In vitro and in situ activation of the complement system by the fungus Lacazia loboi

Since there are no studies evaluating the participation of the complement system (CS) in Jorge Lobo's disease and its activity on the fungus Lacazia loboi, we carried out the present investigation. Fungal cells with a viability index of 48 percent were obtained from the footpads of BALB/c mice and incubated with a pool of inactivated serum from patients with the mycosis or with sterile saline for 30 min at 37 °C. Next, the tubes were incubated for 2 h with a pool of noninactivated AB+ serum, inactivated serum, serum diluted in EGTA-MgCl2, and serum diluted in EDTA. The viability of L. loboi was evaluated and the fungal suspension was cytocentrifuged. The slides were submitted to immunofluorescence staining using human anti-C3 antibody. The results revealed that 98 percent of the fungi activated the CS by the alternative pathway and no significant difference in L. loboi viability was observed after CS activation. In parallel, frozen histological sections from 11 patients were analyzed regarding the presence of C3 and IgG by immunofluorescence staining. C3 and IgG deposits were observed in the fungal wall of 100 percent and 91 percent of the lesions evaluated, respectively. The results suggest that the CS and immunoglobulins may contribute to the defense mechanisms of the host against L. loboi.

Considerando que não existe nenhum estudo avaliando a participação do sistema complemento (SC) na doença de Jorge Lobo e sua atividade sobre o fungo Lacazia loboi, realizamos o presente trabalho. Os fungos foram obtidos dos coxins plantares de camundongos BALB/c com índice de viabilidade de 48 por cento e, em seguida, foram incubados com pool de soro inativado de pacientes ou com solução salina estéril (SSE) por 30 min, a 37 °C. Os tubos foram incubados, por 2 h, com pool de soro AB+ sem inativar, inativado, diluído em EGTA-MgCl2 e EDTA. A viabilidade do L. loboi foi avaliada e a suspensão fúngica foi citocentrifugada. As lâminas foram submetidas à técnica de imunofluorescência empregando o anticorpo anti-C3 humano. Os resultados revelaram que 98 por cento dos fungos ativaram o SC pela via alternativa e que não houve diferença significante na viabilidade do L. loboi após ativação do SC. Em paralelo, cortes histológicos congelados de 11 pacientes foram avaliados quanto à presença de C3 e IgG, pela técnica de imunofluorescência. Foram encontrados depósitos de C3 e de IgG na parede dos fungos em 100 por cento e 91 por cento das lesões avaliadas, respectivamente. Os resultados sugerem que o SC e as imunoglobulinas poderiam contribuir nos mecanismos de defesa do hospedeiro contra o L. loboi.

Pesquisa de imunoglobulinas e complemento no granuloma da doença de Jorge Lobo / Immunoglobulin and complement research in the granuloma of Jorge Lobo's disease

A doença de Jorge Lobo é micose cutânea-subcutânea de evolução crônica causada pelo fungo Lacazia loboi. Esta micose é predominante na região Amazônica e afeta, principalmente, trabalhadores rurais que vivem em contato constante com a vegetação e o solo, como é o caso dos seringueiros dessa região. Os estudos abordando os aspectos imunopatológicos desta micose são ainda muito escassos, possivelmente devido ao não cultivo do seu agente etiológico. Considerando que existem estudos demonstrando a participação da resposta imune humoral na doença de Jorge Lobo, onde os pacientes exibem níveis séricos elevados de imunoglobulinas e complemento, e alterações no perfil de citocinas representadas por um predomínio do perfil Th2, o presente estudo foi realizado com a finalidade de avaliar a presença de anticorpos e components do sistema complemento no granuloma induzido pelo L.loboi. Participaram destte estudo 11 pacientes portadores da micose, provenientes do estado do Acre, dos quais foram coletados fragmentos de pele das lesões. O material foi avaliado quanto à presença de imunoglobulinas e complemento, através da técnica de imunofluorescência e submetido à coloração pela hematoxilina-eosina para serem avaliados histopatologicamente. Os resultados obtidos revelaram depósitos dessas proteínas envolvendo a parede celular dos fungos em todos os pacientes avaliados e presença de um infiltrado inflamatório constituído predominantemente por histiócitos, células gigantes multinucleadas e numerosos fungos. Os linfócitos estavam presentes em número discreto a moderado e os plasmócitos, embora em número inferior, sempre estiveram presentes. Os resultados obtidos neste estudo revelam a presença de anticorpos e complemento no granuloma da doença de Jorge Lobo e sugerem a participação dessas proteínas nos mecanismos de defesa contra o fungo L. loboi.