Natural vertical cotransmission of Dengue virus and Chikungunya virus from Aedes aegypti in Brumado, Bahia, Brazil

ABSTRACT Background: Arthropod-borne viruses have recently emerged and are pathogens of various human diseases, including dengue, zika, and chikungunya viruses. Methods: We collectedAedes aegyptilarvae (N = 20) from Brumado, Bahia, Brazil, and treated and individually preserved the specimens. We analyzed the samples for dengue, zika, and chikungunya viruses using molecular biology methods. Results: We found that 25% (N = 5) and 15% (N = 3) were positive exclusively for dengue and chikungunya viruses, respectively; 15% (N = 3) were coinfected with both. Conclusions: This is the first report of dengue and chikungunya virus coinfection in A. aegypti larvae.

Prevenção domiciliar da dengue: avaliação preliminar de tela protetora para pratos de vasos de planta / Prevención domiciliar de la dengue: evaluación preliminar de tela protectora para platos de macetas de planta / Dengue prevention at the household level: preliminary evaluation of a mesh cover for flowerpot saucers

Avaliou-se em laboratório a eficácia de um protótipo de capa de tela de poliéster (evidengue®) destinada a vedar o acesso de fêmeas do mosquito Aedes aegypti a pratos de vasos de planta. Dois pratos de vasos com água foram envolvidos individualmente com a capa e colocados com os seus respectivos vasos em duas gaiolas entomológicas, um em cada gaiola. Numa terceira gaiola foi colocado um conjunto idêntico de prato e vasos sem a capa. Cada gaiola recebeu 20 fêmeas copuladas do mosquito, alimentadas com sangue de camundongo. Os resultados mostram que a capa foi eficaz como barreira ao acesso de fêmeas. Novos testes são necessários para se avaliar a eficácia da capa como dispositivo de prevenção da ovipostura nos pratos.

The effectiveness of a polyester mesh cover (evidengue®), aimed at preventing the access of female Aedes aegypti mosquitoes to flowerpot saucers, was evaluated in laboratory. Two saucers of flowerpot with water were individually wrapped with the cover was placed with their respective pots in two entomological cages. One identical set of flowerpot and saucer was placed in a third cage. In each cage, 20 gravid females, fed on mouse blood, were released. Results show that the cover was effective to prevent access of females. Further tests are necessary to assess cover effectiveness as a device to prevent saucer oviposition.

Se evaluó en laboratorio la eficiencia de una cubierta de tela de polyester (evidengue®) con el objetivo de vedar el acceso de hembras del mosquito Aedes aegypti a platos de macetas de planta. Fueron utilizadas tres jaulas entomológicas, dos de ellas con evidengue® y una para control. En cada jaula fueron colocados dos conjuntos de macetas de planta y platos y 20 hembras copuladas, alimentadas con sangre de ratón. Los resultados muestran que la cubierta fue eficaz como barrera al acceso de hembras. Nuevas pruebas son necesarias para evaluar la eficiencia de la cubierta como dispositivo de prevención de la oviposición en los platos.

Padronização de condições para detecção de DNA de Leishmania spp. em flebotomíneos (Diptera, Psychodidae) pela reação em cadeia da polimerase / Standardization of conditions for PCR detection of Leishmania spp. DNA in sand flies (Diptera, Psychodidae)

A correta identificação dos agentes etiológicos em insetos vetores é de crucial importância aos estudos epidemiológicos. A pesquisa de flagelado nesses vetores, pela dissecção de seu trato digestivo, observação microscópica do seu conteúdo ou por isolamento dos parasitas provenientes de insetos em meios de cultura, tem-se mostrado operacionalmente inadequada e com baixa especificidade do diagnóstico, pois fêmeas de flebotomíneos também podem albergar outros flagelados como Trypanosoma e Endotrypanum. Acreditamos que por sua eficiência e especificidade, a amplificação de seqüências-alvo do DNA da Leishmania, por meio da reação em cadeia de polimerase, pode ser aplicada na investigação de sua presença em flebotomíneos, desde que estes estejam devidamente acondicionados e o DNA do parasita extraído a partir de metodologia adequada. Este trabalho descreve metodologias utilizadas na padronização da conservação dos espécimes de flebotomíneos e extração do DNA da Leishmania como uma alternativa mais prática que os métodos tradicionais.

The correct identification of etiological agents in vector insects is crucial for epidemiological studies. Identification of flagellates in such vectors, usually by dissection of the digestive tract and microscopic observation of the contents as well as attempts at parasite isolation from insects in culture media, have proven operationally inadequate and with poor diagnostic specificity, since female sand flies are also hosts for other flagellates like Trypanosoma and Endotrypanum. Due to the efficiency and specificity of DNA target sequence amplification by polymerase chain reaction (PCR), the latter could be used to investigate the presence of Leishmania in sand flies, although the insects need to be properly stored and the Leishmania DNA extracted using appropriate methodology. This paper describes methodologies to standardize sand fly storage and Leishmania DNA extraction in such specimens as a more practical method in field studies.

Estudos do intestino médio (influência da alimentação sangüinea na musculatura e síntese da matriz peritrófica) e da glândula salivar de flebotomíneos vetores e a descrição de um nematódeo entomoparasita / Studies of the midgut (influence of the blood feeding in the muscle and synthesis of the peritrophic matrix) and of the salivary gland of phlebotomines vectors and the described of a entomoparasite nematodes

Flebotomíneos são insetos hematófagos e vetores Leishmania, a qual é transmitida durante a sua alimentação sangüínea. Durante este processo, o hospedeiro responde com reações inflamatória e hemostática. Todavia, a saliva do flebotomíneo contém substâncias farmacológicas ativas que são capazes de prevenir a contração vascular, e conseqüentemente, a retenção do sangue. O alimento sangüíneo é armazenado e digerido no intestino médio que se distende. As células do intestino médio sintetizam uma estrutura sacular que circunda o alimento, denominada matriz peritrófica (MP), Com o intuito de melhor compreender a biologia do vetor, este estudo analisa em detalhes, a morfologia, anatomia e ultra estrutura da glândula salivar, a musculatura do intestino médio e a formação da MP, assim como a contaminação do inseto com um entomoparasito, o qual não permite a sua alimentação sangüínea. Nossos resultados demonstraram que a os aspectos gerais da glândula salivar em diferentes flebotomíneos são similares... É relevante que estas células, de acordo com as suas ultra-estruturas e ligações por lectinas, podem ser classificadas em diferentes sub-populações mostrando distintos processos de secreção. Depois da alimentação sangüínea, a cinética da formação da MP e sua degradação no flebotomíneo foi totalmente relacionada com a ingestão e com o tempo de digestão. A MP apareceu bem formada e grossa 24 h após a alimentação sangüínea. Existem pelo menos cinco bandas protéicas na MP do flebotomíneo. A presença de quitina foi demonstrada através de imunomarcação... A marcação da actina e a microscopia eletrônica de varredura mostraram uma organização muscular no intestino médio. Os componentes musculares estão distribuídos sobre todo o intestino médio como fibras circulares e longitudinais, formando uma bem organizada rede muscular. O intestino médio abdominal sofre muitas modificações na organização desta rede muscular, a qual parece estar relacionada com a passagem do alimento sangüíneo. Finalmente, nós detectamos pela primeira vez, e morfologicamente caracterizamos, um novo entomoparasito infectando o L. longipalpis. Este achado pode ser aplicado no futuro para estudos de controle biológico do flebotomíneos vetores. Além disso, os conhecimentos relacionados com a glândula salivar e com a fisiologia do intestino médio são importantes para uma melhor compreensão do inseto vetor, o qual tem um papel fundamental na transmissão da Leishmania.

Estudos do intestino médio (influência da alimentação sangüínea na musculatura e síntese da matriz peritrófica) e da glândula salivar de flebotomíneos vetores e a descrição de um nematódeo entomoparasito / Studies of the midgut (influence of blood supply in the muscles and synthesis of the peritrophic matrix) and the salivary glands of phlebotomine vectors and the description of one nematode medical entomology

Flebotomíneos são insetos hematófagos e vetores Leishmania, a qual é transmitida durante a sua alimentação sangüínea. Durante este processo, o hospedeiro responde com reações inflamatória e hemostática. Todavia, a saliva do flebotomíneo contém substâncias farmacológicas ativas que são capazes de prevenir a contração vascular, e conseqüentemente, a retenção do sangue. O alimento sangüíneo é armazenado e digerido no intestino médio que se distende. As células do intestino médio sintetizam uma estrutura sacular que circunda o alimento, denominada matriz peritrófica (MP). Com o intuito de melhor compreender a biologia do vetor, este estudo analisa em detalhes, a morfologia, anatomia e ultra estrutura da glândula salivar, a musculatura do intestino médio e a formação da MP, assim como a contaminação do inseto com um entomoparasito, o qual não permite a sua alimentação sangüínea. Nossos resultados demonstraram que a os aspectos gerais da glândula salivar em diferentes flebotomíneos são similares. O órgão é composto por dois pequenos lobos ligados entre si, os quais são constituídos por pequenas quantidades de células. É relevante que estas células, de acordo com as suas ultra-estruturas e ligações por lectinas, podem ser classificadas em diferentes sub-populações mostrando distintos processos de secreção. Depois da alimentação sangüínea, a cinética da formação da MP e sua degradação no flebotomíneo foi totalmente relacionada com a ingestão e com o tempo de digestão. A MP apareceu bem formada e grossa 24 h após a alimentação sangüínea. Existem pelo menos cinco bandas protéicas na MP do flebotomíneo. A presença de quitina foi demonstrada através de imunomarcação. Além disso, depois da ingestão sangüínea e durante o curso da digestão, o intestino médio muda completamente o seu tamanho e morfologia. A marcação da actina e a microscopia eletrônica de varredura mostraram uma organização muscular no intestino médio. Os componentes musculares estão distribuídos sobre todo o intestino médio como fibras circulares e longitudinais, formando uma bem organizada rede muscular. O intestino médio abdominal sofre muitas modificações na organização desta rede muscular, a qual parece estar relacionada com a passagem do alimento sangüíneo. Finalmente, nós detectamos pela primeira vez, e morfologicamente caracterizamos, um novo entomoparasito infectando o L. longipalpis. Este achado pode ser aplicado no futuro para estudos de controle biológico do flebotomíneos vetores. Além disso, os conhecimentos relacionados com a glândula salivar e com a fisiologia do intestino médio são importantes para uma melhor compreensão do inseto vetor, o qual tem um papel fundamental na transmissão da Leishmania.

Estudos do intestino médio (influência da alimentação sangüínea na musculatura e síntese da matriz peritrófica) e da glândula salivar de flebotomíneos vetores e a descrição de um nematódeo entomoparasito

Flebotomíneos são insetos hematófagos e vetores Leishmania, a qual é transmitida durante a sua alimentação sangüínea. Durante este processo, o hospedeiro responde com reações inflamatória e hemostática. Todavia, a saliva do flebotomíneo contém substâncias farmacológicas ativas que são capazes de prevenir a contração vascular, e conseqüentemente, a retenção do sangue. O alimento sangüíneo é armazenado e digerido no intestino médio que se distende. As células do intestino médio sintetizam uma estrutura sacular que circunda o alimento, denominada matriz peritrófica (MP), Com o intuito de melhor compreender a biologia do vetor, este estudo analisa em detalhes, a morfologia, anatomia e ultra estrutura da glândula salivar, a musculatura do intestino médio e a formação da MP, assim como a contaminação do inseto com um entomoparasito, o qual não permite a sua alimentação sangüínea. Nossos resultados demonstraram que a os aspectos gerais da glândula salivar em diferentes flebotomíneos são similares. O órgão é composto por dois pequenos lobos ligados entre si, os quais são constituídos por pequenas quantidades de células. É relevante que estas células, de acordo com as suas ultra-estruturas e ligações por lectinas, podem ser classificadas em diferentes sub-populações mostrando distintos processos de secreção

Depois da alimentação sangüínea, a cinética da formação da MP e sua degradação no flebotomíneo foi totalmente relacionada com a ingestão e com o tempo de digestão. A MP apareceu bem formada e grossa 24 h após a alimentação sangüínea. Existem pelo menos cinco bandas protéicas na MP do flebotomíneo. A presença de quitina foi demonstrada através de imunomarcação. Além disso, depois da ingestão sangüínea e durante o curso da digestão, o intestino médio muda completamente o seu tamanho e morfologia. A marcação da actina e a microscopia eletrônica de varredura mostraram uma organização muscular no intestino médio. Os componentes musculares estão distribuídos sobre todo o intestino médio como fibras circulares e longitudinais, formando uma bem organizada rede muscular. O intestino médio abdominal sofre muitas modificações na organização desta rede muscular, a qual parece estar relacionada com a passagem do alimento sangüíneo. Finalmente, nós detectamos pela primeira vez, e morfologicamente caracterizamos, um novo entomoparasito infectando o L. longipalpis. Este achado pode ser aplicado no futuro para estudos de controle biológico do flebotomíneos vetores. Além disso, os conhecimentos relacionados com a glândula salivar e com a fisiologia do intestino médio são importantes para uma melhor compreensão do inseto vetor, o qual tem um papel fundamental na transmissão da Leishmania

Colonização de Lutzomyia longipalpis (Lutz e Neiva, 1912): estudos morfológicos e susceptibilidade à infecção por Leishmania spp / Colonization of Lutzomyia longipalpis (Lutz and Neiva, 1912): Morphological studies and susceptibility to infection with Leishmania spp

Uma colônia de flebotomíneos Lutzomyia Longipalpis originários da caverna da Lapinha (Minas Gerais,Brasil) foi estabelecida em um curto período em nosso laboratório. O objetivo foi obter quantidade suficiente de insetos para desenvolver experimentos a fim de: estudar os eatágios de desenvolvimento do flebotomíneo, estudar a morfologia do intestino médio, e investigar a susceptibilidade dos insetos à infecções por Leishmania. A colônia foi iniciada com 850 adultos fêmeas as quais foram imediatamente com sangue, e individualizadas para oviposição e identificação. Os ovos foram contados, separados e colocados em postes de criação. As larvas foram alimentadas diariamente em dieta especial. Os insetos foram mantidos durante todo o tempo a 26°C em incubadora. Os adultos emergiram num período de 30-35 dias. A colônia que foi estabelecida e mantida está na 11ª geração. Nós usamos a microscopia elêtronica de varredura para observar a morfologia dos ovos e as larvas. A superfícies externas dos ovos são cobertas por um exocório caracterizado por arranjos de uma série de cristas longitudinais, paralelas e descontínuas, convergindo nas extremidades. Os estágios larvares foram distinguidos pela presença de um ou dois pares de filamentos caudais. Os segmentos abdominais foram reconhecidos pela presença de pseudo-pernas na superfície dorsal. A superfície ventro-lateral é coberta pela presença de películas. A pupa tem muitas espículas nos segmentos abdominais, e é fácil de observar as asas e pernas. Nós fizemos um estudo histológico do intestino médio dos adultos. Colorações convencionais demonstraram diferenças entre as regiões torácica e abdominal do intestino médio. Experimentos feitos para verificar a infecção do Lu. Longipalpis por Leishmania, constatou que os insetos da colônia são mais susceptíveis à infecçào do que aqueles originários do campo. A fim de melhor compreender este aspecto, nós desenvolvemos estudos bioquímicos para comparar a presença de proteínas no intestino médio e na saliva destes insetos. Nós concluímos que existem diferenças no conteúdo protéico destes órgãos.

Colonização de Lutzomyia longipalpis (Lutz e Neiva, 1912): estudos morfológicos e susceptibilidade à infecção por Leishmania spp

Uma colônia de flebotomíneos Lutzomyia Longipalpis originários da caverna da Lapinha (Minas Gerais,Brasil) foi estabelecida em um curto período em nosso laboratório. O objetivo foi obetr quantidade suficiente de insetos para desenvolver experimentos a fim de: estudar os eatágios de desenvolvimento do flebotomíneo,estudar a morfologia do intestino médio, e investigar a susceptibilidade dos insetos à infecções por Leishmania. A colônia foi iniciada com 850 adultos fêmeas as quais foram imediatamente com sangue, e individualizadas para oviposição e identificação. Os ovos foram contados,separados e colocados em postes de criação.As larvas foram alimentadas diariamente em dieta especial. Os insetos foram mantidos durante todo o tempo a 26°C em incubadora. Os adultos emergiram num período de 30-35 dias. A colônia que foi estabelecida e mantida está na 11ª geração.Nós usamos a microscopia elêtronica de varredura para observar a morfologia dos ovos e as larvas.

A superfícies externas dos ovos são cobertas por um exocório caracterizado por arranjos de uma série de cristas longitudinais, paralelas e descontínuas, convergindo nas extremidades. Os estágios larvares foram distinguidos pela presença de um ou dois pares de filamentos caudais.Os segmentos abdominais foram reconhecidos pela presença de pseudo-pernas na superfície dorsal. A superfície ventro-lateral é coberta pela presença de películas. A pupa tem muitas espículas nos segmentos abdominais, e é fácil de observar as asas e pernas.Nós fizemos um estudo histológico do intestino médio dos adultos. Colorações convencionais demonstraram diferenças entre as regiões torácica e abdominal do intestino médio. Experimentos feitos para verificar a infecção do Lu.Longipalpis por Leishmania, constatou que os insetos da colônia sào mais susceptíveis à infecçào do que aqueles originários do campo.A fim de melhor compreender este aspecto, nós desenvolvemos estudos bioquímicos para comparar a presença de proteínas no intestino médio e na saliva destes insetos. Nós concluímos que existem diferenças no conteúdo protéico destes órgãos