Ocurrence and risk factors associated with Mycoplasma agalactiae infection in dairy goat herds of Paraíba State, Brazil / Ocorrência e fatores de risco associados à infecção por Mycoplasma agalactiae em rebanhos caprinos leiteiros do estado da Paraíba, Brasil

Mycoplasmosis is a disease that may cause severe economical losses in goat and sheep herds, and it is associated with mastitis, polyarthritis, agalactia, conjunctivitis, pneumonia and reproductive failure. The objective of this study was to determine the occurrence of Mycoplasma agalactiae in milk samples and investigate the main risk factors associated with infection in goats from farms of the state of Paraíba, Brazil. For Mycoplasma agalactiae diagnosis, 251 milk samples were submitted to DNA extraction using a commercially available kit, following the manufacturer's instructions and Polymerase Chain Reaction (PCR) was performed. In addition, questionnaires were applied to identify the main risk factors associated with contagious agalactia. Out of the two hundred fifty-one samples analyzed, 50 (19.9%, I.C. 15.1-25.4%) were PCR positive for M. agalactiae. In the risk factors analysis, some associations were observed for the following variables: size of the herd (P<0.001, OR=7.1, I.C. 2.4-20.6), replacement of farm animals (P<0.001, OR=4.7, I.C. 1.8-12.2) and participation of animals in fairs and exhibitions (P=0.029, OR=2.0, I.C.1.0-3.9). The results allowed confirming the occurrence of Mycoplasma agalactiae in milk samples of goats from Paraíba. Therefore, it is strictly necessary to monitor dairy goat flocks and to raise the awareness of farmers about the economic importance of the disease, since it causes severe economic losses for producers of the state. Identification of risk factors is essential for adoption of control measures and for the correction of the management factors in farms where there are animals with positive diagnosis, avoiding, so, pathogen dissemination.(AU)

As micoplasmoses ocasionam prejuízos econômicos nas criações de ovinos e caprinos, e estão associados com quadros de mastite, poliartrite, agalaxia, conjuntivite, pneumonia e falhas reprodutivas. Objetivou-se neste estudo determinar a ocorrência de Mycoplasma agalactiae em amostras de leite e investigar os principais fatores de risco associados à infecção em caprinos provenientes de propriedades rurais do estado da Paraíba, Brasil. Para o diagnóstico de Mycoplasma agalactiae, foram analisadas 251 amostras de leite, que foram submetidas à extração do DNA genômico usando um kit comercial, seguindo as recomendações do fabricante. Para diagnóstico da infecção utilizou-se a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Além disso, foram aplicados questionários para identificar os principais fatores de risco associados infecção à agalaxia contagiosa. Das 251 amostras analisadas, 50 (19,9%; I.C. 15,1-25,4%) foram positivas na PCR para M. agalactiae. Observaram-se na análise dos fatores de risco, algumas associações para as seguintes variáveis: tamanho do rebanho (P<0,001; OR 7,1), reposição de animais da propriedade (P<0,001; OR 4,7) e participação dos animais em feiras e exposições (P= 0,029; OR 2,0). Os resultados permitiram confirmar a ocorrência do Mycoplasma agalactiae em amostras de leite de caprinos da Paraíba. Portanto, é necessário o monitoramento dos rebanhos caprinos leiteiros e a conscientização dos produtores rurais para a importância econômica da doença, visto que a mesma acarreta severos prejuízos econômicos para os produtores do estado. A identificação dos fatores de risco são imprescindíveis para a adoção de medidas de controle e para a correção dos fatores de manejo em propriedades que tenham animais com diagnóstico positivo, evitando assim, a disseminação do patógeno.(AU)

Mycoplasma agalactiae in semen and milk of goat from Pernambuco state, Brazil / Mycoplasma agalactiae em sêmen e leite de caprinos do estado de Pernambuco

In goat and sheep flocks, mycoplasmosis is a disease that may cause severe economical losses associated with polyarthritis, mastitis, agalactia, conjunctivitis, pneumonia and reproductive failure. The latter may involve repeat breeding, granular vulvovaginitis, infertility and abortions. The aim of the present study was to assess the occurrence of Mycoplasma agalactiae (Ma) in semen and milk samples from naturally infected goat in the semiarid region from Pernambuco State, Northeast from Brazil. Thirty-nine semen samples and 81 milk samples were submitted to DNA extraction using a commercially available kit and following the manufacturer's instructions. The polymerase chain reaction (PCR) was then performed in accordance with protocols described in the literature. The results of the present study revealed the presence of Ma in the DNA of 17.9% (7/39) of the semen samples and 3.7% (3/81) of the milk samples. The results obtained in the present study confirm the elimination of the DNA of Ma in the semen and milk samples. The presence of this agent in goat flocks is considered very risky in terms of reproductive disorders and contagious agalactia outbreaks in the Northeast region of Brazil.

Em caprinos e ovinos as micoplasmoses causam sérias perdas econômicas associadas com poliartrites, mastites, agalaxia, conjuntivite, pneumonias e falhas reprodutivas. Esta última pode envolver repetição de cio, vulvovaginite granular, infertilidade e abortos. O objetivo desse estudo foi verificar a ocorrência de Mycoplasma agalactiae (Ma) em sêmen e leite de caprinos naturalmente infectados procedentes de regiões semiáridas do Estado de Pernambuco, Nordeste do Brasil. Foram usadas 39 amostras de sêmen e 81 de leite, as quais foram submetidas à extração do DNA genômico usando um kit comercial, seguindo as instruções do fabricante. A reação da PCR foi realizada de acordo com protocolo previamente descrito na literatura. Os resultados revelaram a presença de DNA de Ma nas amostras de sêmen com uma frequência de 17,9% (7/39) e no leite a frequência encontrada foi de 3,7% (3/81). Os resultados obtidos no presente estudo confirmam a eliminação de DNA de Ma nas amostras de sêmen e leite analisadas. A presença deste agente nos rebanhos caprinos pode ser considerada um risco para doenças reprodutivas e surtos de agalaxia contagiosa na região Nordeste do Brasil.

Efficiency of inactive vaccines against contagious agalactia in Brazil / Eficiência de vacinas inativadas contra agalaxia contagiosa no Brasil

This paper aims to evaluate the efficiency of three inactive vaccines against contagious agalactia prepared with samples of Mycoplasma agalactiae isolated in Brazil and different adjuvants. Vaccine 1 adsorbed with aluminum hydroxide was administered in 23 goats (Gc1) and 13 sheep (Gov1); vaccine 2 containing Montanide IMS-2215-VG was administered in 22 goats (Gc2) and 12 sheep (Gov2) and vaccine 3, containing Montanide Gel-01 was administered in 22 goats (Gc3) and 12 sheep (Gov3). All animals were negative for Ma at indirect ELISA and received two doses of 2mL each, subcutaneously, within a 21 day interval. Five animals from each species were used as control. Seventy-five days after the booster, four animals from each vaccinated group and two from the control group were challenged with 5mL of Ma culture containing 10(7)cfu/mL, orally and through immersion of the female's udder in lactation. The serological response was analyzed during vaccination days (0 and 21) and at 51, 81, 111, 141 and 171 days after vaccination. The collection and analysis of the challenged animals were conducted at the day of the challenge (D0) and 7, 14, 21, 28, 35, 42, 49 and 56 days after the challenge. The three vaccines induced the production of antibodies, having no significant statistical difference (p<0.05). Animals from groups Gc1, Gc2 and Gov2 developed higher levels of antibodies, with significant statistical difference compared to the other vaccinated group and control group (p<0.05). After the challenge, the animals from the control presented an increase in regional lymph nodes and conjunctivitis, mastitis and arthritis. In four vaccinated animals, discrete conjunctivitis and congestion of the episcleral veins was observed. It is concluded that vaccines 1 and 2 induced levels of protective antibodies in goats and sheep, sufficient for clinical protection of the animals submitted to the experimental infection, indicating its use on the prevention of contagious agalactia.

Este trabalho tem como objetivo avaliar a eficácia de três vacinas inativadas contra agalaxia contagiosa, preparadas com amostra de Mycoplasma agalactiae isolada no Brasil e diferentes adjuvantes. A vacina 1, adsorvida com hidróxido de alumínio, foi administrada em 23 caprinos (Gc1) e 13 ovinos (Gov1); a vacina 2, contendo Montanide IMS-2215-VG, foi administrada em 22 caprinos (Gc2) e 12 ovinos (Gov2); e a vacina 3, contendo Montanide Gel-01 foi administrada em 22 caprinos (Gc3) e 12 ovinos (Gov3). Todos os animais eram negativos para Ma no ELISA indireto e receberam duas doses de 2mL cada, por via subcutânea, com intervalo de 21 dias. Cinco animais de cada espécie foram utilizados como controle. Setenta e cinco dias após o reforço, quatro animais de cada grupo vacinado e dois do grupo controle foram desafiados com 5mL de cultura de Ma contendo 10(7)ufc/mL, por via oral e pela imersão dos tetos das fêmeas em lactação. A resposta sorológica foi analisada nos dias da vacinação (zero e 21) e aos 51, 81, 111, 141 e 171 dias pós-vacinação. As coletas e análises dos animais desafiados foram realizadas no dia do desafio (D0) e sete, 14, 21, 28, 35, 42, 49 e 56 dias pós-desafio. As três vacinas induziram produção de anticorpos, não havendo diferença estatisticamente significativa entre caprinos e ovinos (P>0,05). Animais dos grupos Gc1, Gc2 e Gov2 produziram níveis de anticorpos mais elevados, com diferença estatisticamente significativa em relação aos demais grupos vacinados e ao grupo controle (P<0,05). Após o desafio, os animais do grupo controle apresentaram aumento de linfonodos regionais e conjuntivite, mastite e artrite. Em quatro animais vacinados, foi observada discreta conjuntivite e congestão dos vasos episclerais. Conclui-se que as vacinas 1 e 2 induziram níveis de anticorpos protetores em caprinos e ovinos suficientes para proteção clínica dos animais submetidos à infecção experimental, podendo ser indicadas para prevenção da agalaxia contagiosa.

Resposta imunológica em caprinos vacinados contra agalaxia contagiosa / Immune response in goats vaccinated against contagious agalactia

Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiência de duas vacinas inativadas contra agalaxia contagiosa contendo adjuvante oleoso e aquoso. Para tanto, foram utilizados 73 caprinos, agrupados em dois experimentos. No experimento I, para avaliar a inocuidade das vacinas, foram utilizados 15 caprinos, subdivididos em três grupos de cinco animais cada, sendo que o grupo A1 foi imunizado com a vacina aquosa, o grupo B1 com a vacina oleosa e o grupo C não imunizado, foi o controle. No experimento II, para avaliar a resposta imune foram utilizados 58 caprinos, subdivididos em dois grupos, sendo o grupo A2, com 28 animais imunizados com a vacina aquosa e o grupo B2, com 30 animais imunizados com a vacina oleosa. Os animais do experimento II receberam uma terceira dose, 180 dias após a segunda dose vacinal. Os níveis de anticorpos foram determinados por ELISA indireto, realizado no dia de cada vacinação e 30 dias após a segunda dose (experimento I) e 30 dias após a terceira dose vacinal (experimento II). Os animais do grupo B1 e B2 (vacina oleosa) apresentaram níveis de anticorpos estatisticamente superiores (P<0,05) quando comparados aos dos grupos A1 e A2 (vacina aquosa) nos dois experimentos.

This study aimed to evaluate the efficacy of two inactivated vaccines against contagious agalactia containing adjuvant oily and watery. For this, 73 goats were divided in two experiments. In the experiment I was verified the vaccine safety and 15 goats were divided into three experimental groups of five animals each. A1 and B1 groups were immunized with vaccine containing either aluminum or oil, respectively, and group C was the control group without immunization. In the experiment II, the immune response against the vaccines was evaluated by immunization of 58 goats that were divided in to two groups: group A2, 28 animals were immunized with the aluminum based vaccine; and group B2, 30 animals were immunized with the oil based vaccine. In the experiment II, the animals received a third dose on 180 day after the second dose. Antibody levels were determined by indirect ELISA from ssamples collected on vaccination days and on 30 day after the second dose (Experiment I) and on 30 day after the third dose (Experiment II). The animals from B1 and B2 groups (oil based vaccine) demonstrated higher antibody levels (P<0.05) than A1 and A2 (aluminum based vaccine) in both experiments.