Detección de infecciones inaparentes de la enfermedad de Chagas en individuos asintomáticos de la etnia Yukpa del occidente de Venezuela / Chagas disease inapparent infection in asymptomatic individuals from a Yukpa ethnic community in western Venezuela

Inapparent infections by Trypanosoma cruzi were detected, for the first time, in symptomless seropositive healthy individuals from a Yukpa ethnic community in western Venezuela where Chagas disease had not been previously reported. Seropositivity was detected in 24 out of 173 (13.9%) sera samples taken from asymptomatic people by using three serological methods (DAT, IFAT, ELISA). Complementary analyses by IFAT revealed a low level of anti-T. cruzi specific IgM and IgG in all seropositive people when compared with detected levels in acute and chronic chagasic patients included as positive controls. In addition, 100% of the sampled dogs (8) were seropositive showing a level of anti-T. cruzi IgG similar to that detected in humans. Genotyping of a T. cruzi isolate obtained from an infected wild specimen of Rhodnius pictipes, revealed the circulation of lineage1 (DTU1) in the study area. The importance of the detection of asymptomatic T.cruzi-infections in this indigenous community and its potential epidemiological implications are discussed.

Infecciones inaparentes por Trypanosoma cruzi fueron detectadas, por vez primera, en individuos seropositivos asintomáticos muestreados en una comunidad Yukpa del occidente de Venezuela donde no se ha registrado hasta el presente enfermedad de Chagas. De un total de 173 muestras de suero examinadas 24 (13,9%) fueron registradas como seropositivas utilizando tres pruebas serológicas. Análisis complementarios por IFI revelaron bajos niveles de IgM e IgG cuando las muestras de individuos seropositivos asintomáticos fueron comparadas con casos agudos y crónicos incluidos como controles positivos. La totalidad de perros examinados (8) reveló seropositividad, registrándose niveles de IgG similares a los detectados en el grupo humano. La caracterización molecular de un aislado de T. cruzi obtenido de un espécimen silvestre de Rhodnius pictipes reveló la circulación del linaje 1 (DTU1) en el área de estudio. Se discute la importancia de infecciones asintomáticas por T. cruzi y sus implicaciones epidemiológicas en la comunidad indígena estudiada.

Primoinfección por Trypanosoma cruzi previene re-infecciones severas en ratones / Trypanosoma cruzi primary infection prevents severe re-infection in mice

The effect of Trypanosoma cruzi re-inoculations on experimentally infected mice was evaluated. Mice received a primary infection by intradermal inoculation of 5x103 T. cruzi metacyclic infective forms from laboratory infected Rhodnius prolixus. From 200 mice initially infected, 52 survived the course of the infection during 23 weeks. From these, 45 mice were re-inoculated and seven used as infected control. Two re-inoculations were performed using the same conditions as in the prime-infection. Observations on re-inoculated mice revealed a parasitemia level lower than that detected during the primary-infection. Serologic evaluation showed no variation in the immunoglobulin profile, maintaining similar IgM and IgG levels after re-inoculations. Similar mortality rates were observed in primary-infected, re-inoculated and infected control mice. No remarkable histopathological changes attributable to re-inoculation were detected. These results lead us to conclude that T. cruzi re-inoculation in mice previously infected with the same parasite does not produce a reactivation of infection similar to the typical acute clinical or immunological profiles. This also suggests that T. cruzi primary infection may prevent severe re-infection, establishing a protective stage making infected mice resistant to a second infection. Epidemiological implications of the present findings are discussed.

Se evalúa el efecto de reinoculaciones por Trypanosoma cruzi en ratones experimentalmente infectados. De un total de 200 ratones que fueron infectados por vía intradérmica con un inóculo de 5x103 tripomastigotes metacíclicos provenientes de especimenes de Rhodnius prolixus, 52 sobrevivieron a la primo-infección luego de 23 semanas. De estos 45 fueron re-inoculados en la misma forma como en la infección primaria y siete fueron utilizados como controles infectados no re-inoculados. Observaciones sistemáticas llevadas a cabo en muestras de los ratones re-inoculados revelaron parasitemias significativamente menores que las detectadas durante la primo-infección. La evaluación serológica no mostró diferencias en los niveles de IgM e IgG entre ratones primo-infectados y los re-inoculados. Observaciones histopatológicas no mostraron cambios atribuibles al efecto de las re-inoculaciones en muestras de corazón y músculo esquelético. Una tasa similar de mortalidad fue observada en ratones primo-infectados, re-inoculados y controles infectados. Se concluye que re-inoculaciones con T. cruzi en ratones previamente infectados con el mismo parásito no producen reactivación de la infección similar al típico cuadro agudo. Asimismo, se sugiere que la primo-infección por T. cruzi previene una reinfección severa estableciendo un estado de protección y resistencia a subsecuentes infecciones. Se discuten las implicaciones epidemiológicas de los presentes hallazgos.

Valoración comparativa de pruebas serodiagnósticas utilizadas para detectar enfermedad de Chagas en Venezuela / Comparative evaluation of serologic diagnostic tests used to detect Chagas disease in Venezuela

Se presenta la valoración comparativa de 8 técnicas de uso común en el despistaje serológico de la enfermedad de Chagas utilizando muestras de pacientes de diversas procedencias del occidente de Venezuela. En el estudio fueron utilizados métodos serológicos convencionales (TAD, IFI, ELISA) y pruebas de diagnóstico comercialmente expendidas en el país (Pharmatest®, Chagatest ELISA®, Chagatest ELISA Recombinante V.3.0®, Test ELISA para Chagas III® y Chagas Stat PakTM Assay®). La comparación de los resultados no reveló diferencias estadísticamente significativas entre los niveles de sensibilidad y especificidad de las técnicas evaluadas (P>0.05). Se sugiere, para la obtención de un diagnóstico preciso, la implementación de pruebas de rutina y pruebas confirmatorias. El análisis de la relación costo-beneficio reflejó diferencias entre las técnicas evaluadas, sugiriendo su uso de acuerdo a las condiciones de servicio presentes en cada centro diagnóstico, para lo cual se proponen pruebas candidatas para la rutina y la confirmación diagnóstica. Se demuestra la disminución progresiva de reactividad, con el consecuente incremento de resultados erróneos, en una prueba comercial sometida a sucesivos cambios de temperatura en el tiempo

The comparative evaluation of conventional serologic methods (DAT, IFAT, ELISA) and commercial tests (Pharmatest®, Chagatest ELISA®, Chagatest ELISA Recombinant V.3.0®, Test ELISA for Chagas III®, Chagas stat pakTM assay®) commonly used to detect Chagas disease is presented. Sera samples were taken from chagasic patients and controls from different rural localities of western Venezuela. Statistical comparison of the sensitivity and specificity level, revealed no-significant differences among methods (P > 0.05). To warrant a secure sero-diagnosis the implementation of a routine and a confirmatory test is suggested. The cost-benefit analysis showed significant differences among methods, suggesting its use according to the condition of each diagnostic center. Considering the results obtained in the present study a combination of candidate tests is proposed to be used either as a routine or confirmatory method according to the circumstances. The effect of thermo-shock on the loss of reactivity of a commercial test is demonstrated

Supervivencia e infectividad de formas metacíclicas de Tripanosoma cruzi en alimentos experimentalmente contaminados / Survival and infectivity of Trypanosoma cruzi metacyclic forms in experimentally contaminated food

Se registra el tiempo de supervivencia de formas metacíclicas de Trypanosoma cruzi, obtenidas del tracto digestivo de Rhodnius prolixus, sobre alimentos contaminados experimentalmente.Observaciones entre 1h y 18h post-contaminación revelaron la presencia de abundantes y activosmetacíclicos en los alimentos contaminados durante las primeras 6 horas, declinando la poblaciónde los mismos sobre la décima hora. La actividad de las formas metacíclicas no mostró diferencias en alimentos contaminados en fase sólida o líquida. Asimismo, se demuestra la alta infectividad de metacíclicos de T. cruzi que sobreviven en alimento contaminado luego de ser ingeridos por un hospedador vertebrado

The survival of Trypanosoma cruzi metacyclic forms in contaminated food is reported. Observationscarried out 1-18h after contaminating food withmetacyclics from infected Rhodnius prolixus, revealedabundant and active flagellates during the first 6h postcontamination.The same activity was observed inmetacyclics maintained on liquid or solid contaminatedfood. In addition, the infectivity of surviving T. cruzimetacyclic forms in contaminated food after being ingested by a vertebrate host is demonstrated