ABSTRACT
ABSTRACT: To know the non-toxic cryoprotectants to fish oocytes is of extreme importance for tests that aim to increase oocyte resistance to cold, thus allowing more advanced studies in cryopreservation. Therefore, commonly used cryoprotectants such as methanol, dimethyl sulfoxide, ethylene glycol, propylene glycol, sucrose and fructose were studied. Immature oocytes from the initial to vitelogenic (diameter <1.7 mm) and mature (diameter >1.8 mm) stages of Steindachneridion parahybae were evaluated. Four distinct experiments were performed, three using immature oocytes and one using oocytes at the mature stage. For each oocyte stage, the best maintenance solution to be used: Hank or 50% L15 and; viability after baths for 30min (room temperature) at cryoprotectant concentrations ranging from 0.25 to 4M were evaluated. Different tests were used to evaluate oocyte viability: in vitro maturation followed by observation of germinal vesicle breakdown (only for immature oocytes), Trypan Blue staining (all stages) and fertilization and hatching rates (mature stage only). Results showed that the toxic effect of cryoprotectants on oocytes generally increases with increasing concentrations. Sensitivity of oocytes to cryoprotectants increases according to the stage of development, with mature oocytes being more sensitive. Sucrose, fructose, methanol, propylene glycol and dimethyl sulfoxide can be used as cryoprotectants for S. parahybae oocytes.
RESUMO: Conhecer os crioprotetores não tóxicos aos oócitos de peixes é de extrema importância para testes que visam aumentar a resistência dos oócitos ao frio, permitindo, assim, estudos mais avançados em criopreservação. Desta forma, crioprotetores comumente utilizados como o metanol, dimetil sulfóxido, etilenoglicol, propilenoglicol, sacarose e frutose foram estudados. Os oócitos imaturos, nos estágios inicial até vitelogênico (diâmetro <1,7mm), e maduros (diâmetro >1,8mm) de Steindachneridion parahybae foram avaliados. Quatro experimentos distintos foram realizados, sendo três destes utilizando oócitos imaturos, e um usando oócitos no estágio maduro. Para cada estágio oocitários foram avaliados, considerando qual a melhor solução de manutenção a ser utilizada: Hank ou 50% L15 e; viabilidade após banhos por 30min (temperatura ambiente) em concentrações de crioprotetores, variando de 0,25 a 4M. Diferentes testes foram utilizados para avaliar a viabilidade dos oócitos: maturação in vitro seguido por observação da quebra da vesícula germinativa (somente para oócitos imaturos), coloração por Azul de Tripan (todos os estágios) e taxas de fertilização e eclosão (somente no estágio maduro). Os resultados mostraram que o efeito tóxico dos crioprotetores em oócitos geralmente crescem com o aumento das concentrações. A sensibilidade dos oócitos a crioprotetores aumentam de acordo com o estágio de desenvolvimento, com oócitos maduros sendo mais sensíveis. Sacarose, frutose, metanol, propileno glicol e dimetil sulfóxido podem ser usados como crioprotetores para oócitos de S. parahybae.
ABSTRACT
The Steindachneridion parahybae is an endangered catfish from Brazil and strategies applied for gametes optimization are necessary. The aim of this study was to assess inseminating doses and water volume upon the fertilization, hatching rates and percentage of normal larvae in S. parahybae . Was used a randomized design in factorial scheme (4×4) with four inseminating doses: 1.0×104, 1.0×105, 1.0×106, 1.0×107spermatozoa oocyte-1 and four volumes of water: 1, 35, 65 and 95mL of water g-1 of oocytes. The combination of doses and volumes were performed in triplicates (n=48). Each incubator (1.5L of useful volume) with 1g of oocytes was considered as an experimental unit. Significant interaction between inseminating doses and volumes of water to the values of the fertilization rates and quadratic effect of doses and volume for the values of hatching rates were observed. The doses and volumes did not influence the percentage of normal larvae (87.70±5.06%). It is recommended the use of 5.5×106 spermatozoa oocyte-1 and 1mL of water g-1 of oocytes during in vitro fertilization procedure. These results allowed us to develop new biotechnological strategies applied to the conservation of S. parahybae.
O Steindachneridion parahybae é um bagre ameaçado de extinção no Brasil e estratégias aplicadas para a otimização de gametas são necessárias. O objetivo deste estudo foi avaliar doses inseminantes e volume de água sobre os valores das taxas de fertilização, eclosão e larvas normais em S. parahybae. Utilizando-se um delineamento experimental casualizado em esquema fatorial (4×4), com quatro doses inseminantes: 1,0×104; 1,0×105; 1,0×106; 1,0×107 espermatozóides ovócito-1 e quatro volumes de água: 1; 35; 65 e 95mL de água g-1 de ovócitos. As combinações de doses e volumes foram realizadas em triplicatas (n=48). Cada incubadora (1,5L de volume útil) contendo 1g de ovócitos foi considerada como uma unidade experimental. Interações significativas entre doses inseminantes e volumes de água para os valores das taxas de fertilização e efeito quadrático das doses e do volume para os valores das taxas de eclosão foram verificadas. As dosagens e os volumes aplicados não influenciaram no percentual de larvas normais (87,70±5,06). Recomenda-se a aplicação de 5,5×106 espermatozoides ovócito-1 e a utilização de 1mL de água.g-1 de ovócitos no procedimento de fertilização artificial in vitro. Estes resultados permitiram desenvolver novas estratégias biotecnológicas aplicadas na conservação do S. parahybae.
Subject(s)
Animals , Endangered Species/trends , Catfishes/growth & development , InseminationABSTRACT
O presente trabalho foi conduzido com o objetivo de avaliar a morfometria, o rendimento e a composição centesimal de cortes da carne de arraias de água doce capturadas no reservatório de Itaipu. Para os estudos de morfometria e rendimento de cortes foram utilizados 60 animais, distribuídos em delineamento experimental inteiramente casualizado, com três classes de peso corporal (500g, de 501 a 700g e acima de 700g). Houve efeito (p<0,05) do peso em relação ao percentual de resíduos, com maiores índices em animais menores. Para as análises de composição centesimal foram utilizados cortes de filé sem raio (FSR), filé com raio cartilaginoso (FCR) e cauda de 30 animais distribuídos nas mesmas classes de peso já descritas. Foram observados maiores níveis (p<0,05) de matéria mineral no filé com raio para animais entre 501 e 700g. Umidade e matéria mineral apresentaram efeito (p<0,05) entre os diferentes cortes com maiores valores para FSR, FCR, e cauda, respectivamente. Para as demais variáveis avaliadas não houve efeito (p>0,05) entre os tratamentos. Os resultados indicam que o aproveitamento das arraias de água doce pode ser realizado em todas as classes de peso. A composição centesimal associadaao bom rendimento dos cortes da carne revelam a espécie como importante recurso pesqueiro.
This study was conducted to evaluate the morphology, yield and composition of meat cuts from freshwater stingrays caught in the Itaipu Reservoir. For studies of morphometry and cuts yield were used 60 animals, distributed in a completely randomized design with three classes of body weight (500g, 501 to 700g and above 700g). There was effect (P>0,05) of the weight in relation to the percentage of residues, with higher indices in smaller animals. For centesimal composition analyses, were used fillet without rays (FWR), fillet with cartilaginous rays (FWCR) and tail cuts of 30 animals distributed in the same weight classes already described. It was observed highest levels (p <0,05) of ash in the fillet with cartiloginous rays for animals between 501 and 700g. Moisture and ash showed significant effect (p <0,05) between the different cuts, with higher values to FWR, FWCR, and tail respectively. For other variables evaluated there was not effect (p> 0,05) between treatments. The results indicate that freshwater stingrays use can be realized in all weight classes. The centesimal composition associated with the good yield of meat cuts, reveal the species as an important fishery resource.
Se ha realizado esta investigación con el objetivo de evaluar la morfometría, el rendimiento y la composición centesimal en cortes de carne de rayas de agua dulce, capturadas en el embalse de Itaipú. Para los estudios de morfometría y rendimiento de cortes se utilizó 60 animales, distribuidos en un delineamiento completamente aleatorio, con tres clases de peso corporal (500g, 501 a700g y arriba de 700g). Ocurrió efecto (p <0,05) del peso en relación al porcentual de residuos, con mayores índices en animales pequeños. Para los análisis de composición centesimal se utilizó cortes de filete sin radio (FSR), filete con radio cartilaginoso (FCR) y cola de 30 animales distribuidos en las mismas categorías de peso ya descritas. Se observó niveles mayores (p <0,05) de materia mineral en el filete con radio para los animales entre 501 y 700 g. Humedad y materia mineral presentaron efecto (p <0,05) entre los diferentes cortes con mayores valores para FSR, FCR, y la cola, respectivamente. Para las demás variables evaluadas no hubo efecto (p> 0.05) entre los tratamientos. Los resultados indican que el uso de rayas de agua dulce se puede realizar en todas las clases de peso. La composición centesimal, asociada al buen desempeño de los cortes de la carne, revela como la especie es un importante recurso pesquero.