Efeito da radiação vermelha de baixa intensidade sobre o sêmen canino criopreservado / Effect of low intensity red light on the canine semen cryopreservation

O objetivo geral deste trabalho foi analisar o efeito da radiação vermelha de baixa intensidade sobre alguns parâmetros cinéticos do espermatozoide canino criopreservado. Ejaculados de oito cães adultos foram centrifugados, rediluídos em meio tris-gema de ovo com 6% de glicerol, e, posteriormente, fracionados em: T1: incidência de radiação vermelha (660 NM) (Fisioled - Mmoptics - 100mW) por 60 segundos, antes do resfriamento e após a descongelação; T2: incidência somente antes do resfriamento; T3: incidência somente após a descongelação; e T4: sem incidência. Após a descongelação, as amostras foram submetidas ao TTR utilizando-se Sperm Class Analyzer(r). No TTR0, TTR60 e TTR90, não houve diferença entre as variáveis analisadas pelo CASA. Somente no TTR30 os efeitos da incidência da radiação vermelha foram evidentes e significativos em T1 e T2; T1 resultou em baixa MT (12,5 + 10,6%) e T2 determinou o melhor resultado de MT 40,3 + 26,1%. De forma similar T1 apresentou maior número de espermatozoides estáticos (77,5±28,9%) em relação ao T2 (50,6±28%). Concluiu-se que a dupla incidência de radiação vermelha de baixa intensidade antes do resfriamento e após a descongelação teve efeito deletério sobre a motilidade do espermatozoide canino, expressa principalmente aos 30 minutos após descongelação.

The aim of this study was to analyze the effect of low intensity red light on some kinetic parameters of cryopreserved canine sperm. Ejaculates from 08 adult dogs were centrifuged, diluted in Tris-egg yolk with 6% glycerol, and subsequently separated into: T1: incidence of red light (660 nm) (Fisioled -MMOptics - 100mW) for 60 seconds before the cooling and after thawing, T2: just before cooling, T3: only after thawing, and T4: no incidence. After thawing the samples were subjected to TTR using Sperm analyzer(r). In TTR0, TTR60 and TTR90 there were no differences between the variables analyzed by CASA. Only in TTR30 the effects of the incidence of red light were visible and significant in T1 and T2. T1 resulted in low MT (12.5 ±10.6%) and T2 determined the best result of MT 26.1%±40.3. Similarly T1 showed a higher number of static spermatozoa (77.5±28.9%) compared to T2 (50.6±28%). We concluded that the double incidence of low intensity red light, before cooling and after thawing, had a deleterious effect on canine sperm motility expressed at 30 minutes after thawing.

Efeito da centrifugação e do líquido prostático homólogo na criopreservação de espermatozoides epididimários caninos / Effect of centrifugation and homologous prostatic fluid on canine epydidimal spermatozoa cryopreservation

Realizaram-se dois experimentos de crio preservação de espermatozoides epididimários caninos, investigando-se o efeito da centrifugação e da adição do líquido prostático sobre as características físicas do espermatozoide pós-descongelação. No experimento I, foi testado o efeito da centrifugação. As amostras congeladas sem centrifugação apresentaram pós-descongelação: motilidade total (MT) de 26,7±21,2 por cento, motilidade progressiva (MP) de 21,2±20,1 por cento e vigor espermático (V) de 2,2±1,3, e as congeladas após a centrifugação: MT de 23,9±17,9 por cento, MP de 20,6±17,4 por cento e V de 2,2±1,0. No teste de termorresistência, o período médio de duração com MT mínima de 10 por cento foi de 165±21,2 minutos sem centrifugação e de 77,5±63,6 minutos para as centrifugadas, indicando maior longevidade espermática das amostras não centrifugadas. No experimento II, foi avaliado o efeito da adição de líquido prostático homólogo no meio diluidor. As amostras congeladas sem líquido prostático no meio diluidor apresentaram MT de 13,3±13,1 por cento, MP de 10,9±11,4 por cento e V de 2,1±1,2, e as congeladas com líquido prostático MT de 14,1±12,6 por cento, MP de 12,2±11,6 por cento e V de 2,2±1,3. Os resultados sugerem que a centrifugação e a adição de 10 por cento de líquido prostático ao diluidor não tiveram efeito sobre as características físicas do espermatozoide epididimário canino pós-descongelamento.

The effect of centrifugation and the prostatic fluid addition were evaluated on the physical characteristics of the cryopreserved canine epydidimal spermatozoa. In the first experiment, the effect of centrifugation was analysed. The samples without centrifugation showed 26.7±21.2 percent of total motility (TM), 21.2±20.1 percent of progressive motility (PM), and 2.2±1.3 of intensity of movement (I). In addition, the samples after centrifugation showed 23.9±17.9 percent of TM, 20.6±17.4 percent of PM, and 2.2±1 of I. The mean time of samples duration, at least with 10 percent of total motility, was 165±21.2min without centrifugation and 77.5±63.6min with centrifugation during the thermal resistance test. It suggests a better spermatic longevity in samples without centrifugation. In the second experiment, the effect of the prostatic fluid addition was evaluated. The samples cryopreserved without prostatic fluid showed 13.3±13.1 percent, 10.9±11.4 percent, and 2.1±1.2 percent of TM, PM, and I, respectively. Furthermore, the samples with prostatic fluid showed 14.1±12.6 percent, 12.2±11.6 percent, and 2.2±1.3 percent of TM, PM, and I, respectively. These data support that centrifugation and 10 percent of prostatic fluid addition does not induce any effect on the physical characteristics of canine epydidimal spermatozoa cryopreserved.

Efeito de diferentes diluidores sobre a viabilidade espermática pós-descongelação de sêmen eqüino / Effect of differents freezing extenders on post thaw equine spermatozoa viability

Estudou-se o efeito de diferentes concentrações de gema de ovo, açúcares e tampões nos diluidores sobre a viabilidade espermática pós-descongelação de sêmen eqüino. Os diluidores foram: D1 = 10 por cento de gema de ovo e acréscimo de 50 por cento de lactose e glicose-EDTA em relação ao D5; D2= 10 por cento de gema de ovo e redução de 50 por cento de lactose e glicose-EDTA em relação ao D5; D3= 20 por cento de gema de ovo e acréscimo de 50 por cento de lactose e glicose-EDTA em relação ao D5; D4= 20 por cento de gema de ovo e redução de 50 por cento de lactose e glicose-EDTA em relação ao D5; D5= 20 por cento de gema de ovo e composição de lactose e glicose-EDTA segundo Martin et al. (1979). Cinco ejaculados de seis garanhões foram utilizados para testar os diluidores contendo diferentes agentes crioprotetores: 3,5 por cento de etilenoglicol e 5 por cento de acetamida. Após diluição final nos diferentes diluidores, o sêmen foi submetido a diferentes protocolos de congelação: com e sem resfriamento prévio. Após descongelação em banho-maria a 75°C, avaliaram-se a motilidade, o vigor, e a integridade estrutural e funcional das membranas espermáticas. A redução na concentração de gema de ovo de 20 por cento para 10 por cento, nos diluidores contendo a mesma concentração de açúcares e tampões, não alterou a capacidade crioprotetora dos diluidores com etilenoglicol ou acetamida. O aumento na concentração de açúcares e tampões no diluidor lactose-EDTA-gema de ovo não acrescentou efeito crioprotetor ao etilenoglicol e acetamida. Diluidores com maior osmolaridade tenderam a preservar melhor o sêmen eqüino congelado com etilenoglicol ou acetamida. Os melhores resultados de viabilidade espermática, pós-descongelação, foram para o sêmen congelado nos diluidores D1, D3 e D5 (P<0,05).

The effect of different egg yolk, sugars and buffering systems concentrations in the freezability of differents equine semen extenders was studied. Extenders were: D1=10 percent of egg yolk added of more 50 percent over the lactose and glicose-EDTA levels found in D5; D2=10 percent of egg yolk and reduction of 50 percent over the lactose and glucose-EDTA levels in D5; D3=20 percent of egg yolk added of more 50 percent over the lactose and glucose-EDTA levels in D5; D4=20 percent of egg yolk and reduction of 50 percent over the lactose and glucose-EDTA levels in D5; D5=20 percent of egg yolk and lactose and glucose-EDTA according to Martin et al. (1979). Five ejaculates of six stallions were used to test extenders using alternatively two differents cryoprotectants agents: 3.5 percent ethylene glycol and 5 percent acetamide. After the final dilution, the semen was submitted to differents freezing rates. Straws were thawed at 75° C during 7 seconds, followed by immersion at 37°C during 5 seconds. After thawing motility, vigour, structural and functional integrity of the membrane of the spermatozoa were evaluated. The reduction in the egg yolk concentration from 20 percent to 10 percent, in extenders with the same concentration of sugars and buffering systems, did not modify the crioprotectant capacity of the extender with ethylene glycol or acetamide. The increase in the concentration of sugars and buffering systems in the lactose-EDTA-egg yolk extender did not add crioprotectant effect to ethylene glycol and acetamide. Extenders with high osmolarity had tended to better preserve the frozen equine semen with ethylene glycol or acetamide. Better results of spermatic viability, after thawing, were obtained when semen was diluted in D1, D3 and D5 extender (P<0.05).

Teste hiposmótico para avaliação da viabilidade do sêmen eqüino resfriado com diferentes diluidores / Hypoosmotic test to predict viability of equine chilled semen in different extenders

Utilizou-se o teste hiposmótico (HO) para estudar a capacidade de preservação da membrana plasmática do sêmen eqüino resfriado em diferentes meios. Estimou-se a correlação entre os resultados do teste HO e os exames de rotina aplicados ao sêmen, usando-se sêmen de sete garanhões. Cada ejaculado foi diluído em três meios, Kenney (K), Baken com 3% de gema (B3) e Baken com 10% de gema de ovo (B 10), e resfriado a 5°e. Avaliaram-se a motilidade total (MT), a motilidade progressiva (MP), o vigor espermático (V), a porcentagem de espermatozóides morfologicamente normais (NOR) e os resultados do teste HO no sêmen fresco e a cada 24 horas pós-resfriamento. A longevidade espermática foi considerada como o tempo de manutenção da motilidade espermática progressiva superior a 10% do sêmen diluído e resfriado. Maior longevidade espermática foi obtida nas amostras diluídas em meio B3. Os resultados do teste HO sugerem que os diluidores à base de gema de ovo preservaram melhor a membrana plasmática. Foram obtidos valores de correlação (P<0,05) entre o teste HO e a motilidade espermática (MT=0,57; MP=0,59), e correlação baixa entre HO e NOR (0,16).

Modification of the short osmotic resistance test for evaluating the functional integrity of boar spermatozoa

Neste trabalho descreve-se a técnica do teste de resistência osmótica modificado (SORT modificado) e sua eficiência na avaliaçäo da integridade da membrana do acrossoma do espermatozóide do varräo. Modificaram-se as soluçöes usadas nos testes de resistência osmótica atuais, eliminando-se também a incubaçäo em soluçäo isosmótica (300 mOsml). Esta foi substituída pela percentagem de NAR das amostras de morfologia espermática

Teste hiposmótico na avaliaçäo do sêmen eqüino / Equine semen evaluation using hypoosmotic swelling test

Este trabalho teve como objetivo determinar o teste hiposmótico (HO) adequado a espécie eqüina e verificar sua variaçäo intra-ensaio. Utilizaram-se duas soluçöes de açúcar e duas soluçöes de eletrólitos em água destilada em seis diferentes osmolaridades: frutose, sacarose, citrato de sódio e cloreto de sódio e 50, 100, 150, 200, 250 e 300mOsmol/kg H2O. A incubaçäo nas soluçöes com 150mOsmol/kg H2O ou menos, nos quatro diferentes solutos, determinou aumento substancial da resposta ao teste HO. Nas soluçöes com osmolaridades de 150, 100 e 50, o número de espermatozóides reativos ao teste variou entre 25,50 a 38,75 por cento, independente do soluto utilizado. Observou-se tendência de melhores respostas ao teste HO com o uso de açúcares, entretanto o uso de frutose ficou restrito pela alteraçäo de visualizaçäo de gota citoplasmática. A soluçäo indicada para se realizar o teste HO para o sêmen eqüino é a de sacarose a 100mOsmol/kg H2O, com variabilidade intra-ensaio média de 12,18 mais ou menos 7,41, indicando alta repetibilidade

Puberdade em búfalos mestiços / Puberty in crossbred buffalloes

Utilizaram-se 24 búfalos machos, mestiços (Murrah x Jafarabadi), com idades entre 10 e 24 meses, criados extensivamente, com a finalidade de se caracterizar a puberdade e o desenvolvimento testicular. Observou-se alta correlaçäo entre circunferência escrotal e peso corporal e idade (r=0,90 e r=0,83, respectivamente). A transiçäo de pré-puberdade e a puberdade ocorreu entre 10 e 15 meses de idade, sendo a puberdade alcançada à idade média de 13 meses. A partir dos 16 meses de idade, a espermatogênese apresentou-se completa em todos os animais