Función antiinflamatoria y antioxidante del ácido ursólico en la pancreatitis aguda inducida por ceruleína en ratas / Anti-inflammatory and anti-oxidant role of ursolic acid in cerulein-induced acute pancreatitis in rats

Resumen Antecedentes: El ácido ursólico se encuentra en numerosas plantas y se ha informado que tiene efectos antiproteasas, antioxidantes, antiinflamatorios, antimicrobianos, nefroprotectores, hepatoprotectores y cardioprotectores. Objetivo: Este estudio tuvo como objetivo investigar los efectos del ácido ursólico en la pancreatitis aguda inducida por ceruleína. Material y métodos: Treinta y dos ratas albinas Wistar fueron asignadas aleatoriamente a cuatro grupos iguales: grupo simulado, grupo de pancreatitis aguda, grupo de tratamiento y grupo de ácido ursólico. Resultados: Los niveles de amilasa sérica en los grupos de pancreatitis aguda y de tratamiento fueron significativamente más altos que en los otros grupos (p < 0.05). Además, los niveles séricos de IL-1β, IL-6 y TNF-α fueron significativamente más altos en el grupo de pancreatitis aguda en comparación con el grupo de tratamiento. Aunque la actividad oxidante total del tejido pancreático en ambos grupos fue similar, la capacidad antioxidante total del tejido pancreático en el grupo de tratamiento fue significativamente mayor. Conclusión: Se observó que el ácido ursólico reduce el daño al páncreas y órganos remotos en la pancreatitis aguda, al igual que el estrés oxidativo.

Abstract Background: Ursolic acid (UA) is found in many plants, and has been reported to have anti-protease, antioxidant, anti-inflammatory, antimicrobial, nephroprotective, hepatoprotective, and cardioprotective effects. Objective: The purpose of this study was to investigate the effects of ursolic acid in cerulein-induced acute pancreatitis (AP). Materials and methods: Thirty-two Wistar albino rats were randomly assigned to 4 equal groups: Sham, acute pancreatitis, treatment, and ursolic acid group. Results: Serum amylase levels in the AP and treatment groups were significantly higher than in the others (p < 0.05). In addition, serum IL-1β, IL-6, and TNF-α levels were significantly higher in the AP group in comparison with the treatment group. Although pancreatic tissue total oxidant activity in the AP and treatment groups was similar, pancreatic tissue total antioxidant capacity was significantly higher in the treatment group than in the AP group. Conclusions: Damage to the pancreas and remote organs in AP was observed to be reduced by UA. In addition, oxidative stress was observed to be decreased by the effect of UA.

Estudio preliminar fitoquímico de fracciones hexánicas de hojas de Eugenia uniflora L. (Myrtaceae) / Phytochemical preliminary study of hexane fractions of leaves of Eugenia uniflora L. (Myrtaceae)

Fractions from the Hexane Extract (HE) of Eugenia uniflora L. leaves were subjected to various chromatographic systems. Germacrone sesquiterpene and bornyl acetate bicyclic ester were characterized by High Performance Liquid Chromatography coupled to Mass Spectrometry (HPLC-MS) with APCI Mass detector comparing with their homonymous spectrum provided by databases and characteristic fragmentation pathways were proposed. The monoterpene pulegone and the pentacyclic triterpene compound, ursolic acid, were found through High Performance Liquid Chromatography coupled to High Resolution Mass Spectrometry (HPLC - HRMS) by atmospheric pressure ionization (API) and the detector used was mass of Electronic Impact (IE). Both ursolic acid and bornyl acetate are present in other species of the same genus, but not in the species studied.

Fracciones provenientes del Extracto Hexánico (EH) de hojas de Eugenia uniflora L. fueron sometidas a diversos sistemas cromatográficos. El sesquiterpeno germacrone y el éster bicíclico acetato de bornilo fueron caracterizados por Cromatografía Líquida de Alta Performance acoplada a Espectrometría de Masas (HPLC-MS) con detector Masa APCI comparando con su espectro homónimo aportado por bases de datos y fueron propuestas vías de fragmentación características. El monoterpeno pulegona y el compuesto triterpénico pentacíclico, ácido ursólico, fueron encontrados a través de Cromatografía Líquida de Alta Performance acoplada a Espectrometría de Masas de Alta Resolución (HPLC -HRMS) por ionización a presión atmosférica (API) y el detector usado fue masa de Impacto Electrónico (IE). Tanto el ácido ursólico como el acetato de bornilo están presentes en otras especies del mismo género, no así en la especie estudiada.

Determination of the content of ursolic and oleanolic acid in the cuticular wax of fruits of different species of Rosaceae / Determinación del contenido de ácido ursólico y oleanólico en la cera cuticular de frutos de diferentes especies de Rosaceae / Determinação do teor de ácido ursólico e oleanólico na cera cuticular de frutos de diferentes espécies de Rosaceae

Abstract Ursolic acid (UA) and oleanolic acid (OA) are two widely distributed triterpenes in fruits, especially those belonging to Rosaceae family. These triterpene isomers are of great pharmacological interest due to their multiple bioactive properties. For this reason, the objective of this study was to determine the content of UA and OA extracted from the cuticular wax of five highly edible fruits (quince, loquat, pear, peach and apple) all belonging to the Rosaceae family. The acids were analyzed by high performance liquid chromatography. Both UA and OA are present in all these fruits, however, UA is in greater quantities.

Resumen El ácido ursólico y el ácido oleanólico (AO) son dos triterpenos ampliamente distribuidos en los frutos, sobre todo en aquellos que pertenecen a la familia Rosaceae. Estos isómeros triterpénicos son de gran interés farmacológico por sus múltiples propiedades bioactivas. Por esta razón, el presente trabajo tuvo como objetivo determinar el contenido de AU y AO extraídos de la cera cuticular de cinco frutos bastante comestibles (membrillo, níspero, pera, durazno y manzana), todos ellos pertenecientes a la familia Rosaceae. El método empleado para analizar estos ácidos fue cromatografía líquida de alta eficiencia. De lo anterior, se concluyó que tanto el AU como el AO están presentes en todos los frutos mencionados, sin embargo, el AU se encuentra en mayores cantidades.

Resumo Ácido ursólico e ácido oleanólico (AO) são dois triterpenos amplamente distribuídos em frutos, especialmente aqueles pertencentes à família Rosaceae, estes isómeros triterpénicos são de grande interesse farmacológico por suas múltiplas propriedades bioativas. Por esse motivo, o objetivo deste estudo foi determinar o conteúdo de AU e AO extraídos da cera cuticular de cinco frutos altamente comestíveis (marmelo, néspera, péra, pêssego e maçã) pertencentes à família Rosaceae. O método utilizado para esse fim foi a cromatografia líquida de alta eficiência. O resultado mostrou que AU e AO estão presentes em todas essas frutas, sendo a primeira a que está em maior quantidade.

Ursolic acid attenuates beta-amyloid-induced memory impairment in mice / Ácido ursólico atenua a perda de memória induzida por beta-amilóide em ratos

ABSTRACT Objective Increasing evidence demonstrates that oxidative stress and inflammatory are involved in amyloid β (Aβ)-induced memory impairments. Ursolic acid (UA), a triterpenoid compound, has potent anti-inflammatory and antioxidant activities. However, it remains unclear whether UA attenuates Aβ-induced neurotoxicity. Method The aggregated Aβ25-35 was intracerebroventricularly administered to mice. Results We found that UA significantly reversed the Aβ25-35-induced learning and memory deficits. Our results indicated that one of the potential mechanisms of the neuroprotective effect was attenuating the Aβ25-35-induced accumulation of malondialdehyde (MDA) and depletion of glutathione (GSH) in the hippocampus. Furthermore, UA significantly suppressed the upregulation of IL-1β, IL-6, and tumor necrosis-α factor levels in the hippocampus of Aβ25-35-treated mice. Conclusion These findings suggest that UA prevents memory impairment through amelioration of oxidative stress, inflammatory response and may offer a novel therapeutic strategy for the treatment of Alzheimer’s disease.

RESUMO Objetivo Há evidências crescentes de que o estresse oxidativo e a inflamação estão envolvidos na perda de memória induzida pelo peptídeo beta-amilóide (βA). O ácido ursólico (AU), um composto triterpenóide, apresenta atividades anti-inflamatórias e antioxidantes potentes. Entretanto, não se sabe ainda se o AU atenua a neurotoxicidade induzida pelo βA. Método O agregado βA 25-35 foi administrado aos ratos por via intracerebroventricular. Resultados Observou-se que o AU reverteu significativamente os déficits de aprendizado e de memória induzidos pelo βA 25-35. Portanto, um dos potenciais mecanismos do efeito neuroprotetor seria a atenuação do acúmulo de malondialdeído e a depleção de glutationa no hipocampo induzidos pelo βA 25-35. Além disso, o AU suprimiu significativamente a supra regulação dos níveis de IL-1β, IL-6 e do fator de necrose tumoral α no hipocampo dos ratos tratados com βA 25-35. Conclusão Esses achados sugerem que o AU previne a perda de memória através da melhora do estresse oxidativo e da resposta inflamatória, podendoproporcionar uma nova estratégia terapêutica para o tratamento da doença de Alzheimer.

Preparation, characterization and evaluation of the in vivo trypanocidal activity of ursolic acid-loaded solid dispersion with poloxamer 407 and sodium caprate

Ursolic acid is a promising candidate for treatment of Chagas disease; however it has low aqueous solubility and intestinal absorption, which are both limiting factors for bioavailability. Among the strategies to enhance the solubility and dissolution of lipophilic drugs, solid dispersions are growing in popularity. In this study, we employed a mixture of the surfactants poloxamer 407 with sodium caprate to produce a solid dispersion containing ursolic acid aimed at enhancing both drug dissolution and in vivo trypanocidal activity. Compared to the physical mixture, the solid dispersion presented higher bulk density and smaller particle size. Fourier Transform Infrared Spectroscopy results showed hydrogen bonding intermolecular interactions between drug and poloxamer 407. X-ray diffractometry experiments revealed the conversion of the drug from its crystalline form to a more soluble amorphous structure. Consequently, the solubility of ursolic acid in the solid dispersion was increased and the drug dissolved in a fast and complete manner. Taken together with the oral absorption-enhancing property of sodium caprate, these results explained the increase of the in vivo trypanocidal activity of ursolic acid in solid dispersion, which also proved to be safe by cytotoxicity evaluation using the LLC-MK2 cell line.

O ácido ursólico é um candidato promissor para o tratamento da doença de Chagas, contudo este fármaco possui baixa solubilidade aquosa e limitada absorção intestinal, ambos os fatores limitantes da biodisponibilidade. Entre as estratégias para potencializar a solubilidade e a dissolução de fármacos lipofílicos, as dispersões sólidas estão crescendo em popularidade. Neste estudo, empregamos mistura dos tensoativos, poloxamer 407 e caprato de sódio, para produzir dispersão sólida contendo ácido ursólico, com o objetivo de aumentar tanto a dissolução do fármaco quanto a atividade tripanocida in vivo. Comparada à mistura física, a dispersão sólida apresentou maior densidade e menor tamanho de partícula. Os resultados da análise de espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier mostraram interações intermoleculares do tipo ligações de hidrogênio entre o fármaco e o poloxamer 407. Os experimentos de difratometria de raio-X revelaram a conversão do fármaco de sua forma cristalina para a forma amorfa, mais solúvel. Consequentemente, a solubilidade do ácido ursólico em dispersão sólida foi aumentada e o fármaco dissolveu-se de maneira mais rápida e completa. Em conjunto com as propriedades promotoras de absorção oral do caprato de sódio, estes resultados explicaram o aumento da atividade tripanocida in vivo do ácido ursólico em dispersão sólida, que também se provou segura após avaliação de citotoxicidade empregando a linhagem celular LLC-MK2.

Evaluación de la actividad anti-Helicobacter pylori del Aceite Esencial, Ácido Ursólico y sus dos modificaciones estructurales extraídos del Clinopodiumbolivianum (Khoa), mediante las técnicas Concentración Mínima Inhibitoria (MIC) por dilución en agar y difusión con disco / Evaluation of the anti-Helicobacter pylori activity of the Essential Oil, Ursolic Acid and its two structural modifications extracted from the Clinopodiumbolivianum (Khoa), using the techniques Minimum Inhibitory Concentration (MIC) by dilution in agar and diffusion with disk

Helicobacter pylori es una bacteria que tiene una relación directa con el desarrollo de la enfermedad gastroduodenal. Se estima que más del 50% de la población mundial está infectada por esta bacteria. La terapia empleada para la erradicación de la bacteria falla en más del 20%, principalmente por la generación de resistencia a los antibióticos comerciales. Justificación: Helicobacter pylori es un organismo microaerofílico que coloniza e infecta la mucosa gástrica humana. En el área IIFB de la Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Bioquímicas se lleva a cabo estudios sobre las plantas de la herbolaria Boliviana, realizando estudios sobre los metabolitos secundarios de las plantas hacia una terapéutica natural, basado en la medicina tradicional. El presente estudio corresponde a la evaluación del Aceite esencial, Acido Ursólico y sus dos modificaciones estructurales presentes en el Clinopodium bolivianum, los cuales no cuentan con estudios de actividad antiHelicobacter pylori. Resultados: técnica difusión con disco se obtuvo los siguientes resultados el promedio de halo de inhibición del Aceite esencial es de 59.8 mm, del Acido Ursólico es de 31.6 mm y el Acido Ursólico Oxidado es de 45.1 mm indicando sensibilidad al Helicobacter pylori, comparando con el control positivo tetraciclina con un halo de 40.53 mm. La técnica de MIC presento el siguiente resultado Aceite esencial presento un MIC de 0.06 uL/mL, del Acido Ursólico y su oxidación ambos presentaron un MIC de 15 ug/mL indicando sensibilidad al Helicobacter pylori, comparando con el control positivo tetraciclina que presento MIC de 30 mg/mL. Conclusión: Con los resultados obtenidos se puede señalar que el Aceite esencial, el Acido Ursólico y el Acido Ursólico oxidado provenientes del Clinopodium bolivianum (Khoa) presentan actividad anti-Helicobacter pylori.

Inhibition of acetylcholinesterase activity by hidroalcoholic extractand their fractions of Bouvardia ternifolia (Cav. ) Shcltdl (Rubiaceae) / Inhibición de la actividad de acetilcolinesterasa por el extracto hidroalcohólico y sus fracciones de Bouvardia ternifolia (Cav. ) Shcltdl (Rubiaceae)

The hydroalcoholic extract (BtHA) and its fractions of Bouvardia ternifolia were evaluated as inhibitors of the activity of the acetylcholinesterase enzyme utilizing the in vitro method (Ellman). BtHA inhibited the acetylcholinesterase enzyme competitively (IC50 = 0.6 ug/ml); the ethyl acetate fraction (BtF-AcOEt) caused mixed-type inhibition (IC50 = 0.96 ug/ml). A fraction insoluble on methanol (Bt-Faq-1) showed a mixed-type inhibition (CI50 = 0.96 ug/ml). Finally, the methanol-soluble fraction (Bt-Faq-2), presented complex, mixed-type inhibition that corresponds to the C5 system ( alpha= 0.740 and beta = 0.842). Rutin, quercetin, kaempferol and ursolic acid were detected by HPLC and the concentration of these compounds was different in each fraction.

El extracto hidroalcohólico (BtHA) y fracciones provenientes de Bouvardia ternifolia fueron evaluadas como inhibidores de la enzima acetilcolinesterasa utilizando el método enzimático propuesto por Ellman. BtHA inhibe a la enzima de manera competitiva (IC50 = 0.6 ug/ml); la fracción de acetato de etilo (BtF-AcOEt) provoca una inhibición mixta (IC50 = 0.96 ug/ml). La fracción insoluble en metanol (Bt-Faq-1) mostró una inhibición tipo mixta (CI50 = 0.96 ug/ml). Finalmente la fracción soluble en metanol, Bt-Faq-2, inhibe a la enzima presentando una inhibición mixta que corresponde a un sistema C5 ( alfa= 0.740 and beta= 0.842). Mediante HPLC se detectó rutina, quercetina, canferol y ácido ursólico la concentración de estos compuestos fue diferente en cada fracción.

Acute and subacute toxicity (28 days) of a mixture of ursolic acid and oleanolic acid obtained from Bouvardia ternifolia in mice / Toxicidad aguda y subaguda (28 días) en ratones, de la mezcla de ácido ursólico y ácido oleanólico obtenida de Bouvardia ternifolia

Ursolic acid (UA) and oleanolic acid (OA) are triterpenes that are found in a large number of medicinal plants, one of which is the species Bouvardia ternifolia. These compounds have been shown to have around 120 types of biological activity, especially the hepatoprotective, anti-inflammatory and antimycobacterial effects. Despite having a high therapeutic potential, not much information concerning their toxicity is available. This article describes the results of acute and subacute (28 days) toxicity evaluations in Balb/c mice (both sexes) treated with the mixture of UA/OA obtained from B. ternifolia at doses of 6.5 and 13 mg/kg. The LD50 was >300 mg/kg. During the subacute administration, there was no death of animals and no changes were observed in the growth or weight of the different organs when compared to the control groups. Studies of blood chemistry and blood count showed normal levels in all parameters evaluated. The histopathology of major organs showed no changes or abnormalities. The mixture UA/OA is indeed safe when administered subcutaneously as a single dose of 300 mg/kg or in repeated doses of 13 mg/kg during 28 days.

Los ácidos ursólico (UA) y oleanólico (OA) son triterpenos que se encuentran distribuidos en un gran número de plantas medicinales, una de ellas es la especie Bouvardia ternifolia. Estos compuestos han mostrado alrededor de 120 actividades biológicas, destacando los efectos hepatoprotector, antiinflamatorio y antimicobacteriano. A pesar de ser compuestos con un alto potencial terapéutico, no se han documentado muchos datos acerca de su toxicidad. En este artículo se describen los resultados de la evaluación de toxicidad aguda y subaguda (28 días) en ratones Balb/c de ambos sexos, tratados con la mezcla de AU/AO obtenida de B. ternifolia a dosis de 6.5 y 13 mg/kg. La DL50 fue > 300 mg/kg. Durante la administración subaguda, no hubo muerte de animales, tampoco se observaron alteraciones en su crecimiento ni alteraciones en el peso de los diferentes órganos. Los estudios de biometría hemática y química sanguínea mostraron niveles normales en todos los parámetros evaluados. Los análisis histopatológicos de los principales órganos no presentaron cambios o anormalidades. La mezcla UA/OA es prácticamente inocua cuando se administra subcutáneamente en dosis única de 300 mg/kg y 13 mg/kg en dosis repetida (28 días).

Triterpenos e flavonóides isolados de flores de Laseguea erecta (Apocynaceae) / Triterpenes and flavonoids isolate from the flowers of Laseguea erecta (Apocynaceae)

Das flores de Laseguea erecta isolaram-se o lupeol, ácido ursólico e os flavonóides quercetina (3,5,7,3',4'-pentaidroxiflavona) e 3-O-ß-L-arabinopiranosil quercetina. Esta é o primeiro estudo sobre metabólitos especiais em flores desse gênero. As estruturas foram determinadas através da análise dos dados espectrais de IV, RMN de 1H e 13C (1D e 2D) e comparação com valores registrados na literatura.

From the flowers of Laseguea erecta were isolated the lupeol, ursolic acid, quercetin (3,5,7,3',4'-pentahydroxyflavone) and 3-O-ß-L-arabinopyranosylquercetin. This is the first phytochemical study of this genera flowers'. The structures were established by the IR, 1H and 13C NMR (1D, 2D) spectral data analysis and by comparison with literature data.

Aplicação de cromatografia centrífuga de contra-corrente na purificação de ácido ursólico das folhas de Eugenia brasiliensis Lam. / Aplication of counter-current chromatography in the purification of ursolic acid from leavesof Eugenia brasiliensis Lam.

Os ácidos triterpênicos são metabólitos comuns na família Myrtaceae, especialmente no gênero Eugenia. O ácido ursólico foi descrito como um dos principais constituintes, nas folhas de Eugenia brasiliensis, coletada no Sudoeste do Brasil. Uma partição prévia, por solventes, do extrato etanólico ou do extrato clorofórmico de E. brasiliensis, seguida por uma purificação por cromatografia de contra-corrente de alta velocidade (CCCAV), conduziu ao isolamento do ácido ursólico com alto grau de pureza (> 97 por cento). Esta substância, também foi isolada por cromatografia convencional de coluna aberta (rendimento de 0.22 por cento a partir do extrato etanólico), e caracterizada por 13C-RMN, GC-EM e co-injeção com padrão comercial em CG-DIC, na forma do éster metílico. A técnica de CCCAV, usualmente usada para triterpenos glicosilados, foi aqui aplicada para a aglicona. As fases móvel e estacionária, no experimento de CCCAV, foram geradas pela mistura de n-hexano : acetato de etila : metanol : água, na proporção 10:5:2,5:1. A seleção do sistema de solventes (fases estacionária e móvel) foi determinada pela máxima distribuição eqüitativa do ácido ursólico em ambas as fases, medida por densitometria e monitorada por cromatografia em camada delgada, CCD, usando-se ácido ursólico comercial como referência.

Triterpene acids are common metabolites in the Myrtaceae family, especially in the genus Eugenia. Ursolic acid was found in Eugenia brasiliensis collected in Southeastern Brazil. A previous solvent partition of the ethanol or chloroform extracts of the leavesof E. brasiliensis, followed by rapid high-speed counter-current chromatography (HSCCC) afforded ursolic acid in high purity (> 97 percent). This compound was also purified apart by conventional column chromatography (yield of 0.22 percent from the ethanolic extract) and characterized by 13C-NMR, GC-MS and co-injection of its methyl ester with standards in GC-FID. The HSCCC technique, usually applied to triterpene glycosides, was here applied successfully to an aglycone, to which examples are rarely described. The mobile and stationary phase for the HSCCC experiment were derived from the two-phase solvent system composed by n-hexane : ethyl acetate : methanol : water in the proportion of 10:5:2.5:1. The choice of the developing solvent system for optimum HSCCC separation was determined by TLC coupled to densitometric measurements of ursolic acid in both stationary and mobile phase, generated by the upper and lower layer of the system above. Commercial ursolic acid was used as standard.

Presença dos ácidos ursólicos e 2x-hidroxi-ursólico Hyptis umbrosa Salzmann e Eriope crassipes Bentham (Labiatae) / Presence of ursolic acid and 2x-hidroxy-ursolic acid in Hyptis umbrosa Salzmann and Eriope crassipes Bentham (Labiatae)

Foi verificada a presença do acido ursólico e seu derivado 2α-hidroxilado em Hyptis umbros. Salzmann, assim como do acido ursólico em Eriope crassipe. Bentham.

The presence of ursolic and its 2alfa-hydroxy derivative was established in the Labiatae Hyptis umbrosa Salzmann. Ursolic acid was also isolated from another Labiatae Eriope crassipes Bentham (Labiatae).