Síntesis y actividad antifúngica in vitro frente a Fusarium oxysporum de amidas N-alquilsustituidas derivadas de 2-aminoácidos

Una serie de amidas N-alquilsustituidas 1-16 fueron sintetizadas a partir de malonato de dietilo y ésteres de alquilo derivados de los aminoácidos L-triptófano, L-alanina, L-fenilalanina y L-tirosina. Los métodos de síntesis empleados involucraron calentamiento por irradiación de microondas empleando tanto un ácido de Lewis (AlCl3) o 4-dimetilaminopiridina (DMAP) como catalizador y auxiliar nucleofílico, respectivamente. Los resultados sugieren que el uso de irradiación de microondas y de DMAP conlleva mejores rendimientos en un tiempo de reacción más corto. Para ilustrar las diferencias observadas, se presentan las propuestas mecanísticas de cada método de reacción para la formación de amidas N-alquilsustituidas. Finalmente, las amidas sintetizadas se evaluaron en condiciones in vitro frente a Fusarium oxysporum; mostraron actividad antifúngica a diferentes niveles (0,40 mM < IC50 < 29,1 mM), lo cual indicó que las variaciones de la actividad observada de este grupo de compuestos pueden deberse al efecto de la amida acíclica como bioisóstero no clásico de algunas fitoalexinas heterocíclicas.

N-alkyl substituted amides 1-16 were synthesized from diethyl malonate and alkyl esters derived from the amino acids L -tryptophan, L -alanine, L -phenylalanine, and L -tyrosine. In addition, a microwave-assisted protocol was employed using a Lewis acid (AlCl3) or dimethylaminopyridine (DMAP) as a catalyst and nucleophilic auxiliary, respectively, affording the desired compounds. The results suggest that DMAP-catalyzed reactions under microwave irradiation yield higher during short reaction times. Each reaction method's mechanistic proposals for forming N-alkyl-substituted amides are presented to illustrate the observed differences. The synthesized amides were evaluated under in vitro conditions against Fusarium oxysporum. The compounds exhibited antifungal activity at different levels (0.40 mM < IC50 < 29.1 mM). These results indicated that the observed activity variations of this compound group might be due to the effect of acyclic amide as a non-classical bioisostere of some heterocyclic phytoalexins.

Uma série de amidas N-alquil substituídas foram sintetizadas a partir de malonato de dietila e ésteres alquílicos derivados dos aminoácidos ʟ-triptofano, L -alanina, L-fenilalanina e L-tirosina. Os métodos de síntese empregados foram realizados usando aquecimento por irradiação de micro-ondas empregando um ácido de Lewis (AlCl3) ou dimetilaminopiridina (DMAP) como catalisador. Os resultados sugerem que a irradiação de micro-ondas usando DMAP leva a melhores rendimentos em um tempo de reação mais curto. Para ilustrar as diferenças observadas, são apresentadas as propostas mecanísticas de cada método de reação para a formação de amidas N-alquilsubstituídas. Finalmente, as amidas sintetizadas foram avaliadas in vitro contra Fusarium oxysporum, mostrando atividade antifúngica em diferentes níveis (0.40 mM < IC50 < 29.1 mM), o que indica que as variações observadas na atividade desse grupo de compostos podem ser devidas ao efeito de amida acíclica como um bioisóstero não clássico de algumas fitoalexinas heterocíclicas.

Atualização em reações de hipersensibilidade aos anestésicos locais / Update on local anesthetics hypersensitivity reactions

Os anestésicos locais são essenciais em diversos procedimentos médicos e odontológicos. Funcionam estabilizando as membranas neuronais e inibindo a transmissão de impulsos neurais, o que permite a realização desses procedimentos com mais segurança e sem dor. As reações adversas a drogas são definidas pela Organização Mundial da Saúde como todos os efeitos nocivos, não intencionais e indesejáveis de uma medicação, que ocorrem em doses usadas para prevenção, diagnóstico e tratamento. As reações de hipersensibilidade são reações adversas do tipo B, imprevisíveis, que clinicamente se assemelham a reações alérgicas e podem ou não envolver um mecanismo imune. As reações de hipersensibilidade verdadeiras aos anestésicos locais são raras, apesar de superestimadas. Nesta revisão destacamos a necessidade de uma avaliação completa dos pacientes com suspeita de reação alérgica aos anestésicos locais, incluindo a investigação de outros possíveis alérgenos que tenham sido utilizados no procedimento, como analgésicos, antibióticos e látex. A estratégia de investigação e seleção de pacientes para testes deve se basear na história clínica. Dessa forma, poderemos fornecer orientações mais assertivas e seguras aos pacientes.

Local anesthetics are essential in many medical and dental procedures. They work by stabilizing neuronal membranes and inhibiting the transmission of neural impulses, which allows these procedures to be performed more safely and without pain. Adverse drug reactions are defined by the World Health Organization as all harmful, unintended and undesirable effects of a medication, which occur at doses used for prevention, diagnosis and treatment. Hypersensitivity reactions are unpredictable type B adverse reactions that clinically resemble allergic reactions and may or may not involve an immune mechanism. True hypersensitivity reactions to local anesthetics are rare, although overestimated. In this review, we highlight the need for a thorough evaluation of patients with suspected allergic reaction to local anesthetics, including investigation of other possible allergens that may have been used in the procedure, such as analgesics, antibiotics and latex. The investigation strategy and patient selection for testing should be based on clinical history. In this way, we will be able to provide more assertive and safe guidelines to patients.

Proteomic profile of Piper tuberculatum (Piperaceae) / Perfil proteômico e metabólico de Piper tuberculatum (Piperaceae)

Abstract Piper tuberculatum (Piperaceae) is a species that accumulates especially amides as secondary metabolites and several biological activities was previously reported. In this article, we report a proteomic study of P. tuberculatum. Bidimensional electrophoresis (2D SDS-PAGE) and mass spectrometry (ESI-Q-TOF) were used in this study. Over a hundred spots and various peptides were identified in this species and the putative functions of these peptides related to defense mechanism as biotic and abiotic stress were assigned. The information presented extend the range of molecular information of P. tuberculatum.

Resumo Piper tuberculatum (Piperaceae) é uma espécie que acumula especialmente amidas como metabólitos secundários e diversas atividades biológicas dessa espécie foram relatadas anteriormente. No presente artigo, relatamos um estudo proteômico dessa espécie. Eletroforese bidimensional (2D SDS-PAGE) e espectrometria de massas (ESI-Q-TOF) foram utilizadas nesse estudos. Mais de cem spots e vários peptídeos foram identificados nesta espécie e as funções putativas desses peptídeos relacionadas a mecanismo de defesa como estresse biótico e abiótico foram atribuídos. As informações apresentadas ampliam a gama de informações moleculares dessa espécie.

Proteomic profile of Piper tuberculatum (Piperaceae)

Abstract Piper tuberculatum (Piperaceae) is a species that accumulates especially amides as secondary metabolites and several biological activities was previously reported. In this article, we report a proteomic study of P. tuberculatum. Bidimensional electrophoresis (2D SDS-PAGE) and mass spectrometry (ESI-Q-TOF) were used in this study. Over a hundred spots and various peptides were identified in this species and the putative functions of these peptides related to defense mechanism as biotic and abiotic stress were assigned. The information presented extend the range of molecular information of P. tuberculatum.

Resumo Piper tuberculatum (Piperaceae) é uma espécie que acumula especialmente amidas como metabólitos secundários e diversas atividades biológicas dessa espécie foram relatadas anteriormente. No presente artigo, relatamos um estudo proteômico dessa espécie. Eletroforese bidimensional (2D SDS-PAGE) e espectrometria de massas (ESI-Q-TOF) foram utilizadas nesse estudos. Mais de cem spots e vários peptídeos foram identificados nesta espécie e as funções putativas desses peptídeos relacionadas a mecanismo de defesa como estresse biótico e abiótico foram atribuídos. As informações apresentadas ampliam a gama de informações moleculares dessa espécie.

Bioautography to assess antibacterial activity of Ottonia martiana Miq. (Piperaceae) on the human oral microbiota

Ottonia martiana Miq. (Piperaceae), planta conhecida popularmente por "anestésia" e empregada no tratamento de odontalgias devido à sua ação anestésica sobre a mucosa oral, foi investigada por meio de ensaios antibacterianos de difusão em disco de papel e de bioautografia frente a microorganismos presentes na microbiota oral humana [Streptococcus mutans (ATCC 25175), Streptococcus mitis (ATCC 49456), Streptococcus pyogenes (ATCC 19615), Streptococcus salivarius (ATCC 25975), Escherichia coli (ATCC 11229 e 25922), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), Enterobacter aerogenes (ATCC 27853). Os resultados dos bioensaios mostraram que o extrato bruto de O. martiana (32.9 mg mL-1) apresenta potencial antibacteriano frente às bactérias Gram-positivas testadas. Dentre as substâncias bioativas detectadas foram identificadas a piperovatina (Rf 0.35), piperlonguminina (Rf 0.52) e a isopiperlonguminina (Rf 0.52). A piperovatina e isopiperlonguminina foram isoladadas do extrato das raízes de O. martiana, guiadas pelo teste de bioautografia.

Ottonia martiana Miq. (Piperaceae), a plant known popularly in southern Brazil as "anestésia" and used in the treatment of odontalgia for its anesthetic action on the oral mucosa, was investigated for antibacterial activity by paper disc agar diffusion and bioautographic methods, against microorganisms present in the human oral cavity [Streptococcus mutans (ATCC 25175), Streptococcus mitis (ATCC 49456), Streptococcus pyogenes (ATCC 19615), Streptococcus salivarius (ATCC 25975), Escherichia coli (ATCC 11229 and 25922), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) and Enterobacter aerogenes (ATCC 27853).The crude extract of O. martiana (32.9 mg mL-1) had antibacterial potential against all Gram-positive bacteria tested. Analysis of the bioautograms led to the detection of bioactive substances, among which it was possible to identify piperovatine (Rf 0.35), piperlonguminine (Rf 0.52) and isopiperlonguminine (Rf 0.52). The piperovatine and isopiperlonguminine were isolated from the roots of O. martiana, guided by a bioautographic antibacterial bioassay.

Constituintes químicos fixos e voláteis dos talos e frutos de Piper tuberculatum Jacq. e das raízes de P. hispidum H. B. K. / Fixed and volatile chemical constituents from stems and fruits of Piper tuberculatum Jacq. and from roots of P. hispidum H. B. K

Os óleos essenciais dos frutos e talos finos de Piper tuberculatum e das raízes de P. hispidum, coletados no estado de Rondônia, foram obtidos por hidrodestilação e analisados por GC e GC-MS. Foram identificados como constituintes majoritários, nos óleos dos frutos e talos finos de P. tuberculatum, o óxido de cariofileno (32,1 por cento) e (26,6 por cento) e o (E)-cariofileno (17,7 por cento) e (12,3 por cento), respectivamente. No óleo essencial das raízes de P. hispidum, foram identificados, como constituintes majoritários, o dilapiol (57,5 por cento), a elemicina (24,5 por cento) e o apiol (10,2 por cento). Do extrato etanólico dos frutos de P. tuberculatum, foram isolados os esteróides β-sitosterol e estigmasterol, as amidas piplartina e dihidropiplartina e um derivado do ácido cinâmico, o ácido 3,4,5-trimetoxi-dihidrocinâmico.

The essential oils of the fruits and fine stems of Piper tuberculatum and of the roots of P. hispidum, collected in the state of Rondônia, had been gotten by hydrodistillation and analyzed by GC and GC-MS. Caryophyllene oxide - 32,1 percent in fruits and 26,6 percent in fine stem, and (E)-caryophyllene - 17,7 percent in fruits and 12,3 percent in fine stems, were identified as the major constituents in such parts of P. tuberculatum. In the essential oil of the roots of P. hispidum, dillapiol (57,5 percent), elemicine (24,5 percent) and apiole (10,2 percent) were identified as the most abundant constituents. From the ethanolic extract of the fruits of P. tuberculatum, the steroids β-sitosterol and stigmasterol, the amides piplartine and dihidropiplartine and the derivative of the cinâmico acid 3,4,5-trimethoxy-dihidrocinâmic acid were isolated.

Inseminação artificial intra-uterina em leitoas com sêmen criopreservado com dimetilacetamida e glicerol / Intrauterine artificial insemination of gilts using cryopreserved boar semen with dimetilacetamide and glycerol

Este estudo teve por objetivo avaliar o uso da dimetilacetamida (DMA) e de glicerol na criopreservação de sêmen suíno sobre as taxas de concepção e fertilização in vivo, utilizando o método de inseminação artificial pós-cervical. Foram sincronizadas 60 leitoas pré-púberes e inseminadas com o uso de sêmen congelado com glicerol 3 por cento (30 fêmeas) e DMA 5 por cento (30 fêmeas). O método de inseminação utilizado foi o pós-cervical, com concentração de 1 x 10(9) espermatozóides vivos por dose. Após 36 a 40h da inseminação, as fêmeas foram abatidas, sendo realizada a contagem de corpos hemorrágicos (CH) nos ovários. Foi realizada a lavagem dos ovidutos das fêmeas, verificando o número de estruturas recuperadas (oócitos e embriões), calculando-se as taxas de concepção e fertilização. A média de CH nas fêmeas do grupo glicerol 3 por cento não diferiu (P>0,05) daquelas do grupo DMA 5 por cento (10,4 x 10,2, respectivamente). Não houve diferença (P>0,05) nas taxas de recuperação de estruturas entre os grupos glicerol 3 por cento (68,9 por cento) e DMA 5 por cento (66,9 por cento). Os resultados obtidos nos grupos glicerol 3 por cento e DMA 5 por cento para as taxas de concepção (73,3 x 76,6 por cento) e fertilização (48,6 x 59,4 por cento) não apresentaram diferença (P>0,05). Conclui-se que não há diferenças nas taxas de concepção e fertilização in vivo utilizando-se sêmen congelado com o uso de dimetilacetamida ou de glicerol.

The objective of this study was to evaluate the use of dimethylacetamide (DMA) and glycerol in boar semen cryopreservation on the conception and fertility rates.Sixty pre-pubertal gilts were synchronized and inseminated with semen including either glycerol 3 percent or DMA 5 percent as cryoprotectants (n=30 for both groups). Artificial insemination was conducted with the intrauterine method using doses with 1 x 10(9) viable spermatozoa. The gilts were slaughtered 36-40h after the insemination and the hemorrhagic bodies (CH) in the ovaries were counted. The oviducts were washed, so oocytes and embryos could be recovered to determine the conception and fertility rates. The average CH obtained with glycerol 3 percent did not differ (P>0.05) from those observed with DMA (10.4 x 10.2, respectively). Recovery rates also did not differ (P>0.05) between groups (68.9 percent with glycerol and 66.9 percent with DMA). Conception (73.3 x 76.6 percent) and fertility rate (48.6 x 59.4 percent) were also similar (P>0.05) for glycerol and DMA, respectively. Those results indicate that DMA 5 percent can replace glycerol 3 percent in the composition of extenders for frozen boar semen.

Estudo das propriedades anticâncer da piplartina / Studying the anticancer properties of piplartine

A piplartina é um alcalóide/amida conhecido encontrado em espécies do gênero Piper com propriedade citotóxica interessante. Para avaliar o seu potencial antineoplásico, um estudo farmacológico de suas propriedades anticâncer foi realizado em vários modelos biológicos. A piplartina apresentou potente atividade citotóxica em todas as linhagens tumorais testadas. Por comparação da citotoxicidade de moléculas com estruturas relacionadas com a piplartina, foi identificado que a presença da carbolina α,β-insaturada do anel amídico é essencial para a sua atividade citotóxica. Em células mononucleares de sangue periférico de doadores saudáveis expostas a piplartina induziu apoptose em células leucêmicas HL-60, com participação da via intrínseca, de maneira dependente da concentração, como observado pelo padrão de morfologia celular, integridade da membrana citoplasmática, alteração no potencial transmembrânico da mitocôndria e aumento da fragmentação do DNA. Na análise do ciclo celular, foi observado bloqueio na fase G2. A piplartina foi capaz de induzir dano ao DNA em células V79, como observado pelo ensaio do cometa alcalino e neutro. Seu mecanismo de ação genotóxico parece ser semelhante ao da sua atividade citotóxica. Não foi observada atividade mutagênica, com ou sem ativação metabólica (S9), nas linhagens de Salmonella (modelo procariótico) testadas. Por outro lado, a piplartina foi mutagênica e recombinogênica em linhagens de Saccharomyces cerevisiae (modelo eucariótico)...