Comparación de una prueba de PCR basada en los genes codificantes para la histona H2A/SIRE con pruebas serológicas convencionales para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas crónica en pacientes colombianos / Comparison of a PCR test based on the histone H2A/SIRE genes with classical serological tests for the diagnosis of chronic Chagas disease in Colombian patients

Introducción. El diagnóstico de la enfermedad de Chagas en sus fases latente y crónica se dificulta por la baja parasitemia, razón por la cual se recurre a métodos serológicos y moleculares. Objetivo. Comparar la prueba de reacción en cadena de la polimerasa basada en la amplificación del elemento SIRE insertado en el gen que codifica para la histona H2A con las pruebas serológicas convencionales para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas en pacientes colombianos. Materiales y métodos. Se realizó un estudio de concordancia comparando la PCR TcH2AF/R con las pruebas de inmunoensayo enzimático e inmunofluorescencia indirecta, determinándose además la sensibilidad y especificidad de la prueba. Se clasificaron y examinaron 156 individuos según los hallazgos clínicos y epidemiológicos y los resultados de las pruebas serológicas. Adicionalmente, 97 de las 156 muestras fueron comparadas con la PCR S35/S36. Resultados. De 156 muestras, 89 (57 por ciento) fueron positivas por IFI y ELISA, y 84 (53,8 por ciento) presentaron el perfil de amplificación correspondiente a la banda esperada de 234 pb, obteniéndose una sensibilidad de 88 por ciento (I.C. 95 por ciento: 75 por ciento - 95 por ciento) y especificidad de 92,5 por ciento (I.C. 95 por ciento: 87,7 por ciento - 97,2 por ciento). El índice kappa, indicador de concordancia entre las pruebas serológicas y TcH2AF/R fue de 0,8 (I.C. 95 por ciento: 73 por ciento - 86 por ciento), en tanto entre las PCR TcH2AF/R y S35/S36 fue de 0,9 (I.C. 95 por ciento: 84 por ciento - 96 por ciento), interpretados como una concordancia buena y casi perfecta, respectivamente. Conclusiones. La PCR TcH2AF/R es una prueba diagnóstica promisoria complementaria a las pruebas serológicas, para la detección de Trypanosoma cruzi.

Introduction. Diagnosis of Chagas disease in its latent and chronic phase is difficult because of the low parasitemia levels. Therefore, serological and molecular techniques are necessary to achieve an appropriate diagnosis. Objective. The polymerase chain reaction based on the amplification of the SIRE element inserted into H2A encoding genes was compared with classical serological tests for the diagnosis of Chagas disease in Colombian patients. Materials and methods. An agreement study was carried out by comparing the PCR with ELISA (enzyme linked immuno sorbent assay) and IFAT (indirect immunofluorescence) tests. In addition, the PCR sensitivity and specificity were determined. A sample of 156 individuals was tested with the H2A PCR primers after a Chagas disease classification based on clinical, epidemiological and serological data associated with each patient. In addition, 97 out of 156 samples were also compared with the S35/S36 PCR primers. Results. Eighty-nine of 156 samples (57%) were positive by both IFAT and ELISA and 84 (53.8%) presented the expected 234 bp amplification fragment. The sensitivity of the TcH2AF/ R PCR was 88% (95% C.I.: 75%--95%) and its specificity 92.5% (95% C.I.: 87.7%--97.2%). The kappa index for concordance between serological tests and TcH2AF/R PCR was 0.8 (95% C.I.: 73%--86%), and between the TcH2AF/R and S35/S36 PCR primers was 0.9 (95% C.I.: 84%-- 96%). These indices indicated a “good” and “almost perfect” agreement, respectively. Conclusions. The TcH2AF/R PCR is a promising diagnostic tool for the detection of T. cruzi and is suggested as a tool complementary to the classical serological tests.

Estandarización de la prueba de ELISA IgM en el diagnóstico de absceso hepático amebiano / IgM ELISA test standarization for amebic liver abscess diagnosis

Objetivo: estandarizar la técnica de ELISA IgM en el diagnóstico de absceso hepático amebiano. Diseño: estudio retrospectivo / propectivo, descriptivo, transversal, de tecnologías deiagnósticas para diferenciar etiología en absceso hepático. Lugar: pacientes de diferentes zonas del país. Población: se recolectaron tres grupos: primero, pacientes con absceso hepático amebiano, absceso hepático no amebiano o absceso hepático mixto; segundo, pacientes asintomáticos para amebiosis intestinal y extraintestinal; tercero, pacientes con hepatopatías diferentes. Mediciones: ELISA IgG, IgM, inmunodifusión y coprológico, se determinó el punto de corte para IgM y tablas de contingencia de análisis comparativo. Resultados: se recolectaron 81 casos entre sintomáticos y asintomáticos. Absceso hepático amebiano 34, promedio de edad 36; absceso hepático no amebiano 18; promedio de edad 45; absceso hepático mixto 4; asintomáticos 23, rango de edad 5 – 49 y otras hepatopatías 2 (absceso por Ascaris lumbricoides y ecografía hepática falsa positiva) con ELISA IgG e IgM (-). Punto de corte ELISA IgM (+) e¼ 0.511. Sintomáticos con absceso hepático amebiano y absceso hepático mixto ELISA IgG e IgM (+) 21 por ciento e IgG (+) pero IgM (-) 79 por ciento; absceso hepático no amebiano ELISA IgG e IgM (-) 100 por ciento. Pacientes asintomáticos con complejo Entamoeba histolytica / Entamoeba dispar y otros parásitos 100 por ciento (5/5) ELISA IgM (-) tanto los de ELISA IgG (+) 2 como IgG (-) 3 pacientes. Conclusiones: la prueba de ELISA IgG sigue siendo una herramienta diagnóstica para discernir etiología amebiana en absceso hepático. Se determinó el punto de corte par ELISA IgM con valor de e¼ 0.511 para el diagnóstico de absceso hepático amebiano con sensibilidad de 18 por ciento pero con especificidad de 100 por ciento y valor predictivo positivo de 100 por ciento

Diseño y estandarización de una prueba de PCR para la detección específica de Trypanosoma cruzi / PCR design and standardization for Trypanosoma cruzi specific detection

Objetivo: Tripanosoma cruzi, agente causal de la enfermedad de Chagas, presenta dos tipos de unidades H2A:1,2 y 0,76 Kb. Dada la ausencia de la unidad de 1,2 KB en T. rangeli, en este trabajo se desarrolló una prueba de PCR para la detección de T. cruzi, usando como blanco este gen. Materiales y métodos: los oligonucleótidos TcH2AF y TcH2AR fueron diseñados usando el programa Oligo TM versión 4.0 for Macintosh. La reacción de PCR (Tris-HCI 10 mM pH 9, KCl 50 mM, triton x-100 0,1 por ciento dNTPs 200 mM, cebadores 20 pmoles, MgCl2 1,5 mM, Taq DNA polimerasa 1,25 U y ADN 125 ng) fue sometida al siguiente programa en un termociclador PTC-100 MJ-Research: denaturación 95°C por 5 min, 15 ciclos con denaturación a 95°C por 30 s, anillaje y extensión a 72°C por 1 min y 20 ciclos con anillaje a 65°C durante 30 s y extensión a 72°C por 30 s. los productos amplificados fueron visualizados en geles de agarosa al 1,5 por ciento, teñidos con bromuro de etidio. Resultados: TcH2AF/R amplifican una banda de 230 pb en cepas pertenecientes a los Zimodemas I, II y III de T.cruzi, con una sensibilidad de 1fg aun en la presencia de ADN heterólogo; mientras que no amplifican el ADN de cepas de T. rangeli tanto KP1(+) como KP(-). Conclusiones: esta PCR constituye una herramienta potencial para la detección de T. cruzi en muestras biológicas de vector, humano y/o ratón

Lagochilascaris minor in a patient from the Colombian amazon: a case report

Infeccao cronica (10 anos) por Lagochilascaris minor e descrita em mulher da regiao amazonica colombiana. Este e o terceiro caso de infeccao por este parasita que e descrito ate agora na Colombia, e o unico em pessoa proveniente da regiao amazonica colombiana

Variación antigénica de la cepa Munantá de Trypanosoma cruzy después de pase por ratón / Antigenic variation in Trypanosoma cruzi Munanta strain after passages in mice

Este estudio evaluó los cambios en el perfil isoenzimático y antigénico de la cepa Munantá de Trypanosoma cruzy después de dos pases consecutivos por ratón, mediante electrofóresis isoenzimática, electrofóresis en PAGE-SDS e immunoblot. Los resultados obtenidos muestran diferencias estadísticamente significativas entre la cepa antes y después de los pases en los animales, lo cual sugiere que el ratón no es un modelo recomendable para obtener las formas tripomastigotas de la cepa Munantá del parásito destinadas a estudios de la respuesta inmune

Deficiencia de hierro, vitamina A y prevalencia de parasitismo intestinal en la población infantil y anemia nutricional en mujeres en edad fertil, Colombia 1995-96 / Iron and vitamin A deficiency and prevalence of intestinal parasitism in child population and nutritional anemia in fertile age women, Colombia 1995-96

La investigación deficiencia de hierro - vitamina A y prevalencia de parasitismo intestinal en población infantil y anemia nutricional en mujeres en edad fértil es un estudio transversal, descriptivo, analítico y epidemiológico. Se realizó en todo el país distribuido en cinco regiones (Atlántica, Bogotá, Central, Oriental y Pacífica) con una cobertura de 61 municipios y una población estudio constituida por 2.233 niños, 2340 mujeres y 288 embarazadas de la zonas rural y urbana de Colombia. Este estudio se desarrolló con el fin de actualizar la información sobre la situación nutricional respecto a micronutrientes tales como hierro y vitamina A, en población infantil de 12 a 59 meses de edad, madres de estos niños y embarazadas, para determinar los grupos, regiones y zonas en mayor riesgo, aportar las bases para la planificación de acciones de control y vigilancia epidemiológica de las deficiencias de micronutrientes en Colombia y establecer el grado de infestación parasitaria en la población infantil seleccionada en el estudio. Se demostró que la anemia se presenta predominantemente en el grupo de niños de 12 a 23 meses de edad y que la mayor prevalencia se observa en la región atlántica, tanto para mujeres como para niños. A nivel nacional, la mayor prevalencia de anemia (46 por ciento) se encuentra en las embarazadas. Respecto a la deficiencia de vitamina A, la población más afectada es el grupo entre 24 y 35 meses de edad. El 14.2 por ciento de la población tiene una deficiencia moderada de vitamina A, siendo la región pacífica (20,3 por ciento) la más afectada y 1,5 por ciento tiene deficiencia severa de vitamina A, presentando el mayor porcentaje, la región atlántica