se observó producción de fenoloxidasa (presencia de colonias marrones) tanto en el agar estandar como en el agar sin creatinina. El agar Staib sin creatinina es un medio excelente para identificación de C. neoformans, con las ventajas de un bajo costo y fácil preparación

Candida spp en pacientes VIH/SIDA / Candida spp in patient VIH/SIDA

La candidiasis es la infección fúngica más frecuente en pacientes VIH seropositivos y con SIDA, siendo C. albicans la especie que predomina. En estos pacientes, la candidiasis se manifiesta más comúnmente como orofaringitis, con una incidencia que oscila entre 45 por ciento y 95 por ciento de todos los casos. En Venezuela son pocos los reportes que existen acerca de esta entidad en pacientes VIH/SIDA, por lo cual uno de los objetivos de esta investigación fue evaluar este aspecto. Se estudió una cohorte de 402 pacientes con VIH/SIDA con o sin orofaringitis y con o sin tratamiento antifúngico. Las especies de Candida más importantes aisladas fueron: C. albicans (80,41 por ciento), C. tropicalis (8,78 por ciento), C. glabrata (4,90 por ciento), C. dubliniensis (3,26 por ciento). Se evaluó la susceptibilidad de los diferentes aislados a las drogas antifúngicas con el método de la NCCLS y el método de los pozos de difusión. El 37,5 por ciento C. albicans provenientes de pacientes con tratamiento antimicótico fueron resistentes al fluconazol (resistencia secundaria) y 23,95 por ciento mostraron también resistencia al itraconazol (resistencia cruzada). Los ailados obtenidos se tipificaron a través de la reacción en cadena de la polimera (RAPD) y se estableció la que la misma representa una técnica útil para diferenciar Candida spp. En esta cohorte de pacientes evaluados, las características clínicas y demográficas son similares a las reportadas mundialmente, y que desde la introducción del TARGA, la frecuencia de las infecciones por Candida spp disminuyó. Hasta la presente fecha, en Venezuela no se había reportado el hallazgo de C. dubliniensis (3,26 por ciento).

Candida dubliniensis en pacientes VIH/SIDA: en Venezuela / Candida dubliniensis in patient VIH/SIDA: in Venezuela

En los últimos años, las enfermedades producidas por hongos han ido en aumento, debido en gran parte a la aparicón del síndrome de inmunodeficiencia adquirida. El incremento de estas micosis ha sido más notable en aquellas causadas por especies del género Candida, las cuales trae consigo una elevada morbi-mortalidad. Otras especies no-albicans tales como, Candida tropicalis, Candida parapsilosis, Candida glabrata, Candida krusei, Candida lusitaniae, Candida guillermondii y más recientemente Candida dubliniensis pueden estar involucradas en cualquier tipo de candidiasis. Esta última especie presenta características fenotípicas similares a C. albicans, siendo una de la más resaltante la producción de abundantes clamidoconidias. Candida dubliniensis al estar estrechamente relacionada desde el punto de vista fenotípico con C. albicans, hace dificultosa su identificación, sobre todo con los métodos convencionales de laboratorio y usualmente se ha identificado erróneamente como C. albicans. Actualmente existen múltiples opciones para una identificación presuntiva de C. dubliniensis, como es el caso de la utilización de paneles de identificación automatizada, medios cromogénicos (CHROMagar Candida), el uso del agar Staib, la prueba de la termotolerancia, entre otros; adicionalmente se pueden utilizar métodos de biología molecular los cuales son más específicos y sencibles para realizar una identificación definitiva de C. dubliniensis, permitiendo así por primera vez, la identificación fenotípica y genotípica de C. dubliniensis y el reporte de casos de candidiasis orofaríngea originada por C. dubliniensis en pacientes virus de inmunodeficiencia humana/síndrome de inmunodeficiencia adquirida en nuestro país.

Identificación de cryptococcus sp: mediante el auxonograma modificado por araujo / Identification of crytococcus sp: througgh the auxonogram method modified by araujo

Se identificaron 43 cepas de C. neoformas, mediante el uso de la prueba de auxonograma utilizando la técnica de Araujo, la cual es una modificación del método de Beijerinck. Los resultados obtenidos con esta técnica fueron similares a lo observado con la identificación automatizada con el MicroScan® DADE BEHRING. Los datos demostrados nos permiten afirmar que la técnica evaluada es efectiva, poco costosa y fácil de utilizar en un laboratorio de pocos recursos

Modificatión of the ID-fungal (IMMY) in inmune-diagnosis of deep mycosis

Se decsribe en esta nota técnica las modificaciones realizadas al sistema ID-fungal anticuerpos de la línea IMMY para serología de hongos. De las cuales la primera se relaciona con el incremento de la sensibilidad de la técnica a través de la concentración del suero, duplicando la cantidad del mismo cuando este es añadido a los pozos de difusión. Este procedimiento es útil principalmente en pacientes inmunocomprometidos en los cuales la cantidad de anticuerpos en sangre es baja. Con la segunda modificación se pretende facilitar la lectura de las bandas de precipitación mediante una coloración con azul brillante de Coomassie, lo cual a su vez permite la preservación y almacenaje de las placas en el tiempo

Actividad antifúngica in vitro de los análogos nucleósidos de los inhibidores no-nucleósidos de la transcriptasa reversa / Antifungal activities in vitro of the nucleoside analogous and of the monocleouside reverse transcriptase inhibitors

Venezuela, es endémica para la mayoría de las micosis profundas. Algunos pacientes con VIH+ o SIDA, no reciben profilaxis antifúngica ya sea por conteos CD4+ >100, o porque asisten a la primera consulta ya en un estado muy avanzado de enfermedad o por falta de recursos económicos. Sin embargo, nosotros hemos observado que nuestros pacientes de la Fundación Amigos por la Vida, ham experimentado una disminución en la aparición de infecciones fúngicas oportunistas (IFO) a pesar de que todavía no se ha evidenciado una evolución en el número de células CD4+. Estos pacientes reciben principalmente tratamiento antiretroviral a base de los inhibidores de la transcriptasa reversa análogos de nucleósidos (ITRN) (Zidovudina, Lamivudina, Stavudina) y al inhibidor de transcriptasa reversa no-análogo de nucleósidos (ITRNN) como es el Efavirenz. Por tal motivo se decide evaluar la suceptibilidad antifúngica "in vitro" de estas drogas. Se observa una actividad antifúngica de Efavirenz contra Cryptococcus neoformans, C. glabrata y C. krusei. En contraste encontramos que C. albicans, C. tropicalis y C. parapsilosis presentan un asensibilidad antifúngica ante Zidovudina, Lamivudina y Stavudina, y poco o ninguna sensibilidad ante Efavirenz. En base a estos hallazgos, nosotros pensamos que las drogas estudiadas pudieran inducir un efecto directo adicional contra Cryptococcus o Candida spp., independiente de la reconstitución inmunológica en individuos VIH positivos. El mecanismo de acción de las mismas no lo podemos explicar. A la luz de nuestros conocimientos esta sería la primera vez que se reporta en la literatura este hallazgo

Aislamiento de Candida dubliniensis en Venezuela / Candida dubliniensis isolation in Venezuela

En las dos últimas décadas, las enfermedades producidas por hongos han ido en aumento, especialmente las causadas por el género Candida. Siendo el grupo más afectado los individuos inmunocomprometidos, principalmente aquellos afectados con VIH/SIDA. Recientemente se ha demostrado una nueva especie de Candida denominada Candida dubliniensis, la cual ha adquirido importancia desde el punto de vista clínico, debido a que comparte características fenotípicas similares a C. albicans, trayendo como consecuencia una inadecuada identificación de especie y posibles errores terapéuticos al tratar a los pacientes que presentaron candidiasis, ya que Candida dubliniensis desarrolla con más facilidad resistencia a los diferentes antifúngicos utilizados para su tratamiento. En Venezuela hasta los momentos no ha sido publicado el hallazgo de esta especie, por tal motivo el objetivo de este trabajo fue el aislamiento de Candida dubliniensis a partir de 111 cepas identificadas como C. albicans provenientes de Micoteca de la Sección de Micología Médica del IMT de la UCV y del Hospital "Dr. Domingo Luciani", utilizando el medio de Staib agar, CHROMagar Candida y el uso de la prueba de Termotolerancia a 45 grados centígrados, siendo estos métodos de identificación fenotípica; además se empleo el panel de Identificación Rápida de Levaduras MicroScan Dade Behring. Se demostró que 16 (14,4 por ciento) cepas de las 111 cepas estudiadas presentaron características fenotípicas compatibles con C. dubliniensis, siendo esta la primera vez, a la luz de nuestros conocimientos que se identifica en Venezuela esta especie, mediante el uso de los caracteres fenotípicos de las cepas evaluadas

Experiencia en la aplicación de la técnica de inmunodifusión doble para el diagnóstico de las micosis profundas en la sección de micología médica del Instituto de Medicina Tropical (1999-2000) / Experience in the application of the immunodiffusion technique double for the diagnosis of the deep mycoses in the mycology setion it prescribes of the Institute of Tropical Medicine (1999-2000)

Debido al aumento cada vez más frecuemte de las micosis profundas, el empleo de método de inmunodiagnóstico que brinden la posibilidad de realizar un diagnóstico presuntivo precoz y además que permitan evaluar la evolución clínica del paciente, se ha convertido en una necesidad. Uno de los métodos más utilizados para este fin es la Inmunodifusión Doble, la cuál tiene la ventaja de ser económica, práctica y fácil de implementar en cualquier laboratorio. En este sentido, este estudio estuvo orientado a determinar la eficacia de está técnica durante la evaluación de pacientes en los cuales se sospechó la presencia de una micosis profunda. Además se trató de relacionar los resultados de esta prueba serológica con la identificación del agente causal a través del examen directo, cultivo y/o estudio histopatológico de los pacientes analizados, en los casos en que fue posible. Para tal fin se estudiaron 288 muestras de sangre total de pacientes procedentes de diferentes hospitales y clínicas del Area Metropolitana, entre los meses de Abril de 1999 y Diciembre del 2000. Se encontró seropositividad para Histoplasma capsulatum, Paracoccidioides brasiliensis y Aspergillus fumigatus en 49 de los mismos (17.01 por ciento). En 84 pacientes de los evaluados, se les practicaron además, examen directo, cultivo y/o biopsia del tejido afectado, de estos en 80 pacientes (95.24 por ciento) se confirmó el resultado serológico con los exámenes mencionados anteriormente. En pacientes con SIDA, se les logró aislar Histoplasma capsulatum a partir del cultivo del paquete globular, en cuatro de los pacientes estudiados