Green propolis phenolic compounds act as vaccine adjuvants, improving humoral and cellular responses in mice inoculated with inactivated vaccines

Adjuvants play an important role in vaccine formulations by increasing their immunogenicity. In this study, the phenolic compound-rich J fraction (JFR) of a Brazilian green propolis methanolic extract stimulated cellular and humoral immune responses when co-administered with an inactivated vaccine against swine herpesvirus type 1 (SuHV-1). When compared to control vaccines that used aluminium hydroxide as an adjuvant, the use of 10 mg/dose of JFR significantly increased (p < 0.05) neutralizing antibody titres against SuHV-1, as well as the percentage of protected animals following SuHV-1 challenge (p < 0.01). Furthermore, addition of phenolic compounds potentiated the performance of the control vaccine, leading to increased cellular and humoral immune responses and enhanced protection of animals after SuHV-1 challenge (p < 0.05). Prenylated compounds such as Artepillin C that are found in large quantities in JFR are likely to be the substances that are responsible for the adjuvant activity.

Exposure of pampas fox (Pseudalopex gymnocercus) and crab-eating fox (Cerdocyon thous) from the Southern region of Brazil to Canine distemper virus (CDV), Canine parvovirus (CPV) and Canine coronavirus (CCoV)

The exposure of 13 Brazilian free-ranging nondomestic canids (five pampas fox - Pseudalopex gymnocercus and eight crab-eating fox -Cerdocyon thous) from Southern region of Brazil, to Canine distemper virus (CDV), canine parvovirus (CPV) and Canine coronavirus (CCoV) was investigated. Antibodies against CDV were detected in 38.5 percent (5/13) of the samples. There were anti-CDV antibodies in 60 percent (3/5) of P. gymnocercus and in 25 percent (2/8) of C. thous. The frequency was higher among the adults and males. Eleven canids (84.6 percent) presented antibodies against CPV, 80 percent (4/5) were from P. gymnocercus and 87.5 percent (7/8) were from C. thous. There was no difference in positivity rate against CPV between gender and age. Antibodies against CCoV were detected in 38.5 percent (5/13) of the samples, with 60 percent (3/5) of positivity in P. gymnocercus and 25 percent (2/8) in C. thous. The frequency of antibodies against CCoV was higher among the adults and males. The study showed that these canids were exposed to CDV, CPV and CCoV.

Foi investigada a ocorrência de exposição em 13 canídeos não domésticos de vida livre (cinco graxains-do-campo - Pseudalopex gymnocercus e oito graxains-do-mato - Cerdocyon thous) da região sul do Brasil ao vírus da cinomose canina (CDV), parvovírus canino (CPV) e coronavírus canino (CCoV). Anticorpos contra o CDV foram detectados em 38,5 por cento (5/13) das amostras. Haviam anticorpos anti-CDV em 60 por cento (3/5) dos P. gymnocercus e em 25 por cento (2/8) dos C. thous. A freqüência foi maior entre machos e adultos. Para CPV, 11 canídeos (84,6 por cento) apresentaram anticorpos, 80 por cento (4/5) eram da espécie P. gymnocercus e 87,5 por cento (7/8) eram C. thous. Não houve diferença de positividade para o CPV entre sexos e idades. Anticorpos contra o CCoV foram detectados em 38,5 por cento (5/13) das amostras, sendo 60 por cento (3/5) de positividade entre os P. gymnocercus e 25 por cento (2/8) entre os C. thous. A freqüência de anticorpos para CCoV foi maior entre os machos e adultos. O estudo revelou que estes canídeos foram expostos ao CDV, CPV e CCoV.

Prevalência e fatores associados à infecção pelo vírus da diarréia viralbovina na região Sul do Rio Grande do Sul / Prevalence and factors associated with bovine viral diarrhea virus infection in South of Rio Grande do Sul

O presente estudo teve como objetivo estimar a prevalência e determinar os principais fatores associadosà infecção pelo vírus da diarréia viral bovina (BVDV) no rebanho bovino dos municípios de Santa Vitóriado Palmar e Chuí, na região sul do estado do Rio Grande do Sul. Amostras de soro foram submetidas àprova de soroneutralização e, em cada propriedade avaliada, aplicou-se um questionário epidemiológicopara investigar fatores que poderiam estar associados à infecção. As amostras de soro foram coletadasem 85 propriedades, cujos animais apresentavam ou não sinais clínicos de infecção pelo BVDV. Das1.734 amostras de soro analisadas, 1.150 (66,32%) foram positivas com a detecção de bovinossorologicamente positivos em 70 (82,35%) propriedades. Dentre os fatores avaliados, exploração mista,criação extensiva, realização de ordenha mecânica, uso de inseminação artificial ou de inseminaçãoartificial associada à monta natural, uso de piquete de parição e ausência de assistência veterinária,apresentaram significância estatística (P<0,05) associada à soropositividade. Os resultados obtidosdemonstram a expressiva disseminação do BVDV no rebanho bovino dessa região do Rio Grande do Sul.

This study was performed in order to estimate the prevalence of bovine viral diarrhea virus (BVDV), andto determine the main factors related to the prevalence of the infection in cattle of Santa Vitória do Palmarand Chuí counties, in Rio Grande do Sul State. Sera were submitted to the serum neutralization test andan epidemiological questionnaire was filled out in each herd to investigate variables that could beassociated with this infection. The sera samples were collected in 85 farms, with or without clinical signsof BVDV infection. From 1.734 serum samples examined, 1.150 (66.32%) in 70 (82.35%) herds were positive.Variables that were identified as risk factors to seropositivity were mixed (dairy and beef) herds, extensive production, use of mechanical milking, use of artificial insemination or artificial insemination associated with natural service, use of the maternity unit at calving and absence of veterinarian assistance (P<0.05).The results demonstrate the expressive dissemination of the BVDV in cattle of this region in Rio Grande do Sul

Imunogenicidade do herpesvírus bovino tipo 5 (BHV-5) em vacinas inativadas de diferentes formulaçöes / Immunogenicity of bovine herpesvirus type-5 vaccines formulated in different ways

Quatro vacinas inativadas, produzidas com uma amostra do herpesvírus bovino tipo 5 (BHV-5) isolada de um surto de meningoencefalite no Rio Grande do Sul, foram administradas em quarenta bovinos visando a avaliar a sua capacidade imunogênica. As vacinas A e B foram formuladas com adjuvante oleoso e as vacinas C e D com hidróxido de alumínio [Al 2(OH)3]. O título da suspensäo viral utilizada nas vacinas foi de 10 elevado a 7,5 DICT 50 / 2,5µL. Immunostin, um imunoestimulante derivado de Mycobacterium, foi adicionado às vacinas B e D. Após receberem três doses de vacina com intervalos de 30 dias, somente os animais dos grupos A (90 por cento) e B (100 por cento) desenvolveram uma resposta sorológica significativa. As respostas sorológicas às vacinas A e B foram ajustadas por regressäo linear, demonstrando que os títulos de anticorpos aumentaram significativamente à medida que foram repetindo-se as aplicaçöes das vacinas. O Immunostin potencializou a capacidade imunogênica da vacina D mas, aparentemente, näo foi eficiente na vacina B. Concluiu-se que as vacinas inativadas, produzidas a partir de suspensöes virais de BHV-5 com títulos altos e com adjuvante oleoso induzem a produçäo de níveis consideráveis de anticorpos neutralizantes em mais de 80 por cento dos animais vacinados após a terceira dose.

Avaliaçäo de métodos de controle da infecçäo pelo vírus da leucose enzoótica bovina / Appraisal methods for controlling the infection by enxootic bovine leukosis

Foram avaliadas três alternativas de controle da infecçäo pelo vírus da Leucose Bovina: a) eliminaçäo dos animais soropositivos; b) segregaçäo dos animais soropositivos; c) manejo misto dos animais, com adoçäo de medidas recomendadas para evitar a transmissäo do vírus. O primeiro teste sorológico realizado em oito propriedades leiteiras revelou a presença da infecçäo com índices que variaram entre 2,5 porcento (1/40) e 58,1 porcento (18/31).Duas propriedades com baixo nível de infecçäo inicial (<10 porcento) optaram pela eliminaçäo total dos animais positivos. Uma dessas propriedades apresentou resultados imediatos, com taxa de incidência nula (0/39) durante o período de doze meses, enquanto a outra, que näo eliminou prontamente o animal positivo, apresentou incidência de 20,0 porcento (3/15) no mesmo período. A eliminaçäo dos animais reagentes, nas propriedades que apresentaram um baixo nível de infecçäo, demonstrou ser uma forma eficiente para a erradicaçäo da infecçäo. A segregaçäo dos animais soropositivos, com a formaçäo de dois rebanhos, foi implantada em uma propriedade, onde apenas um animal soroconverteu durante o experimento, observando-se uma incidência de 4,5 porcento (1/22) ao final do estudo. As propriedades que adotaram o programa de controle através do manejo misto de animais infectados e näo infectados apresentaram resultados muito variados, demonstrando índices de soroconversäo entre 2,6 porcento (1/38) a 50,0 porcento (4/8), indicando que esse tipo de controle necessitaria de um tempo maior para alcançar os objetivos. Foi possível a obtençäo de descendentes soronegativos através da substituiçäo ou inativaçäo pelo calor do leite materno administrado aos terneiros. A reduçäo dos níveis de infecçäo em um rebanho, sem a necessidade do descarte imediato os animais infectados, é possível a partir da substituiçäo de ventres pelas novilhas da própria granja.

Peste suína clássica: ação térmica da amostra chinesa Porto Alegre (CPA) em coelhos / Classical swine fever: thermal reaction in rabbits to the chinese-Porto Alegre strain

Foram avaliadas a temperatura normal do coelho e sua reação térmica após inoculação com a amostra Chinesa Porto Alegre (CPA) do vírus da Peste Suína Clássica (PSC), sob três condições de temperatura ambiental. Os resultados mostraram que a temperatura normal do coelho aumenta com a elevação da temperatura ambiental (P<0,001). As médias das temperaturas normais dos coelhos foram de 39,53°C; 39,65°C e 39,92°C, nas temperaturas ambientais de 12,82 ± 1,29°C; 20,65 ± 1,79°C e 28,24 ± 2,09°C respectivamente. Os coelhos inoculados tiveram seu pique térmico também aumentado com a elevação da temperatura ambiental (P<0,001), mas não sofreram influência da diluição do vírus. As médias dos piques térmicos observados foram de 41,17°C; 41,24°C e 41,47°C. Para um intervalo de confiança de 95 por cento, estabeleceram-se as temperaturas de 40,60°C; 40,67°C e 40,90°C como limites, a partir dos quais a reação térmica foi considerada específica, em cada uma das temperaturas ambientais utilizadas. A elevação térmica não sofreu influência da temperatura ambiental nem da diluição do vírus, apresentando uma média global de 1,59°C. Para um intervalo de confiança a nível de 95 por cento, estabeleceu-se o limite de 1,06°C como o mínimo de elevação térmica para uma reação específica. O pique térmico iniciou a partir de 24h após inoculação. Seu início foi retardado com o aumento da diluição do vírus (P < 0,001), mas não com a temperatura ambiental. A sensibilidade e especificidade da reação térmica foi avaliada pelo teste de desafio. A análise de regressão permitiu concluir que um pique térmico mínimo de 40,6°C, associado a uma elevação térmica mínima de 1,06°C, pode ser considerada reação específica dos coelhos inoculados com a amostra CPA.

Rectal temperatures of normal rabbits inoculated with different dilutions of a vaccine prepared with Chinese-Porto Alegre (CPA) strain of classical swine fever virus, were evaluated under 3 different environmental temperatures. Temperatures of normal un-vaccinated rabbits increased significantly when environmental temperature increased (P<0.001). At environmental temperatures of 12.82 ± 1.29°C, 20.65 ± 1.79°C, and 28.24 ± 2.09°C me mean rectal temperatures were 39.53°C, 39.65°C and 39.92°C, respectively. Temperatures of me vaccinated rabbits also increased significantly when environmental temperature increased (P<0.001), but did not vary with different vaccine dilutions. At environmental temperatures of 12.82 ± 1.29°C, 20.65 ±1.79°C and 28.24 ± 2.09°C, the mean higher rectal temperature were 41.17°C, 41.24°C and 41.47°C, respectively. Within a 95 percent confidence interval was determined that, under the 3 environmental temperatures, the rectal temperatures equal to 40.60°C, 40.67°C and 40.90°C or higher, indicated a thermal reaction to the vaccine. In vaccinated rabbits, the mean thermic rise was of 1.59°C and there were no significant differences at different environmental temperatures or virus dilutions. Within a 95 percent confidence interval was determined that a rise of 1.06°C or higher indicated a specific reaction to the vaccine. The rise in temperature started 24 hours after the inoculation. This time was delayed when virus dilutions decreased (P<0.001), but did not vary with different environmental temperatures. The sensitivity and specificity of the thermic reaction was evaluated by the challenge test. By regression analysis was concluded that a temperature of 40.6°C, associated with a rise in at least 1.06°C, could be considered a specific reaction of the rabbits to the CPA strain.

Herpes bovino tipo 1 (BHV 1): I. Sorologia de rebanhos com problemas reprodutivos / Bovine herpesvirus type 1 (BHV-1): I. Sorologic survey in herds with reproductive problems

A presença de anticorpos neutralizantes contra o BHV-1, foi pesquisada pelo teste de soroneutralização (SN) em 2.341 soros, dos quais 747 apresentaram resultado positivo, representando 31,9 por cento de bovinos infectados pelo BHV-1. Os soros foram enviados de 112 propriedades da Região Sul, sendo na maioria rebanhos de gado de corte com problemas reprodutivos. Foram detectados bovinos sorologicamente positivos em 80 propriedades, representando 71,3 por cento, demonstrando a expressiva disseminação do vírus nos rebanhos desta região.

Serum antibodies against BHV-1 were studied, by the serum neutralization test, in cattle from Southem Brazil. Samples were collected from 2341 cattie from 112 farms that had reprodution problems. Positive results were obtained in 747 (31.9) cattie from 80 (71.31 percent) farms, given evidence of the expressivo vírus dissemination in cattie from this region.

Peste suína clássica: II. Estudo sobre um vírus amostra chinesa, adaptado ao cultivo celular (amostra Porto Alegre) / Classical swine fever: II. A study of a chinese strain adapted in tissue culture (Strain Porto Alegre)

Uma amostra genuína chinesa foi adaptada em cultura de células de linhagem de rim de coelho (RK13), através de passagens sucessivas e clonagem, na temperatura de 37§ C. Na décima passagem, após a clonagem, a semente foi liofilizada e estocada a - 70§ C. A partir dessa semente, entäo denominada da Cepa Porto Alegre (CPA), foram produzidas várias suspensöes víricas com as quais preparou-se uma vacina experimental. As características "in vitro" e "in vivo" da amostra CPA foram entäo estudadas. "In vitro", a amostra de vírus cresce regularmente em células RK13, demonstrada pelo teste e imunofluorescência direta com formaçäo de grandes placas de células com citoplasma fluorescente. Entretanto a amostra CPA näo cresceu em células PK15 nas primeiras 5 passagens. "In vivo" a amostra CPA näo provocou fluorescência em tecido de suínos vacinados, mas é hipertermizante para coelhos. O vírus liofilizado resistiu bem a 27§ C, durante 5 meses e por 12 meses na temperatura entre 15 e 36§ C. Reconstituído com o respectivo diluente e mantido a 25-26§ C, manteve título infeccioso estável por 24 horas e conferiu 100//de proteçäo em vacinas até 72 horas pós diluiçäo. Esta amostra näo mostrou virulência residual para suínos imunodeprimidos e é inócua para porcas gestantes, a partir de 40 dias da cobertura. Näo possui capacidade de difusäo de suíno para suíno, e näo foi possível recuperar o vírus de órgäos de suínos, após 42 dias de vacinaçäo. A amostra CPA só pode ser recuperada do suíno, através de inoculaçäo de macerado de baço em coelhos, por via endovenosa. Os suínos vacinados e desafiados 14 dias após foram 100//protegidos, näo havendo pique febril causado pelo vírus de desafio

Meningoencefalite e necrose do córtex cerebral em bovinos causadas por Herpes vírus bovino-1 / Meningoencephalitis and necrosis of the cerebral cortex in cattle caused by Herpes vírus bovine-1

Descreve-se a ocorrência, em 2 estabelecimentos no Rio Grande do Sul, da forma nervosa da infecçäo por HVB-1 em terneiros lactentes. Os sinais clínicos se caracterizaram por anorexia, discreto corrimento ocular e nasal e depressäo profunda com períodos de excitaçäo, nos quais se observavam tremores musculares, nístagmo, marcha em círculos e opistótono. Em alguns dos animais necropsiados, foram observados pericardite, hepatomegalia, pneumonia e erosöes do rúmen e abomaso. As lesöes histológicas do sistema central foram caracterizadas por meningoencefalite näo purulenta e necrose do córtex cerebral. Em um caso foram observados corpúsculos de inclusäo intranucleares nos astrócitos. O vírus foi identificado através da imunofluorescência direta e isolamento em cultivos primários de pulmäo de feto bovino

Encephalomyocarditis virus (EMCV) in swine in the State of Rio Grande do Sul, Brazil

Foi observada mortalidade em nove leitöes de uma leitegada de dez em uma granja no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. A enfermidade se estendeu por um período de 15 dias, afetando animais em torno de 30 dias de idade, com morte súbita, sem prévios sinais clíncios evidentes. Leitöes de outras leitegadas permaneceram sadios. Material coletado de leitöes mortos pela doença permitiram o isolamento de um vírus, posteriormente caracterizado como Vírus da Encefalomiocardite (VEMC) por testes de índice de neutralizaçäo. Exames histopatológicos revelaram lesöes compatíveis com a enfermidade provocada pelo VEMC