ABSTRACT
Collagenolytic proteases are enzymes able of hydrolyzing the peptide bonds of several types of collagen, and have great importance in the medicine and therapeutic applications. The aim of this research was to evaluate the production of collagenolytic proteases by Bacillus stearothermophilus. Treatments were performed used a 2³ full factorial design, in order to evaluate the significance of the effects and interactions of variables - initial pH, substrate concentration and temperature - on the production of collagenolytic protease. The central point was run in quadruplicate to provide an estimate of the experimental error. Enzyme assays with collagen and azocasein as substrates were performed to determine the collagenolytic and proteolytic activities respectively. The highest collagenolytic enzyme activity was 79.38 U mL-1, corresponding to a specific activity of 136.86 U mg-1, in the initial fermentation conditions, substrate concentration at 1% (w/v), pH 7.2 and 25 °C. Proteolytic activity of enzyme was most active at pH 9.0 and 50 °C, and was stable over wide pH (6.0 - 9.0) and temperature ranges (45 °C - 50 °C). Bacillus stearothermophilus shows viability for the production of collagenolytic proteases, and the obtaining these enzymes have high importance for biotechnological applications.
As proteases colagenolíticas são enzimas capazes de hidrolisar as ligações peptídicas de vários tipos de colágeno e têm grande importância na medicina e em aplicações terapêuticas. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a produção de proteases colagenolíticas por Bacillus stearothermophilus. Os tratamentos foram realizados por meio de um planejamento fatorial completo 2³, a fim de avaliar a significância dos efeitos e interações das variáveis - pH inicial, concentração de substrato e temperatura - sobre a produção de protease colagenolítica. O ponto central foi executado em quadruplicata para fornecer uma estimativa dos erros experimentais. Ensaios enzimáticos com colágeno e azocaseína como substratos foram realizados para determinação das atividades colagenolítica e proteolítica respectivamente. A maior atividade enzimática colagenolítica foi 79,38 U mL-1, correspondendo a atividade específica de 136,86 U mg-1, em condições iniciais de fermentação, na concentração de substrato a 1% (p/v), pH 7,2 e 25 °C. A atividade proteolítica da enzima foi mais ativa em pH 9,0 e 50 °C e foi estável nas faixas de pH (6,0 - 9,0) e temperatura (45 °C - 50 °C). Bacillus stearothermophilus apresenta viabilidade para a produção de proteases colagenolíticas e a obtenção dessas enzimas tem grande importância para aplicações biotecnológicas.
ABSTRACT
Este trabalho apresenta resultados da pesquisa de contaminação dos filtros de condicionadores de ar instalados no setor residencial da cidade de Manaus. A pesquisa foi realizada no âmbito do projeto CAEMA (Condicionadores de Ar, Energia e Meio Ambiente) que consistiu na troca de aparelhos de ar condicionado ineficientes por eficientes na zona urbana da cidade. Dos 500 condicionadores de ar retirados do sistema pelo projeto, foram selecionados 50 filtros (10 por cento) para a análise de contaminação biológica, tendo sido identificada uma enorme variedade de agentes prejudiciais à saúde humana, entre bactérias e fungos. A bactéria mais vezes identificada foi a Staphylococcus sp e o fungo mais freqüente foi o Penicillium sp. Também foi possível verificar, por meio de entrevistas telefônicas junto a 37 usuários desses equipamentos, a grande incidência de sintomas associados a problemas de insuficiente qualidade de ar nos ambientes residenciais. Circunstâncias que motivaram a oportunidade desta pesquisa também impossibilitaram a coleta das amostras por unidade de volume, com os condicionadores ainda em funcionamento. Esse fato não comprometeu os objetivos da pesquisa, de promover a reflexão sobre os cuidados com a correta limpeza dos condicionadores de ar residenciais.
This work presents the results of a research about the contamination caused by air conditioners filters that are installed in the residential area in Manaus. The research took place in the scope of CAEMA's project (Conditioning of Air, Energy and Environment), which one consisted in changing inefficient conditional air devices for efficient ones in the urban zone of the city. Amongst 500 air conditioners removed of the system by the project, 50 filters (10 percent) were selected for biological contamination analysis, having been identified an enormous variety of agents, like bacteria and fungus, that are harmful for human health. The most identified bacterium was the Staphylococcus sp and the fungus more frequent was the Penicillium sp. Also it was possible to verify, by telephonic interviews with 37 users of these equipments, the great incidence of symptoms associates to the insufficient air quality in residential environments. The circumstances that had motivated the chance of this research, had also disabled that the assemble could be made per volume unit, with the conditioners still working. This fact did not compromise the quality of the work, neither the objectives to promote one reflection about the cares with the correct cleanness of the residential air conditioners.
Subject(s)
Air Conditioning , Air Pollution , Air Quality Control , Bacteria , Biological Contamination , Filters , FungiABSTRACT
Neste trabalho foram analisados 73 espécimes de jaraqui Semaprochilodus spp. conservados em caixas de poliestireno expandido entre camadas de gelo. Foram realizadas as seguintes análises: avaliação sensorial pela tabela de Torry modificada e pelo índice de qualidade por deméritos; determinação do pH e das bases voláteis totais (N-BVT); contagem total dos microrganismos aeróbios psicrófilos a 20 ºC por 4 dias, psicrotróficos a 7 ºC por 10 dias, dos mesófilos a 37 ºC por 2 dias; contagem, isolamento e identificação das bactérias Aeromonas sp. Bacillus sp. e Pseudomonas sp. a 20 ºC por 24 horas e de Plesiomonas sp. a 37 ºC por 2 dias. O jaraqui se manteve em condições de consumo, pela avaliação sensorial, por 18 e 21 dias. O pH e as bases voláteis totais não foram bons indicadores de qualidade; as contagens totais de psicrófilos, psicrotróficos e mesófilos não apresentaram diferença significativa e as bactérias não apresentaram comportamento deteriorador pela ausência da produção de H2S.
In this research 73 specimens of Semaprochilodus spp. (locally called 'jaraqui') were analyzed and conserved in polystyrene boxes among layers of ice. The following measurements and analyses were performed: sensorial evaluation using the modified Torry table and the quality index for demerits; determination of pH and total volatile bases (TVB); count totals of aerobic microorganisms including psychrophilics at 20 ºC for 4 days, psychrotrophilics at 7 ºC for 10 days, and mesophilics at 37 ºC for 2 days; and count totals, isolation and identification of the bacteria genera Aeromonas, Bacillus, and Pseudomonas at 20 ºC for 24 hours and of Plesiomonas at 37 ºC for 2 days. The jaraqui were maintained in fresh condition for the sensorial evaluation of 18 to 21 days. However; pH and total volatile base measurements were not good indicators of quality in relation to the sensorial evaluation in both experiments. As well; count totals of the aerobic microorganisms didn't demonstrate any significant differences, and the bacterias didn't show any signs of deterioration in relation to lack of H2S production.