Effect of verapamil and trifluoperazine upon glucose-induced calcium distribution within B cells

Empleando la preparación de páncreas de rata perfundido, se estudió la secreción de insulina y la distribución de calcio en la célula B (técnica del piroantimoniato de potasio) en respuesta a distintas concentraciones de glucosa (3.3 y 16.6 mM) solas o asociadas con verapamil o trifluorperazina (TFP). El número total de precipitados de piroantimoniato de calcio (CPP) de las células B, al igual que el de CPP unidos a cada una de sus organelas, fue mayor en los páncreas perfundidos con glucosa 16.6 mM en cada uno de los tiempos estudiados. Al comienzo del estímulo con glucosa 16.6 mM, los CPP se ubicaron predominantemente en el halo claro de los gránulos de secreción, mientras que más tarde aparecieron ubicados en la membrana plasmática. El verapamil y la TFP disminuyeron significativamente la segunda fase de la secreción de insulina desencadenada por la glucosa 16.6 mM, modificando además el patrón de distribución del calcio en las células B. Los mayores cambios consistieron en una disminución del número total de CPP en todos los tiempos de perfusión estudiados y una alteración de su distribución en las diferentes organelas de la célula B. En esta última, lo más destacado fue la disminución inicial del porcentaje de CPP unido a los gránulos y la disminución de los unidos a la membrana plasmática y de las mitocondrias al final de la perfusión. Estos resultados sugieren que durante el estímulo con glucosa, la disponibilidad de calcio libre intracelular es controlada en forma secuencial...

Effect extracellular alkalosis upon calcium distribution within the B cells

En este trabajo se estudió la secreción de insulina y la distribución intracelular del calcio en células B, utilizando la técnica de precipitación con piroantimoniato, en páncreas perfundidos de rata con soluciones de pH 7.4 y 7.8, en presencia de glucosa 3.3 y 16.6 mM. La alcalosis extracelular se usó como agente inhibidor de la secreción de la célula B. Los estudios se realizaron en muestras obtenidas a los 4,6,10 y 20 m de iniciado el estímulo de glucosa. Estos tiempos corresponden al máximo de la primera fase, período refractario, comienzo y parte media de la segunda fase, respectivamente, de la secreción de insulina. La glucosa en concentraciópn de 16.6 mM incrementó el número de precipitados de calcio-piroantimoniato (PCP) así como el número de éstos asociados con diferentes estructuras subcelulares, con respecto a los experimentos con glucosa 3.3 mM. La alcalosis extracelualr disminuyó significativamente tanto la primera como la segunda fase de la respuesta secretoria de las céluals B, al mismo tiempo que afectó la distribución intracelular de los PCP. Durante la primera fase de secreción, estos precipitados aparecían ubicados primordialmente en el halo claro de los gránulos B a pH 7.4, mientras que durante el desarrollo de la segunda fase predominaron asociados con la membrana plasmática. Por el contrario, en los experimentos de alcalosis se encontraron PCP principalmente en el citoplasma durante los primeros minutos del estímulo de glucosa y resultaron prácticamente ausentes...

Islet cells-tight junctions: changes in its number induced by glucose

El número de uniones estrechas intercelulares fue cuantificado en islotes aislados de rata, incubados durante diferentes lapsos en un medio conteniendo distintas concentraciones de glucosa. El número de uniones estrechas aumentó en función de la duración de la incubación y de la concentración de glucosa en el medio. Estos resultados sugerirían la participación de las uniones estrechas en la regulación de la secreción de insulina en respuesta a la glucosa

Islet cell population changes induced by short term ovariectomy

En este trabajo se han estudiado los cambios ocurridos en el páncreas endocrino de ratas 14 días después de su ovariectomía. Se emplearon para ello ratas ovariectomizadas (O) y controles normales (C) de la misma edad. Los páncreas de estos animales se tiñeron empleando técnicas de p-aldehído-fucsina y peroxidasa (con suero antiinsulina) y el método de Weibel para las determinaciones morfométricas. Los resultados obtenidos indican que la ovariectomía produce una disminución del volumen total del páncreas endocrino, acompañado de un aumento del volumen individual de los islotes. Este último sería debido a un incremento de su población celular a expensas de sus células B sin cambio en el tamaño de ellas, indicando una probable hiperplasia sin hipertrofia celular. Estos cambios explicarían la aparente discordancia del efecto de la castración sobre la secreción de insulina cuando ésta se estudia en modelos de páncreas entero o islotes aislados

Quantitative ultrastructural changes induced by glucose in pancreatic B cells

En el presente trabajo se estudian los cambios cuantitativos inducidos por la glucosa en la ultraestructura de las células B provenientes de páncreas de rata perfundidos con 3.3 y 16.6 mmol/1 de glucosa. En presencia de 16.6 mmol/l de glucosa se observó un incremento significativo en el volumen de RER, microtúbulos, mitocondrias, lisosomas y gránulos B, hallándose cambios significativos en el volumen total de la célula B o en tamaño del núcleo, citoplasma y complejo de Golgi. En los páncreas perfundidos con 16.6 mmol/l de glucosa, el número de gránulos secretorios está marcadamente reducido, y su diámetro está aumentado significativamente. Las células B de estos páncreas también presentan un incremento en el número de granos pálidos y de las imágenes de exocitosis. Estos datos sugieren que el incremento en la concentración de la glucosa extracelular produce no solamente la típica curva bifásica de secreción de insulina, sino también cambios cuantitativos significativos en el volumen de las distintas organelas de la célula B. Estas modificaciones ultraestructurales se correlacionan con el efecto de la glucosa sobre el proceso de síntesis y secreción de insulina