Effect of the trehalose levels on the screening of yeast as probiotic by in vivo and in vitro assays

Probiotics are viable defined microorganisms (bacteria or yeasts) that exert a beneficial effect on the health of the host when ingested in adequate amounts. Screening for such biotherapeutic agents is commonly performed by in vitro assays simulating gastrointestinal environment to determine the ability to survive in the digestive tract. In the present study, the possibility of extrapolation of data obtained in in vitro assays to in vivo conditions was studied using five Saccharomyces cerevisiae strains isolated from Brazilian Atlantic rain forest. Trehalose contents and survival after exposure to a combination of physiological stresses generally found in the gastrointestinal tract of humans were determined for the five yeasts and compared to the behavior of Saccharomyces boulardii, a well-known probiotic. The results were completed with the colonization capacity of the gastrointestinal tract of gnotobiotic mice by these yeast strains. Some results obtained by in vitro assays are not confirmed by in vivo experiments, indicating that the extrapolation cannot be always done.

Probióticos são definidos como microrganismos (bactérias e leveduras) que exercem um efeito benéfico na saúde do hospedeiro quando ingeridos em quantidades adequadas. A seleção desses agentes bioterapêuticos normalmente é feita por testes in vitro simulando o ambiente gastrointestinal que determina a capacidade de sobrevivência no trato digestivo. Neste trabalho, a possibilidade de extrapolação dos dados obtidos nos testes in vitro para as condições in vivo foi estudada utilizando cinco linhagens de Saccharomyces cerevisiae isoladas da floresta Atlântica brasileira. O conteúdo de trealose e a sobrevivência após a exposição a diversos estresses fisiológicos geralmente encontrados no trato gastrointestinal de humanos foram determinados para as cinco linhagens e os resultados comparados com a Saccharomyces boulardii, um probiótico conhecido. Esses resultados foram completados com a capacidade de colonização do trato gastrointestinal de camundongos gnotobióticos pelas leveduras. Pelos resultados obtidos, concluimos que os testes in vitro não são confirmados pelos ensaios in vivo, indicando que essa extrapolação não pode sempre ser feita.

Protection by Lactobacillus acidophilus UFV-H2B20 against experimental oral infection with Salmonella enterica subsp. Enterica Ser. Typhimurium in gnotobiotic and conventional mice

The ability of Lactobacillus acidophilus UFV-H2B20 to antagonize Salmonella enterica subsp. enterica ser. Typhimurium and to reduce the pathological consequences for the host was determining using conventional and gnotobiotic animals. Conventional NIH mice received daily by gavage a 0.1 ml suspension containing about 10(8) cfu L. acidophilus UFV-H2B20 and germfree animals received a single 0.1 ml dose. The gnotobiotic and conventional groups were infected orally with 10(2) and 10(5) cfu of S. Typhimurium, respectively, 7 days after the beginning of treatment. Control groups were treated with sterile saline instead of Lactobacillus. Survival data showed a protective effect against the pathogenic bacteria in both conventional and gnotobiotic Lactobacillus-treated mice. L. acidophilus UFV-H2B20 colonized the digestive tract of gnotobiotic mice and the number of viable cells ranged from 10(9) to 10(10) cfu/g of faeces. In both experimental and control gnotobiotic animals, S. Typhimurium became rapidly established at a level ranging from 108 to 1010 cfu/g of faeces and remained at high levels until the animals died or were sacrificed. In conclusion, the previous treatment of mice with L. acidophilus UFV-H2B20 protects the animals against the experimental infection with S. Typhimurium but this protection was not due to the reduction of the pathogenic populations in the intestines.(au)

Bases experimentais e clínicas atuais para o emprego dos probióticos / Up-to-date clinical and experimental basis for the use of probiotics

Objetivo: Avaliar o potencial dos probióticos ou agentes bioterapêuticos para a prevenção e/ou o tratamento de infecções intestinais específicas. Métoodos: O sistema de levantamento bibliográfico Medline foi usado para procurar todos os artigos relevantes no período de 1990 até fevereiro de 1998. As referências bibliográficas dos artigos obtidos foram também usadas. Todos os experimentos com animais e os estudos controlados com placebo em humano foram examinados para obter informações sobre os mecanismos de ação, eficiência ou efeitos adversos desses bioterapêuticos. Resultados: Na primeira parte desta revisão, os diferentes mecanismos de ação, bem demonstrados em animais de laboratório e que têm eficiência na melhora dos processos diarréicos, foram discutidos. Os mais importantes são a indução enzimática das dissacaridases, os efeitos tróficos sobre a mucosa intestinal, a ação no bloqueio das toxinas bacterianas e a indução da imunidade. Os efeitos terapêuticos no ser humano, principalmente nas doenças do aparelho digestivo, foram relatados na segunda parte. Os estudos conntrolados com placebo demonstram efeitos benéficos na evolução da diarréia aguda infantil, na diarréia do viajante, na diarréia induzida pelo uso de antibióticos, com ou sem enterocolite associada ao Clostridium difficile (pseudomembranosa) e naquelas assoociada à imunodepressão, inclusive na AIDS. Os agentes bioterapêuticos que merecem as considerações mais importantes foram os lactobacilos, as bifidobactérias e o Saccharomyces boulardii. Conclusões: Temos agora evidências de que a administração de microorganismos selecionados é benéfica na prevenção e no tratamento de certas infecções intestinais. A maior experiência na literatura é com o uso do Saccharomyces boulardii. A discussão considerou a perspectiva para novas indicações, o provável efeito sinérgico de diferentes probióticos devido aso seus diferentes e os complementares mecanismos de ação. Enfatizou-se a importância de mais estudos experimentais e clínicos para melhor entendimento de suas atividades e para a indicação dos probióticos em outras situações clínicas

Influence of dietary protein content on Trypanosoma cruzi infection in germfree and conventional mice

Camundongos isentos de germes (GF) e convencionais (CV) foram alimentados com racoes contendo 4,4, 13,2 ou 26,4 por cento de proteina nao ganharam peso durante quatro semanas, enquanto a racao deficiente em proteina nao afetou o crescimento dos camundongos GF. Apos quatro semanas nessas racoes, os camundongos foram inoculados com 5x10 elevado ao cubo tripomastigotos de Trypanosoma cruzi. A deficiencia em proteina afetou menos os camundongos GF do que os CV, segundo os seguintes parametros: ganho em peso, hemoglobina, niveis em proteina e albumina no plasma e conteudos em agua e proteina na carcassa. A infeccao com T. cruzi produziu um decrescimo significante nos niveis em hemoglobina, na contagem de celulas vermelhas sanguineas e nos conteudos em agua e proteina na carcaca. Este decrescimo foi mais acentuado nos camundongos GF...

Efeito antagonista contra clostridium perfrigens de uma substância produzido por Peptostreptocucus sp. em camundongo gnotobiótico / Anatagonistic effect against clostridium perfrigens of a diffusible copound produced by a peptostreptococcus sp from human intestinal flora in mice

Resumo: Um Peptrostreptocuccus so foi isolado de uma flora intestinal fecal humana. Esse microorganismo produz uma substância difusível apresentando um efeito antagonista contra Clostridium perfringens em camundongo gnotobiótico. Esse composto diluível foi ativo contra a cepa alvo tanto na presença como na ausência de uma microflora intestinal omplexa de origem humana quando foi testado em camundongo gnotobiótico (au)

American trypanosomiasis (Chagas' disease) in conventional and germfree rats and mice

Camundongos CFW (LOB) e ratos Wistar e Sprague-Dawley isentos de germes (GF) e convencionais )CV) foram infectados com Trypanosoma cruzi. A doença foi mais grave nos animais GF do que nos CV, o que foi demonstrado por: (1) uma parasitemia mais precoce e mais intensa; (2) uma mortalidade mais precoce; (3) baço duas vezes maior; (4) um parasitismo celular e tissular mais intenso; (5) sinais viscerais de insuficiência cardíaca