Assays for the in vitro establishment of Swietenia macrophylla and Cedrela odorata / Ensayos para el establecimiento in vitro de Swietenia macrophyllay Cedrela odorata

Recalcitrance and contamination in Mahogany (Swietenia macrophylla King) and Spanish cedar (Cedrela odorata L.) stem tissues are the main causes of its ineffective in vitro propagation. The objectives of this research were: a) to evaluate sodium hypochlorite (NaOCl) and plant preservative mixture (PPM®) as surface disinfectants and/or added to the culture medium for the in vitro establishment of nodal explants taken from 10-year-old Mahogany and Spanish cedar plants, and b) to evaluate the in vitro response of such explants treated with N6-benzylaminopurine (BAP) (0, 2.2, 4.4, 8.8, 17.7 μM), silver nitrate (AgNO3) (0, 3 mg l-1), activated charcoal (0, 1 g l-1) and vented caps. All the experiments were arranged in a completely randomized design. The NaOCl at 15%, for 20 min, as a surface sterilization or PPM® at 2 ml l-1 into the culture medium, were the best treatments to reduce contamination for both species. For Mahogany explants, BAP at 17.7 μM resulted in higher percentages of bud breaks than Spanish cedar (64% and 25%, respectively). Leaves on elongated shoots dropped off by 20 days after starting the explants in culture and neither the activated charcoal nor the AgNO3 alone or combined prevented leaf abscission. The AgNO3 decreased contamination, but also increased leaf abscission. Bud breaks was two-fold higher for nodal explants established in vessels with vented caps than with normal caps. Mahogany nodal explants were easier to surface sterilize and more buds broke from BAP treated explants than Spanish cedar treated explants in the in vitro establishment.

La contaminación y la recalcitrancia de tejidos de tallo de Caoba (Swietenia macrophylla King) y Cedro español (Cedrela odorata L.) son las causas principales de su inefectiva micro-propagación. Los objetivos de la investigación fueron: a) evaluar el hipoclorito de sodio (NaClO) y una mezcal preservadora de plantas (PPM®) como desinfectantes superficiales y/o agregados al medio de cultivo para el establecimiento in vitro de explantes nodales de Caoba y Cedro español de 10 años de edad; b) evaluar la respuesta in vitro de tales explantes tratados con N6-benzylaminopurine (BAP) (0, 2.2, 4.4, 8.8, 17.7 μM), nitrato de plata (AgNO3) (0, 3 mg l-1), carbón activado (0, 1 g l-1) y tapas porosas. Los experimentos fueron establecidos bajo un diseño completamente al azar. La contaminación se redujo en ambas especies con NaOCl al 15% durante 20 min como desinfección superficial o con PPM® (2 ml l-1) agregado al medio de cultivo. El mayor porcentaje de brotación de explantes se obtuvo con BAP a 17.7 μM en caoba (64%) comparado con cedro (25%). Los brotes se defoliaron a los 20 días de cultivo y ni el carbón activado ni el AgNO3, solos o combinados evitaron la defoliación. El AgNO3 disminuyó la contaminación, pero incrementó la defoliación. La brotación fue dos veces mayor en los explantes nodales establecidos en recipientes con tapas porosas que cuando se utilizaron tapas normales. Los explantes nodales de Caoba respondieron mejor a la desinfección superficial y a los tratamientos de BAP comparados con los de Cedro español en el establecimiento in vitro.

In vitro rhizogenesis: histoanatomy of Cedrela odorata (Meliaceae) microcuttings

Cedrela odorata (Meliaceae) is considered as one of the most valuable forest tree in the tropics. Clonal propagation of this species provide an alternative method to propagate superior genotypes, being the production of good quality adventitious roots one of the most important steps in micropropagation techniques. The sequence of anatomical changes that takes place during the formation of adventitious roots in shoots of Cedrela odorata cultured in vitro is described in this study. Eigth-week-old shoots, from multiplication cultures, were rooted in Murashige and Skoog´s medium (1962) with half- strength macronutrients and with 0 or 1mg/l indole-3-butyric acid (IBA). Between 12 and 24h after the start of rooting, some cambium, phloem and interfascicular parenchyma cells became dense cytoplasm, nuclei with prominent nucleoli and the first cell divisions were observed, especially in shoots treated with auxin (dedifferentiation phase). After 3-4 days, the number of dedifferentiated cells and mitotic divisions increased considerably, and the formation of groups of some 30-40 meristematic cells (meristemoids) was observed (induction phase). The first primordial roots developed from the 4th-5th day. The vascular tissues of these primordia connected to those of the explant, and roots began to emerge from the base by day 6. Development of the primordial roots was similar in the control shoots and shoots treated with 1mg/l IBA, although there were more roots per explant in the latter. Rev. Biol. Trop. 59 (1): 447-453. Epub 2011 March 01.

Cedrela odorata (Meliaceae) es una especie tropical de gran valor económico. La propagación in vitro de esta especie ofrece una vía alternativa para la clonación de genotipos superiores, siendo la formación de un buen sistema radical uno de los pasos claves en la micropropagación. En este trabajo analizamos la secuencia de cambios anatómicos que tienen lugar durante la formación de raíces adventicias en microestaquillas de Cedrela odorata. Para el enraizamiento se utilizó el medio MS con los macronutrientes reducidos a la mitad, suplementado con AIB 0 ó 1mg/l. A partir de las 12-24 horas del comienzo del enraizamiento, se observaron los primeros cambios en las células del cambium, del floema y del parénquima interfascicular (fase de diferenciación). Después de 3-4 días, aparecen grupos de células meristemáticas (fase de inducción). Los primordios se desarrollan después de 4-5 días, siendo visibles al exterior a partir del sexto día (fase de emergencia). El desarrollo de las raíces fue similar en ambos tratamientos, pero la presencia de AIB aumenta el número de raíces.