Avaliação da capacidade carcinogênica do extrato aquoso de café, em células somáticas de Drosophila melanogaster / Assessment of the carcinogenic capacity of commercial aqueous extract of coffea arabica in somatic cells of Drosophila melanogaster

Objetivo: devido ao consumo rotineiro do café pela população brasileira, o presente trabalho tem como objetivo avaliar o potencial carcinogênico de diferentes concentrações do café (Coffea arabica), por meio do Teste para Detecção de Tumor Epitelial em Drosophila melanogaster. Métodos: para avaliar o efeito carcinogênico do café, larvas de 3° estágio descendentes do cruzamento entre fêmeas virgens wts/TM3, sb¹ e machos mwh/mwh foram tratadas com diferentes concentrações de café comercial (100; 50; 25; 12,5 e 6,26 mg/mL). Após a exposição (48h) e o processo de metamorfose, as moscas adultas foram analisadas quanto à presença de tumor epitelial, e os grupos tratados foram comparados com o controle negativo (água ultrapura). A toxicidade do café foi mensurada por meio da taxa de moscas que sobreviveram a etapa de metamorfose após exposição. Resultados: foi observado diferença estatisticamente significativa na taxa de sobrevivência (p < 0,05) e na frequência de tumor epitelial total (p < 0,05) em moscas tratadas com 100 mg/mL de café, quando comparado ao controle negativo. Conclusões: o café, na concentração de 100 mg/mL, foi tóxico e carcinogênico para D. melanogaster.

Objective: Due to the routine consumption of coffee by the Brazilian population, the present work aims to evaluate the carcinogenic potential of different concentrations of coffee (Coffea arabica) through the Test for Epithelial Tumor Detection in Drosophila melanogaster. Methods: In order to evaluate the carcinogenic effect of coffee, third-stage larvae descended from the cross between virgin females wts/TM3, sb1 and males mwh/mwh were treated with different concentrations of commercial coffee (100, 50, 25, 12, 26 mg/mL). After exposure (48h) and the metamorphosis process, the adult flies were analyzed for the presence of an epithelial tumor and the treated groups were compared with the negative control (ultrapure water). Coffee toxicity was measured by the rate of flies that survived the post-exposure metamorphosis stage. Results: A statistically significant difference was observed in survival rate (p < 0.05) and frequency of total epithelial tumor (p < 0.05) in flies treated with 100 mg/mL of coffee, when compared to the negative control. Conclusions: Coffee at the concentration of 100 mg/mL was toxic and carcinogenic to D. melanogaster.

Chronic Periodontitis and RANKL/OPG Ratio in Peri-Implant Mucosae Inflammation

Abstract tHistory of chronic periodontitis (CP) is a risk factor for oseointegration failure. The osteoclastogenesis system (RANK, RANKL and OPG) is critical for bone homeostatic control. We investigated the levels of OPG and RANKL in peri-implant tissues from volunteers with and without a history of CP and their association with mucosae inflammation. This is a single-blind case-contro study. Diagnosis of a history of CP and peri-implant examination was performed on 46 volunteers, divided into control (without history of CP, n=26) and CP group (with history of CP, n=20). Gingival biopsies were harvested during implant exposure. Quantitative PCR evaluated OPG/RANKL mRNA expressions. OPG and RANKL proteins were analyzed by western blot and immunohistochemistry assay. The chi-square test analyzed the significance of nominal variables between groups while continuous variables were analyzed by T-test or Mann-Whitney test, after Shapiro-Wilk test evaluation. The 2-ΔΔCT Livak method calculation evaluated the gene expression. Values of p<0.05 were considered statistically significant. Volunteers with CP history had 23 times higher chance of developing mucosae inflammation. High mucosae levels of RANKL (p=0.04) and RANKL/OPG (p=0.001) mRNA expressions were observed in CP group. CP volunteers showed increased RANKL protein levels in opposition to decreased OPG expression. Even without active periodontitis, volunteers with a history of CP had elevated gingival levels of RANKL/OPG and higher correlation with peri-implant mucosae inflammation and implant loss.

Resumo A história de periodontite crônica (CP) é um fator de risco para falhas na osseointegração. O sistema de osteoclastogênese (RANK, RANKL e OPG) é crucial para o controle da homeostase óssea. O objetivo deste estudo foi investigar os níveis de OPG e RANKL no tecido peri-implantar de voluntários com e sem histórico de CP e sua associação com inflamação da mucosa. Este é um estudo tipo caso-controle. O exame para diagnóstico de CP e na região peri-implantar foi realizado em 46 voluntários, divididos em controle (sem história CP, n=26) e grupo CP (com histórico de CP, n=20). Descartes gengivais foram obtidos durante a exposição do implante. PCR quantitativo avaliou a expressão do RNAm de OPG/RANKL. As proteínas OPG e RANKL foram analisadas por western blot e imunohistoquímica. O teste do qui-quadrado analisou a significância entre as variáveis nominais enquanto as variáveis contínuas foram analisadas pelo teste-t e Mann-Whitney, após o teste de Shapiro-wilk. O método do Livak 2--ΔΔCT avaliou a expressão gênica. Os voluntários com CP apresentaram 23 vezes mais chances de desenvolver inflamação da mucosa. Expressão elevada no RNAm de RANKL (p=0.04) e RANKL/OPG (p=0.001) foram observadas no grupo CP. Voluntários com CP mostraram aumento dos níveis da proteína RANKL em contraste com diminuída expressão de OPG. Mesmo sem periodontite ativa, voluntários com histórico de CP apresentaram elevado nível gengival de RANKL/OPG e alta correlação com inflamação peri-implantar e perda do implante.

Assessment of carcinogenic potential of soft drinks of cola, diet cola, orange and lemon, produced in the city of Uberlândia, Minas Gerais state, Brazil / Avaliação do potencial carcinogênico de refrigerantes à base de cola, diet cola, laranja e limão, produzidos no município de Uberlândia, estado de Minas Gerais, Brasil

Soft drinks are industrialized unfermented beverages, free of alcohol, carbonated, rich in artificial flavors and sugar. The intense consumption of such beverages can be related to not inheritable diseases such as caries, allergy, cellulite and stretch marks, gastrointestinal disorders, diabetes and cancer. The aim of this study was to evaluate the carcinogenic potential of different concentrations of soft drinks produced in the Uberlândia city, Minas Gerais State, Brazil, by means of Epithelial Tumor Detection Test using Drosophila melanogaster as a model. Third stage larvae descendants of crosses between D. melanogaster virgin females wts/TM3, sb¹ and males mwh/mwh were treated with different concentrations (0.83, 1.66 or 3.33 mL/g) of cola, diet cola, orange or lemon soft drinks. The total epithelial tumor rate observed in flies treated with 3.33 mL/g of cola and orange soft drinks was higher than the negative control. The diet cola and lemon caused no significant increase in the overall frequency of epithelial tumors in D. melanogaster. In conclusion, in these experimental conditions, the cola and orange base soft drinks demonstrated carcinogenic potential in somatic cells of D. melanogaster in the concentration of 3.33 mL/g.

Refrigerantes são bebidas industrializadas não fermentadas, livre de álcool, carbonatadas, ricas em aromas artificiais e açúcar. O consumo intenso dessas bebidas pode estar relacionada à doenças não herdáveis como, cáries, quadros alérgicos, formação de celulite e estrias cutâneas, alterações gastrointestinais, diabetes e câncer. O objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial carcinogênico de diferentes concentrações de refrigerantes produzidos no município de Uberlândia, Estado de Minas Gerais, Brasil. Foi realizado o Teste de Detecção de Tumor Epitelial em Drosophila melanogaster. Larvas de terceiro estágio descendentes do cruzamento entre fêmeas virgens wts/TM3, sb¹ e machos mwh/mwh de D. melanogaster foram tratadas com diferentes concentrações (0,83; 1,66 ou 3,33 mL/g) de refrigerantes à base de cola, diet cola, laranja e limão. Os resultados mostraram aumento na frequência de tumor epitelial em moscas tratadas 3,33 mL/g de refrigerantes à base de cola e de laranja, quando comparados ao controle negativo. Os refrigerantes diet cola e limão não provocaram aumento na frequência de tumor epitelial em D. melanogaster. Em conclusão, nessas condições experimentais, os refrigerantes à base de cola e laranja mostraram potencial carcinogênico em células somáticas de D. melanogaster na concentração de 3,33 mL/g.

Genetic Variants in Folate and Cobalamin Metabolism-Related Genes in Nonsyndromic Cleft Lip and/or Palate

The aim of this study was to evaluate the association of the polymorphisms in TCN2 (rs1801198) gene and in MTRR (rs1801394) gene with nonsyndromic cleft lip and/or palate (NSCL/P) in a Brazilian population. Genomic DNA was extracted from buccal cells. The polymorphisms in TCN2 (rs1801198) and MTRR (rs1801394) genes were genotyped by carrying out real-time PCR and Taqman assay. Chi-square test was used to determine the association between genotype and allele frequencies with NSCL/P and NSCL/P subgroups (cleft lip only, cleft lip and palate, and cleft palate only). Eight hundred and sixty seven unrelated individuals (401 cases with NSCL/P and 466 individuals without cleft) were evaluated. Genotype distributions of TCN2 and MTRR polymorphisms were in Hardy-Weinberg equilibrium. The TCN2 polymorphic genotype GG was identified in 16.7% of the NSCL/P group and in 14.1% of the non-cleft group (p>0.05). Similarly, the frequency of MTRR genotype (GG) was similar in NSCL/P group (15.5%) and control group (17.8%) (p>0.05). Multivariate analysis showed an association between MTRR and the subgroup that the mother smoked during pregnancy (p=0.039). Our findings did not demonstrate an association between TCN2 polymorphisms and NSCL/P, however suggests an association between MTRR and NSCL/P etiology.

Resumo O objetivo desse estudo foi avaliar a associação entre os polimorfismos no gene TCN2 (rs1801198) e no gene MTRR (rs1801394) com fissura de lábio e/ou palato não sindrômica (NSFL/P) em uma população brasileira. DNA genômico foi extraído de células bucais. Os polimorfismos nos genes TCN2 (rs1801198) e MTRR (rs1801394) foram genotipados através do PCR em tempo real pelo método Taqman. O teste do qui-quadrado foi utilizado para determinar a associação entre a frequência alélica e genotípica e NSFL/P e nos subtipos (fissura de lábio, fissura de lábio com palato e fissura de palato). Oitocentos e sessenta e sete indivíduos não aparentados (401 casos com NSFL/P e 466 indivíduos sem fissura) foram avaliados. A distribuição dos genótipos dos polimorfismos de TCN2 e MTRR estavam em equilíbrio de Hardy-Weinberg. O genótipo polimórfico GG do gene TCN2 foi identificado em 16,7% do grupo com NSFL/P e em 14,1% do grupo sem fissura (p>0,05). Da mesma forma, a freqüência do genótipo GG do gene MTRR foi bastante semelhante entre o grupo com NSFL/P (15,5%) e o grupo controle (17,8%). A análise multivariada mostrou associação entre o gene MTRR e o subgrupo que apresentou tabagismo materno durante a gestação (p=0,039). Nossos resultados mostraram que não há associação entre os polimorfismos nos genes TCN2 e NSFL/P, entretanto sugerem uma associação entre MTRR e a etiologia de NSFL/P.