Comparison of macroscopy, histopathology and PCR for diagnosing Eimeria spp. in broiler chickens / Comparação da macroscopia, histopatologia e PCR para o diagnóstico de Eimeria spp. em frangos de corte

Coccidiosis is a disease of great importance in industrial poultry. The correct diagnosis directs the poultry industry to its best treatment and control. Thus, a survey of Eimeria spp. was carried out in intestines of 64 broiler flocks, with an average age of 29 days. Eight broilers from each flock were randomly removed from the slaughter line, in a total of 512 samples. Macroscopic and histopathological lesions in the intestine were classified into Scores 0 to 4. Polymerase chain reaction (PCR) was used to research the oocysts from the seven species of Eimeria spp. in the intestinal content. The macroscopic evaluations showed that 59.4% (38/64) of the flocks were positive for E. acervulina, 32.8% (21/64) for E. maxima, 29.7% (19/64) for E. tenella, and 34.4% (22/64) for E. brunetti. The histopathological evaluation showed that 87.5% (56/64) of the flocks had at least one broiler with parasitic structures compatible with Eimeria spp. in the duodenum, 70.3% (45/64) in the jejunum, 18.8% (12/64) in the ileum, 46.9% (30/64) in the cecum, and 4.7% (3/64) in the colon. In PCR, 21.9% (14/64) of the flocks were positive for E. acervulina, 12.5% (8/64) for E. maxima, 3.1% (2/64) for E. mitis, and 32.8% (21/64) for E. tenella. The Kappa Cohen test between macroscopy, histopathology, and PCR demonstrated concordance ranging from weak to moderate with the exception of histopathology and PCR of the cecum, which was strong. In the comparison between macroscopy and histopathology, there were significative differences between Scores 0 and 1 (apart from the cecum). For Score 3, there were significative differences in duodenum, jejunum and cecum (p<0.05). In conclusion, the macroscopic diagnosis and PCR can generate false-negative results, and the histopathological exam proved to be effective, making it essential to associate different techniques for the correct diagnosis of Eimeria spp. in broiler chickens.(AU)

A coccidiose é uma doença de grande importância na avicultura industrial. O diagnóstico correto direciona a indústria avícola ao seu melhor tratamento e controle. Desta forma, realizou-se a pesquisa de Eimeria spp. em intestinos de 64 lotes de frangos de corte, com idade média de 29 dias. Em cada lote foram retirados aleatoriamente oito frangos da linha de abate, totalizando 512. Os intestinos foram classificados na macroscopia e na histopatologia em Grau de 0 a 4. No conteúdo intestinal pesquisou-se por reação em cadeia da polimerase (PCR) oocistos das sete espécies de Eimeria. As avaliações macroscópicas demonstraram que 59,4% (38/64) dos lotes foram positivos para E. acervulina, 32,8% (21/64) para E. maxima, 29,7% (19/64) para E. tenella e 34,4% (22/64) para E. brunetti. Na avaliação histopatológica, 87,5% (56/64) dos lotes apresentaram pelo menos um frango com estruturas parasitárias compatíveis com Eimeria spp. no duodeno, 70,3% (45/64) no jejuno, 18,8% (12/64) no íleo, 46,9% (30/64) no ceco e 4,7% (3/64) no cólon. Na PCR 21,9% (14/64) dos lotes foram positivos para E. acervulina, 12,5% (8/64) para E. maxima, 3,1% (2/64) para E. mitis e 32,8% (21/64) para E. tenella. O teste de concordância de Kappa Cohen entre macroscopia, histopatologia e PCR demonstrou concordância variando de fraca a moderada com exceção da histopatologia e PCR do ceco que foi forte. Na comparação dos graus de macroscopia e histopatologia, foram encontradas diferenças significativas entre o Grau 0 e 1 (exceto no ceco) e no Grau 3 houve diferença para duodeno, jejuno e cecos (p<0,05). Conclui-se que o diagnóstico macroscópico e a PCR podem gerar resultados falsos negativos e que o exame histopatológico se demostrou eficaz, tornando fundamental a associação de diferentes técnicas para o correto diagnóstico de Eimeria spp. em frangos de corte.(AU)

Comparison of macroscopy, histopathology and PCR for diagnosing Eimeria spp. in broiler chickens / Comparação da macroscopia, histopatologia e PCR para o diagnóstico de Eimeria spp. em frangos de corte

Coccidiosis is a disease of great importance in industrial poultry. The correct diagnosis directs the poultry industry to its best treatment and control. Thus, a survey of Eimeria spp. was carried out in intestines of 64 broiler flocks, with an average age of 29 days. Eight broilers from each flock were randomly removed from the slaughter line, in a total of 512 samples. Macroscopic and histopathological lesions in the intestine were classified into Scores 0 to 4. Polymerase chain reaction (PCR) was used to research the oocysts from the seven species of Eimeria spp. in the intestinal content. The macroscopic evaluations showed that 59.4% (38/64) of the flocks were positive for E. acervulina, 32.8% (21/64) for E. maxima, 29.7% (19/64) for E. tenella, and 34.4% (22/64) for E. brunetti. The histopathological evaluation showed that 87.5% (56/64) of the flocks had at least one broiler with parasitic structures compatible with Eimeria spp. in the duodenum, 70.3% (45/64) in the jejunum, 18.8% (12/64) in the ileum, 46.9% (30/64) in the cecum, and 4.7% (3/64) in the colon. In PCR, 21.9% (14/64) of the flocks were positive for E. acervulina, 12.5% (8/64) for E. maxima, 3.1% (2/64) for E. mitis, and 32.8% (21/64) for E. tenella. The Kappa Cohen test between macroscopy, histopathology, and PCR demonstrated concordance ranging from weak to moderate with the exception of histopathology and PCR of the cecum, which was strong. In the comparison between macroscopy and histopathology, there were significative differences between Scores 0 and 1 (apart from the cecum). For Score 3, there were significative differences in duodenum, jejunum and cecum (p<0.05). In conclusion, the macroscopic diagnosis and PCR can generate false-negative results, and the histopathological exam proved to be effective, making it essential to associate different techniques for the correct diagnosis of Eimeria spp. in broiler chickens.

A coccidiose é uma doença de grande importância na avicultura industrial. O diagnóstico correto direciona a indústria avícola ao seu melhor tratamento e controle. Desta forma, realizou-se a pesquisa de Eimeria spp. em intestinos de 64 lotes de frangos de corte, com idade média de 29 dias. Em cada lote foram retirados aleatoriamente oito frangos da linha de abate, totalizando 512. Os intestinos foram classificados na macroscopia e na histopatologia em Grau de 0 a 4. No conteúdo intestinal pesquisou-se por reação em cadeia da polimerase (PCR) oocistos das sete espécies de Eimeria. As avaliações macroscópicas demonstraram que 59,4% (38/64) dos lotes foram positivos para E. acervulina, 32,8% (21/64) para E. maxima, 29,7% (19/64) para E. tenella e 34,4% (22/64) para E. brunetti. Na avaliação histopatológica, 87,5% (56/64) dos lotes apresentaram pelo menos um frango com estruturas parasitárias compatíveis com Eimeria spp. no duodeno, 70,3% (45/64) no jejuno, 18,8% (12/64) no íleo, 46,9% (30/64) no ceco e 4,7% (3/64) no cólon. Na PCR 21,9% (14/64) dos lotes foram positivos para E. acervulina, 12,5% (8/64) para E. maxima, 3,1% (2/64) para E. mitis e 32,8% (21/64) para E. tenella. O teste de concordância de Kappa Cohen entre macroscopia, histopatologia e PCR demonstrou concordância variando de fraca a moderada com exceção da histopatologia e PCR do ceco que foi forte. Na comparação dos graus de macroscopia e histopatologia, foram encontradas diferenças significativas entre o Grau 0 e 1 (exceto no ceco) e no Grau 3 houve diferença para duodeno, jejuno e cecos (p<0,05). Conclui-se que o diagnóstico macroscópico e a PCR podem gerar resultados falsos negativos e que o exame histopatológico se demostrou eficaz, tornando fundamental a associação de diferentes técnicas para o correto diagnóstico de Eimeria spp. em frangos de corte.

Comparison of macroscopy, histopathology and PCR for diagnosing Eimeria spp. in broiler chickens

ABSTRACT: Coccidiosis is a disease of great importance in industrial poultry. The correct diagnosis directs the poultry industry to its best treatment and control. Thus, a survey of Eimeria spp. was carried out in intestines of 64 broiler flocks, with an average age of 29 days. Eight broilers from each flock were randomly removed from the slaughter line, in a total of 512 samples. Macroscopic and histopathological lesions in the intestine were classified into Scores 0 to 4. Polymerase chain reaction (PCR) was used to research the oocysts from the seven species of Eimeria spp. in the intestinal content. The macroscopic evaluations showed that 59.4% (38/64) of the flocks were positive for E. acervulina, 32.8% (21/64) for E. maxima, 29.7% (19/64) for E. tenella, and 34.4% (22/64) for E. brunetti. The histopathological evaluation showed that 87.5% (56/64) of the flocks had at least one broiler with parasitic structures compatible with Eimeria spp. in the duodenum, 70.3% (45/64) in the jejunum, 18.8% (12/64) in the ileum, 46.9% (30/64) in the cecum, and 4.7% (3/64) in the colon. In PCR, 21.9% (14/64) of the flocks were positive for E. acervulina, 12.5% (8/64) for E. maxima, 3.1% (2/64) for E. mitis, and 32.8% (21/64) for E. tenella. The Kappa Cohen test between macroscopy, histopathology, and PCR demonstrated concordance ranging from weak to moderate with the exception of histopathology and PCR of the cecum, which was strong. In the comparison between macroscopy and histopathology, there were significative differences between Scores 0 and 1 (apart from the cecum). For Score 3, there were significative differences in duodenum, jejunum and cecum (p 0.05). In conclusion, the macroscopic diagnosis and PCR can generate false-negative results, and the histopathological exam proved to be effective, making it essential to associate different techniques for the correct diagnosis of Eimeria spp. in broiler chickens.

RESUMO: A coccidiose é uma doença de grande importância na avicultura industrial. O diagnóstico correto direciona a indústria avícola ao seu melhor tratamento e controle. Desta forma, realizou-se a pesquisa de Eimeria spp. em intestinos de 64 lotes de frangos de corte, com idade média de 29 dias. Em cada lote foram retirados aleatoriamente oito frangos da linha de abate, totalizando 512. Os intestinos foram classificados na macroscopia e na histopatologia em Grau de 0 a 4. No conteúdo intestinal pesquisou-se por reação em cadeia da polimerase (PCR) oocistos das sete espécies de Eimeria. As avaliações macroscópicas demonstraram que 59,4% (38/64) dos lotes foram positivos para E. acervulina, 32,8% (21/64) para E. maxima, 29,7% (19/64) para E. tenella e 34,4% (22/64) para E. brunetti. Na avaliação histopatológica, 87,5% (56/64) dos lotes apresentaram pelo menos um frango com estruturas parasitárias compatíveis com Eimeria spp. no duodeno, 70,3% (45/64) no jejuno, 18,8% (12/64) no íleo, 46,9% (30/64) no ceco e 4,7% (3/64) no cólon. Na PCR 21,9% (14/64) dos lotes foram positivos para E. acervulina, 12,5% (8/64) para E. maxima, 3,1% (2/64) para E. mitis e 32,8% (21/64) para E. tenella. O teste de concordância de Kappa Cohen entre macroscopia, histopatologia e PCR demonstrou concordância variando de fraca a moderada com exceção da histopatologia e PCR do ceco que foi forte. Na comparação dos graus de macroscopia e histopatologia, foram encontradas diferenças significativas entre o Grau 0 e 1 (exceto no ceco) e no Grau 3 houve diferença para duodeno, jejuno e cecos (p 0,05). Conclui-se que o diagnóstico macroscópico e a PCR podem gerar resultados falsos negativos e que o exame histopatológico se demostrou eficaz, tornando fundamental a associação de diferentes técnicas para o correto diagnóstico de Eimeria spp. em frangos de corte.

Efficiency of sanitary management of litter in Eimeria spp. control in poultry housing of Western Paraná, Brazil / Eficiência dos manejos sanitários de cama no controle de Eimeria spp. em aviários no Oeste do Paraná, Brasil

Abstract The objective of this research was to evaluate the control of coccidiosis in the litter of commercial poultry housing in the Western region of Paraná, Brazil, which adopts sanitary management to control Salmonellosis. Three litter treatments were selected, proposed by an integrating company in the region: fermentation associated with liming (FL); liming (L) and fermentation (F). Stool samples were collected from 18 poultry housing, in a completely randomized experimental design, testing different collection areas in the sheds, from the 5th day of the birds' housing, repeated weekly until the 40th day, during five successive flocks. The incidence of coccidiosis was determined by oocysts count in feces (OoPG), testing the interactions between treatment, age of birds and the number of flocks housed. Samples were selected to identify, through the Multiplex PCR, species of the genus Eimeria. circulating in the shed. The results showed that in litter where fermentation was adopted, the efficiency to control the sporulation of Eimeria spp. was significantly (p <0.05) higher than in the other treatments. The use of the Multiplex PCR technique requires improvements in the preparation of samples for the extraction of genetic material.

Resumo O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência dos manejos sanitários aplicados à cama de aviários comerciais para o controle da salmonelose nas criações de frango de corte, na região Oeste do Paraná, e verificar seu efeito no controle da coccidiose. Foram selecionados três tratamentos de cama: a fermentação associada à calagem (FL); calagem (L) e fermentação (F). As amostras de fezes foram coletadas de 18 aviários, com um delineamento experimental inteiramente casualizado, testando-se diferentes áreas de coleta. As coletas foram realizadas a partir do 5° dia do alojamento e se repetiram semanalmente até o 40° dia, durante cinco lotes sucessivos. A incidência da parasitose foi determinada pela contagem de oocistos por grama de fezes (OoPG), testando as interações entre tratamento, idade das aves e número de lotes alojados. Amostras de fezes foram selecionadas para identificar os oocistos esperulados das espécies do gênero Eimeria circulantes no galpão, por meio do Multiplex PCR. Observou-se que a fermentação foi significativamente (p<0,05) mais eficiente, comparando-se o mesmo lote ao longo de todos os observados. A utilização da técnica de PCR Multiplex, precisa ser padronizada para amostras de campo.

DNA extraction methods for molecular detection of Eimeria spp. in cattle and sheep / Métodos de extração de DNA para detecção molecular de Eimeria spp. em bovinos e ovinos

Molecular detection of Eimeria species in fecal samples can be useful for experimental and diagnostic purposes. However, the parasite quantity presence in feces and the oocyst wall are an obstacle in DNA extraction protocols. Therefore, adequate sampling and effective disruption of the oocysts are essential to improve the accuracy of DNA detection by PCR. The aims of this study were to evaluate the suitability of six protocols for DNA extraction from Eimeria spp. present in bovine and sheep. Twenty pools of fecal samples from cattle (10 pools) and sheep (10 pools) were distributed to six DNA extraction protocols: commercial kit, commercial kit with modification, DNAzol, cetyl-trimethyl ammonium bromide (CTAB), glass beads and commercial kit for fecal samples. Fecal samples were submitted to DNA extraction and PCR. Among the protocols tested, CTAB was determined to be most suitable for DNA extraction from oocysts (90% of DNA detection by PCR); DNAzol and CTAB resulted in higher DNA detection from bovine samples (80%). CTAB and commercial kit with modification improved PCR detection of Eimeria spp. in sheep samples, with positive amplification of DNA in all tested samples.(AU)

A detecção molecular de espécies de Eimeria em amostras fecais pode ser útil para fins experimentais e de diagnóstico. No entanto, a quantidade de parasitas nas fezes e a parede do oocisto são um obstáculo nos protocolos de extração de DNA. Portanto, uma amostragem adequada e a ruptura efetiva dos oocistos são essenciais para melhorar a precisão da detecção de DNA por PCR. Os objetivos deste estudo foram avaliar seis protocolos para extração de DNA de Eimeria spp. em amostras de bovinos e ovinos. Foram distribuídos 20 grupos de amostras fecais de bovinos (10 grupos) e ovinos (10 grupos) em seis protocolos de extração de DNA: kit comercial, kit comercial com modificação, DNAzol, brometo de cetil-trimetil amônio (CTAB), pérolas de vidro e kit comercial para amostras fecais. As amostras fecais foram submetidas à extração de DNA e PCR. Entre os protocolos testados, CTAB foi considerado o mais adequado para extração de DNA de oocistos (90% de detecção de DNA por PCR); DNAzol e CTAB resultaram em maior detecção de DNA em amostras de bovinos (80%). CTAB e kit comercial com modificação melhoraram a detecção por PCR de Eimeria spp. em amostras de ovinos, amplificação positiva de DNA em todas as amostras testadas.(AU)

Gastrointestinal protozoa in dairy calves: identification of risk factors for infection / Protozoos gastrointestinales en terneros lecheros: identificación de factores de riesgo para la infección

ABSTRACT Objective. This study aimed to evaluate the occurrence of gastrointestinal protozoa in dairy calves and to identify potential risk factors for this type of infection. Materials and methods. For this purpose, 243 fecal samples were collected from calves up to 60 days of age in 43 dairy farms located in the West region of Santa Catarina state, Brazil. Samples were examined by centrifugal-flotation technique. Results. As a result, Giardia was present in 26.75% (65/243) of all samples, Eimeria in 21.81% (53/243), and Cryptosporidium in 20.99% (51/243). Additionally, 46.50% (113/243) of the samples were negative for any protozoa, while 39.10% (95/243) and 14.40% (35/208) showed single and mixed infections, respectively. There was a higher association between Cryptosporidium and Giardia (6.99%) in cases of mixed infections. However, the triple protozoa association had the lowest prevalence in mixed infections (2.06%). Epidemiologically, a questionnaire was applied to determine risk factors for these parasitic infections. Based on the statistical model applied, some risk factors for Cryptosporidium infections were identified, highlighting feeding management, period of time that calves stayed with their mothers (cows), and contact with dogs; the risk of contracting Giardia increased according to the milk source, while the floor type bedding, and age were appointed as risks factors for Eimeria. Conclusions. Therefore, it is possible to confirm that Giardia, Cryptosporidium and Eimeria may infect dairy calves, and the knowledge of some risk factors associated to their infection in calves.

RESUMEN Objetivo. El objetivo evaluar la ocurrencia de protozoos gastrointestinales en terneros lecheros y de identificar posibles factores de riesgo para infección. Materiales y métodos. Se recogieron 243 muestras de heces de terneros de hasta 60 días de edad en 43 granjas lecheras ubicadas en la región del oeste del estado de Santa Catarina, Brasil. Las muestras fueron examinadas por la técnica de centrifugación-flotación. Resultados. Como resultado, Giardia estaba presente en 26.75% (65/243) de todas las muestras, Eimeria en 21.81% (53/243), y Cryptosporidium en 20.99% (51/243). Además, 46.50% (113/243) de las muestras fueron negativas para cualquier protozoos, mientras que 39.10% (95/243) y 14.40% (35/208) mostraron infecciones simples y mixtas, respectivamente. Hubo una mayor asociación entre Cryptosporidium y Giardia (6.99%) en los casos de infecciones mixtas. Sin embargo, la asociación de triple protozoos tenía la menor prevalencia de infecciones mixtas (2.06%). Epidemiológicamente, se aplicó un cuestionario para determinar los factores de riesgo para estas infecciones parasitarias. Se han identificado algunos factores de riesgo de infecciones por Cryptosporidium, destacando manejo de la alimentación, periodo de tiempo que los terneros permanecieron con sus madres (vacas), y el contacto con los perros; el riesgo de contraer Giardia incrementado en función de la fuente de la leche, mientras que el tipo de suelo de las camas, y la edad fueron nombrados como los riesgos de factores de Eimeria. Conclusiones. Es posible confirmar que Giardia, Cryptosporidium y Eimeria pueden infectar a terneros lecheros, y el conocimiento de algunos factores de riesgo asociados a la infección en terneros.

Avaliação da eficácia da lasalocida e de alguns fatores epidemiológicos de Eimeria spp. parasitando bezerros Nelore mantidos em regime de pastejo / Effectiveness of lasalocid assessment and some epidemiological factors of Eimeria spp. parasitizing Nellore calves kept on pasture

A principal importância da eimeriose em bovinos, se deve ao baixo desempenho produtivo que os animais demonstram quando esta enfermidade apresenta-se sob a forma sub-clínica. Como objetivos, o presente trabalho avaliou a eficácia do uso da lasalocida sódica contra espécies de Eimeria spp. parasitando bezerros; avaliou também o desempenho ponderal dos animais submetidos aos diferentes tratamentos e analisou alguns fatores epidemiológicos que possam interferir na infecção por Eimeria nos bezerros. Foram utilizados 288 bezerros no dia 0 do estudo. Os animais pertencentes ao tratamento 01 receberam sal mineral proteinado de baixo consumo sem adição de lasalocida, enquanto que os bezerros do Tratamento 02 sal mineral proteinado de baixo consumo, com adição de lasalocida sódica, administrado via oral para bezerros dos quatro/cinco/seis meses até dez meses de idade. Colheita de fezes e pesagem dos animais foram realizadas nos dias 0 (antes do início do experimento), na desmama, 30 e 60 dias após desmama (DPD). A avaliação de alguns fatores epidemiológicos que pudessem ser relacionados com a infecção por Eimeria spp nos bezerros, como o desmame, sexo e época do ano, foram analisados neste estudo, levando-se em consideração os resultados encontrados durante todo estudo, para os 144 animais pertencentes ao grupo controle. Foram identificadas nove espécies de Eimeria nos bezerros em ordem decrescente: E. brasiliensis, E. wyomingensis, E. bovis, E. canadenses, E. zuernii, E. auburnensis, E. ellipsoidalis, E. pellita e E. cylindrica. Inesperadamente, diminuição na carga parasitária dos animais pode ser observada após o desmame. Mesmo a fazenda não adotando medidas de manejo que visam maior produtividade como a Inseminação Artificial em Tempo Fixo, que por sua vez acaba aumentando o número de nascimentos e unidade animal/hectare em uma determinada época do ano, elevado parasitismo pelo coccídio em questão foi diagnosticado nos bezerros pertencentes ao grupo controle. Talvez a época do ano em que o estudo foi realizado pode ter influenciado neste aspecto. As contagens de oocistos por grama (OoPG) de fezes para Eimeria dos animais tratados com lasalocida foram estatisticamente inferiores (P≤ 0,05) as do grupo controle após o início do estudo. O composto alcançou eficácia ≥ 95% contra o parasito em questão. No final do estudo, os animais que receberam lasalocida ganharam em média, 7,2kg a mais (P≤ 0,05) que os bezerros pertencentes ao grupo controle. Em propriedades que tem como objetivo a venda de bezerros logo após a desmama, recomenda-se o início do tratamento com a lasalocida, junto ao creep-feeding, a partir de três messes de idade, uma vez que diferencial no ganho em peso médio dos bezerros tratados foi significativamente (P≤ 0,05) mais elevado, em comparação ao grupo controle, após cinco meses de tratamento com o referido composto. Apesar de a lasalocida ser utilizada como um aditivo alimentar para animais, a diferença no ganho em peso vivo médio entre animais tratados com a lasalocida, em comparação a animais pertencentes ao grupo controle, também pode ser relacionada, em partes, a infecção dos animais por Eimeria spp., conforme discutido neste artigo, entretanto, futuros estudos devem ser conduzidos para comprovar esta hipótese.(AU)

The main importance of eimeriosis in cattle is due to lower performance shown with the disease in its sub-clinical form. This study evaluated the efficacy of lasalocid used against Eimeria spp. parasitizing calves. We also evaluated the weight gain of calves submitted to different treatments and analyzed some epidemiological factors that might interfere with Eimeria infection; 288 calves were used in the study. The calves of treatment 1 received protein mineral salt in low consumption without lasalocid, while the calves of treatment 2 received protein mineral salt on low consumption with lasalocid, administered orally to 4 to 10-month-old calves. Harvest of feces and weight control was made on days 0 (before the start of the experiment), at weaning, and 30 and 60 days after weaning (DAW). Evaluation of some epidemiological factors which could be related to infection by Eimeria spp. of the calves, such as weaning, sex and time of year, were analyzed, taking into account the results regarding the 144 calves of the control group. Nine species of Eimeria were identified in descending order: E. brasiliensis, E. wyomingensis, E. bovis, E. canadian, E. zuernii, E. auburnensis, E. ellipsoidalis, E. pellita and E. cylindrica. Unexpectedly, decrease in parasite load could be observed after weaning. Even the farm did not adopt management measures aimed for greater productivity, as Artificial Insemination in Fixed Time, which in turn ends up with increase of the number of births and animal unit per hectare at a certain period of year, high parasitism of coccidia was diagnosed in calves of the control group. Oocyst counts per gram (OPG) of calves treated with lasalocid were significantly lower (P≤ 0.05) in the control group. The compound achieved ≥ 95% efficacy against the parasite in question. At the end of the study, calves fed lasalocid gained on average 7.2kg (p≤ 0.05) more than calves in the control group. For a farm that aims to sell calves soon after weaning, is recommended to start treatment with lasalocid, with the creep-feeding, from an age of three months on, since the weight gain calves treated with lasalocid was significantly (p=0.05) higher compared with the weight gain of the control group after five months of treatment. The difference in weight gain of calves treated with lasalocid compared with caves in the control group may also be partially related to the infection by Eimeria spp., as discussed in this paper.(AU)

Ocorrência dos principais agentes bacterianos e parasitários em fezes diarreicas de bezerros búfalos nos estados de São Paulo e Paraná / Occurrence of the main bacterial and parasite agents on diarrhetic feces of buffalo calves in the states of São Paulo and Paraná

A população de bubalinos estimada no Brasil é de aproximadamente 3 milhões de animais, encontrando-se distribuídos em todos os Estados brasileiros, com crescimento médio anual de 12%. Apesar disso, os trabalhos realizados buscando os avanços na bubalinocultura são escassos. Em função da complexidade etiológica da diarreia em bubalinos e da falta de informações recentes nesta área, o presente estudo teve como objetivo avaliar a ocorrência dos principais agentes bacterianos e parasitários envolvidos na diarreia de bezerros búfalos lactentes, de explorações leiteiras semi-intensivas e intensivas em regiões dos estados de São Paulo e Paraná. De março de 2010 a junho de 2011, foram colhidas 53 amostras para exame coproparasitológico e 46 amostras para o exame bacteriológico de animais com quadro de diarreia nos municípios paulistas de São João da Boa Vista, Dourado, Pirassununga, Registro, Pariquera Açu, Pilar do Sul e uma propriedade no estado do Paraná, município de Santana do Itararé. No exame parasitológico, 45,28% (24) foram positivos para Eimeria spp., 26,42% (14) para Strongyloidea e 1,88 (1) para Toxocara vitulorum. No exame bacteriológico, 97,83%, (45) das amostras foram positivas para E. coli, contudo, somente duas foram consideradas patogênicas (E. coli STEC). Em uma amostra (2,17%) isolou-se Klebsiella pneumoniae; já a presença de Salmonella spp. não foi constatada. Para o presente estudo, a presença de endoparasitas foi bastante relevante, principalmente os casos Eimeria spp., sendo a higiene das instalações e falhas de manejo fatores importantes na ocorrência de diarreia em bezerros búfalos no estado de São Paulo.(AU)

There are about 3 million buffalos in Brazil, spread through all of the Brazilian states; with mean annual growth of 12%. In spite of that, to the best of our knowledge few studies looking for advances in the industry have been done. Due to the etiological complexity of buffalo diarrhea and the lack of information in this area, this aimed at developing a clinical evaluation on the causes of buffalo calves bacterial and parasitical diarrhea in dairy farms of the states of São Paulo and Paraná. The survey was done in farms located in the cities of São João da Boa Vista, Dourado, Pirassununga, Registro, Pariquera Açu, Pilar do Sul (SP), and Santana do Itararé (PR). From March, 2010, to June, 2011, 53 diarrhea samples were collected and screened for endoparasite and bacteria; 45.28% (24) were positive for Eimeria spp.; 26.42% (14) had Strongyloidea; and 1.88% (1) had Toxocara vitulorum. In the bacteriological test, 97.83% (45) had E. coli, but only two were considered pathogenic (E. coli STEC); 2.17% had Klebsiella pneumonia and none presented Salmonella spp. In this study, the mainly causative agent of buffalo diarrhea was Eimeria spp., and the poor hygiene in installations and breeding failure are important factors on this diarrhea occurrence.(AU)

Virulência e formação de biofilme microbiano por Enterococcus faecalis isolados de swabs cloacais de frangos de corte infectados com Eimeria spp / Virulence and biofilm formation by Enterococcus faecalis isolates from cloacal swabs of broilers infected with Eimeria spp

A dinâmica da microbiota no trato gastrointestinal (TG) de animais pode ser afetada por patógenos, tais como Eimeria spp. Os enterococos são bactérias saprófitas que colonizam o TG de mamíferos e aves. A influência sobre a microbiota intestinal está relacionada com a capacidade de adaptação das bactérias em se aderir às células hospedeiras e de colonizar as células das mucosas. O objetivo deste estudo foi analisar a frequência de genes de virulência ace, agg e operon do bopABCD em Enterococcus faecalis isolados de swabs cloacais de frangos de corte desafiados com Eimeria spp e alimentados com dietas padrões suplementadas ou não com anticoccidiano (monesina) e também avaliar a capacidade dessas cepas em formar biofilmes sob condições in vitro. Um total de 70 E. faecalis foram selecionadas e o gene agg foi mais freqüente em cepas isoladas de frangos de corte alimentados com anticoccidiano (92,3%) quando comparado ao grupo que não recebeu anticoccidiano (70,5%). Por outro lado, os genes ace e do operon bopABCD não demostraram nenhuma diferença significativa entre os dois grupos de frangos (P>0,005). Os E. faecalis isolados de frangos de corte alimentados com anticoccidiano demostraram uma maior frequência de fortes aderentes quando crescendo em meio suplementado com glicose (92,3-88,5%) e urina (77%), quando comparado com enterococos isolados de frangos que não receberam anticoccidiano. Observou-se que E. faecalis isolados de frangos tratados com anticoccidiano mostraram uma maior frequêencia dos genes dos fatores de virulência e de perfil de fortes formadores de biofilme, o que indica uma melhor adaptação dos isolados em ambiente intestinal saudável.

The microbiota dynamics in the gastrointestinal tract (GT) of animals can be disrupted by pathogens, such as Eimeria spp. Enterococci are saprophytic bacteria that colonize the GT of mammals and birds. The influence on the intestinal microbiota is related to the adaptive capacity of bacteria to adhere to host cells and colonize the mucosal cells. The aim of this study was to analyze the frequency of virulence genes ace, agg and bopABCD operon in Enterococcus faecalis isolated from cloacal swabs of broilers challenged with Eimeria spp. and fed with a standard diet supplemented or not with anticoccidial (monensin), and, also to evaluate for the ability of these strains to form biofilms under in vitro conditions. A total of 70 E. faecalis were selected and the agg gene was more frequent in strains isolated from the broilers treated with anticoccidial (92.3%) when compared to the group that not received anticoccidial (70.5%). On the other hand, the ace and bopABCD operon genes showed no significant difference between the two groups of broilers (P>0.005). The E. faecalis isolated from the broilers treated with anticoccidial showed a higher frequency of strong biofilm formation when growing in medium supplemented with glucose (92.3-88.5%) and urine (77%) when compared with enterococci isolated from broilers that not received anticoccidial. It was observed that E. faecalis isolated from broilers treated with anticoccidial showed a higher frequency of virulence factors genes and stronger biofilms formation, indicating better adaptation of the isolates in healthy intestinal environment.

Occurrence of gastrointestinal parasites in goat kids / Ocorrência de parasitos gastrintestinais em cabritos

Fecal samples from male and female goat kids, of different breeds and up to one year of age, were analyzed to determine egg and oocyst counts per gram of feces (EPG and OPG, respectively), and fecal culturing was performed to identify nematode genera. Helminth eggs and Eimeria spp. oocysts were found in 93.06% (188/202) and 77.22% (156/202) of the fecal samples, respectively. From fecal cultures, the following genera were identified: Cooperia in 11.88% (24/202), Haemonchus in 51.98% (105/202), Oesophagostomum in 9.4% (19/202), Strongyloides in 5.94 (12/202) and Trichostrongylus in 20.79% (42/202) of the samples. The Eimeria species found were E. alijevi in 25.24% (51/202), E. arloingi in 7.42% (15/202), E. caprina in 2.97% (6/202), E. caprovina in 10.39% (21/202), E. christenseni in 4.45% (9/202), E. joklchijevi in 11.38% (23/202), E. hirci in 9.4% (19/202) and E. ninakohlyakimovae in 28.71% (58/202) samples. Among the gastrointestinal parasites, the genus Haemonchus and two Eimeria species (E. ninakohlyakimovae and E. alijevi) were predominants.

Amostras fecais de cabritos machos e fêmeas, de diferentes raças e com até uma ano de idade, foram examinadas para determinação do número de ovos e oocistos por grama de fezes (OPG e OoPG, respectivamente) e coprocultura para identificação genérica dos nematódeos. Ovos de helmintos e oocistos de Eimeria spp. foram observados em 93,06% (188/202) e 77,22% (156/202) das amostras, respectivamente. Pelas coproculturas, foram identificados os gêneros Cooperia em 11,88% (24/202), Haemonchus em 51,98% (105/202), Oesophagostomum em 9,4% (19/202), Strongyloides em 5,94 (12/202) e Trichostrongylus em 20,79% (42/202) das amostras. As espécies de Eimeria encontradas foram E. alijevi em 25,24% (51/202), E. arloingi em 7,42% (15/202), E. caprina em 2,97% (6/202), E. caprovina em 10,39% (21/202), E. christenseni em 4,45% (9/202), E. joklchijevi em 11,38% (23/202), E. hirci em 9,4% (19/202) e E. ninakohlyakimovae em 28,71% (58/202) das amostras. Dentre os parasitas gastrintestinais, houve predominância do gênero Haemonchus e de duas espécies de Eimeria: E. ninakohlyakimovae e E. alijevi.

Natural infection by Eimeria spp. in a cohort of lambs raised extensively in Northeast Brazil / Infecção natural por Eimeria spp. em uma criação de cordeiros criados extensivamente no Nordeste do Brasil

The aim of the study was to examine and describe the changes in the course of Eimeria infection in a cohort of lambs of the mixed breed Santa Inês raised extensively on a farm in the State of Rio Grande do Norte, northeastern Brazil. The study was carried out between April and August 2008, during which period fecal samples were collected on a weekly basis from each of the 27 male lambs starting from the day after birth until the age of 90 days. Samples were analyzed under optical microscope and those testing positive for Eimeria oocysts were submitted to a quantitative analysis. Oocysts were detected in 17 percent of the lambs by week 3, but by week 6 100 percent of the animals were infected. Eight species of Eimeria were identified in the fecal samples, namely, in decreasing order of prevalence, E. crandallis, E. parva, E. granulosa, E. ovinoidalis, E. ahsata, E. ovina, E. faurei and E. intricata. Of the 191 fecal samples that contained Eimeria oocysts, only 32 (16.8 percent) were infected with a single species whereas 23 (12.0 percent) were infected with at least two species and 136 (71.2 percent) harbored three or more species. Although Eimeria coccidiosis is a complex disease owing to the mixed nature of the infective agents, an ongoing prevention program should be implemented to reduce production losses.

O objetivo do estudo foi analisar e descrever as alterações no curso da infecção por Eimeria em uma criação de cordeiros mestiços da raça Santa Inês criados extensivamente em uma fazenda no Estado do Rio Grande do Norte, nordeste do Brasil. O estudo foi realizado entre abril e agosto de 2008, período durante o qual amostras fecais foram coletadas semanalmente de 27 cordeiros machos a partir do nascimento até a idade de 90 dias. As amostras foram analisadas em microscópio óptico e aquelas positivas para oocistos de Eimeria foram submetidos a uma análise quantitativa. Oocistos foram detectados em 17 por cento dos cordeiros na terceira semana, mas na sexta semana 100 por cento dos animais estavam infectados. Oito espécies de Eimeria foram identificadas nas amostras fecais, citadas em ordem decrescente de prevalência, E. crandallis, E. parva, E. granulosa, E.ovinoidalis, E. ahsata, E. ovina, E. faurei e E. intricata. Das 191 amostras de fezes que continham oocistos de Eimeria, apenas 32 (16,8 por cento) estavam infectados com uma única espécie, enquanto 23 (12,0 por cento) estavam infectados com pelo menos duas espécies e 136 (71,2 por cento) abrigavam três ou mais espécies. Apesar de Eimeria ser uma doença complexa, devido à natureza mista dos agentes infecciosos, um programa de prevenção em curso deve ser implementada para reduzir as perdas de produção.

Dinâmica da infecção natural por Eimeria spp. em cordeiros da raça Santa Inês criados em sistema semi-intensivo no Norte de Minas Gerais / Dinamics of naturally Eimeria spp. infected Santa Inês lambs reared under semi-intensive conditions in Northern Minas Gerais, Brazil

Primo-infecção por Eimeria spp., evolução da infecção e principais espécies presentes foram avaliadas em 30 cordeiros da raça Santa Inês, machos, lactentes, criados em sistema semi-intensivo no Norte de Minas Gerais. A detecção inicial de oocistos nas fezes ocorreu entre o 16º e o 32º dias de idade e a espécie mais freqüente foi E. ovinoidalis (52,8 por cento). A excreção de oocistos até a 16ª semana de idade caracterizou-se por aumento gradual a partir da segunda semana, com picos na sétima e na 10ª semanas. O segundo pico foi mais baixo que o primeiro, com queda mais persistente, indicando o desenvolvimento de imunidade. Foram identificadas 11 espécies de Eimeria: E. parva, E. ovinoidalis, E. crandallis, E. caprovina, E. ovina, E. ahsata, E. pallida, E. faurei, E. intrincata, E. granulosa e E. punctata. E. crandallis foi a mais freqüente (47,2 por cento). As condições locais e de manejo, apesar de consideradas adversas, foram propícias à esporulação de oocistos de Eimeria spp. e à constante reinfecção dos cordeiros

Eimeria spp. primoinfection, the development of this infection and the infecting species were determined by the evaluation of 30 Santa Inês lactating male lambs reared under semi-intensive conditions in Northern Minas Gerais. Oocysts were first detected in faeces of lambs between the 16th and the 32th week of age. The most frequent species was E. ovinoidalis (52.8 percent). The oocysts output until the 16th week of age was characterized by peaks at the 7th and 10th weeks. The second peak was lower than the first, followed by a subsequent reduction more persistent than the first one, suggesting the development of immunity. Eleven species of Eimeria were identified: E. parva, E. ovinoidalis, E. crandallis, E. caprovina, E. ovina, E. ahsata, E. pallida, E. faurei, E. intrincata, E. granulosa and E. puncata. E. crandallis was the most frequent (47.2 percent). Although considered adverse, the environmental conditions allowed the sporulattion of Eimeria spp. oocysts and the constant reinfection of the lambs

Prevalencia de eimeria spp: En gallinas ponedoras de granjas pertenecientes a tres municipios del estado trujillo, venezuela / Prevalence of eimeria spp: In egg-laying hens of farms belonging to three municipalities of trujillo state, venezuela

Se realizó un estudio con la finalidad de determinar la prevalencia de Eimeria spp. en granjas de gallinas ponedoras ubicadas en los municipios Boconó, Pampán y Carvajal del estado Trujillo, Venezuela. Para ello fue seleccionada una población de 8.500 ponedoras evaluándose una muestra de 382, a través de la técnica de McMaster, obteniéndose una prevalencia de 17,02%. Se reportó la presencia de Ascaridia galli con una prevalencia de 5,24%. Se encontraron diferencias significativas en la distribución porcentual de las eimerias en los diferentes Municipios, centrándose el mayor porcentaje en el municipio Pampàn (P = 0,0000). El mayor porcentaje de las muestras positivas presentaron cargas de entre 50 y 200 ooquistes (P = 0,0000). Se evidenciaron las mayores tasas de infección en pisos de tierra (P £ 0,0055) y en la época lluviosa del año (P £ 0,0055).

A study was carried out with the purpose of determining the prevalence of Eimeria spp in farms of egg-laying hens located in the Municipalities of Boconó, Pampán and Carvajal. Trujillo, Venezuela. For an egg-laying hens population of 8,500 it was selected a sample of 382, of which was evaluated through the technique of McMaster. A prevalence of 17.02% was obtained. Significant differences in the percentage distribution of the Eimeria spp. were found in the different Municipalities, being centered the biggest percentage in the Municipality of Pampán (P = 0.0000). The biggest percentage in the positive samples presented loads of between 50 and 200 oocysts per gram of faces (P = 0.0000). The biggest infection rates were evidenced in earth floors (P £ 0.0055) and in the rainy time of the year (P £ 0.0055).