Detection of Enterobacteriaceae, antimicrobial susceptibility, and virulence genes of Escherichia coli in canaries (Serinus canaria) in northeastern Brazil / Detecção de enterobactérias, sensibilidade antimicrobiana e genes de virulência de Escherichia coli em canários belgas (Serinus canaria) da região Nordeste do Brasil

This study aimed to verify the presence of members from the Enterobacteriaceae family and determine antimicrobial susceptibility profiles of the isolates in canaries bred in northeastern Brazil; in addition, the presence of diarrheagenic Escherichia coli (DEC) and avian pathogenic Escherichia coli (APEC) was also verified in these birds. Samples were collected during an exhibition organized by the Brazilian Ornithological Federation in July 2015 in Fortaleza, Brazil. A total of 88 fecal samples were collected and submitted to pre-enrichment step using buffered peptone water, followed by enrichment with the following broths: brain-heart infusion, Rappaport-Vassiliadis, and Selenite-Cystine. Subsequently, aliquots were streaked on MacConkey, brilliant green and salmonella-shigella agar plates. Colonies were selected according to morphological characteristics and submitted to biochemical identification and antimicrobial susceptibility tests with disk-diffusion technique. E. coli strains were evaluated for the presence of eight DEC genes and five APEC genes through conventional polymerase chain reaction (PCR) screening. The most frequent species observed were Pantoea agglomerans (25%), Serratia liquefaciens (12.5%), and Enterobacter aerogenes (9.1%). A single rough strain of Salmonella enterica subsp. enterica was identified in one sample (1.1%). High resistance rates to amoxicillin (78.7%) and ampicillin (75.4%) were identified. Polymyxin B (9.8%), gentamycin (6.6%), and enrofloxacin (6.6%) were the most efficient antibiotics. The total number of multidrug-resistant strains (isolates resistant to more than three antimicrobial classes) was 23 (37.7%). Four E. coli strains were tested for the virulence genes, and two were positive for APEC virulence genes: one strain was positive for iutA and the other for hlyF. In conclusion, canaries in northeastern Brazil participating in exhibitions may present Salmonella spp., Escherichia coli and other enterobacteria in the intestinal microbiota with antimicrobial resistance. These results indicate that, although the E. coli strains recovered from canaries in this study have some virulence genes, they still do not fulfill all the requirements to be considered APEC.(AU)

O objetivo deste trabalho foi verificar a presença de enterobactérias e determinar o perfil de sensibilidade aos antimicrobianos dos isolados oriundos de canários belgas criados em cativeiro do Nordeste do Brasil, adicionalmente verificou-se a presença de Escherichia coli diarreiogênicas (DEC) e E. coli patogênica aviária (APEC) nesses animais. A colheita das amostras ocorreu durante uma exposição de canários belgas organizada pela Federação Ornitológica do Brasil (FOB), em julho de 2015, na cidade de Fortaleza, Ceará, Brasil. Um total de 88 amostras de fezes foram coletadas e submetidas a pré-enriquecimento utilizando água peptonada, caldo de enriquecimento Brain Heart Infusion, Rappaport-Vassiliadis e Selenito-Cistina. Fez-se triagem em placas de ágar MacConkey, Verde Brilhante e ágar Salmonella Shigella. As colônias foram selecionadas e submetidas à identificação bioquímica e susceptibilidade antimicrobiana. Estirpes de Escherichia coli foram avaliadas quanto a presença de 8 genes de virulência de DEC e cinco de APEC por reação em cadeia da polimerase convencional (PCR). As enterobactérias encontradas com maior frequência foram Pantoea agglomerans (25%), Serratia liquefaciens (12,5%) e Enterobacter aerogenes (9,1%). Uma única estirpe de Salmonella enterica subsp. enterica (rugosa) esteve presente em um dos isolados (1,1%). Altos percentuais de resistência foram encontrados para dois antibióticos: amoxicilina (78,7%) e ampicilina (75,4%). Polimixina B (9,8%), gentamicina (6,8%) e enrofloxacina (6,5%) foram os antibióticos com melhor eficiência. O total de estirpes multirresistentes (a mais de três classes de antimicrobianos) foi de 23 (37,7%). Das quatro estirpes de E. coli isoladas, duas foram positivas para os genes de APEC, sendo uma estipe para o gene iss e outra para os genes iutA e hlyF. Portanto, canários belgas criados em cativeiro no Brasil que participam de exposições podem apresentar Salmonella spp., Escherichia coli e outras enterobactérias em sua microbiota intestinal com resistência antimicrobiana. Estes resultados indicam que as estirpes de E. coli isoladas de canário belga no presente estudo apresentam alguns, mas não todos, genes de virulência para serem caracterizadas como E. coli patogênica para aves (APEC).(AU)

Identification and antimicrobial resistance of members from the Enterobacteriaceae family isolated from canaries (Serinus canaria) / Identificação e resistência antimicrobiana de membros da família Enterobacteriaceae isolados de canários (Serinus canaria)

The Enterobacteriaceae family contains potentially zoonotic bacteria, and their presence in canaries is often reported, though the current status of these in bird flocks is unknown. Therefore, this study aimed to identify the most common genera of enterobacteria from canaries (Serinus canaria) and their antimicrobial resistance profiles. From February to June of 2013, a total of 387 cloacal swab samples from eight domiciliary breeding locations of Fortaleza city, Brazil, were collected and 58 necropsies were performed in canaries, which belonged to the Laboratory of Ornithological Studies. The samples were submitted to microbiological procedure using buffered peptone water and MacConkey agar. Colonies were selected according to their morphological characteristics on selective agar and submitted for biochemical identification and antimicrobial susceptibility. A total of 61 isolates were obtained, of which 42 were from cloacal swabs and 19 from necropsies. The most isolated bacteria was Escherichia coli with twenty five strains, followed by fourteen Klebsiellaspp., twelve Enterobacterspp., seven Pantoea agglomerans, two Serratiaspp. and one Proteus mirabilis. The antimicrobial to which the strains presented most resistance was sulfonamides with 55.7%, followed by ampicillin with 54.1% and tetracycline with 39.3%. The total of multidrug-resistant bacteria (MDR) was 34 (55.7%). In conclusion, canaries harbor members of the Enterobacteriaceae family and common strains present a high antimicrobial resistance rate, with a high frequency of MDR bacteria.

A família Enterobacteriaceae possui bactérias com potencial zoonótico e a presença destas bactérias em canários é relatada na literatura, porém a realidade dos plantéis de criadores de canários é desconhecida. Portanto, este trabalho teve como objetivo isolar enterobactérias de canários belga (Serinus canarius) com o intuito de conhecer os gêneros mais comuns nestas aves e suas respectivas resistências a antimicrobianos. De fevereiro a junho de 2013 foram coletadas 387 amostras de swabs cloacais de canários de oito propriedades da cidade de Fortaleza, Brasil e de 58 necropsias de aves do acervo próprio do Laboratório de Estudos Ornitológicos. As amostras foram submetidas a isolamento microbiológico utilizando-se água peptonada e ágar MacConkey. As colônias foram selecionadas de acordo com suas características morfológicas nas placas, submetidas à tipificação bioquímica para identificação e ao teste de sensibilidade a antimicrobianos. Foram isoladas 61 cepas, sendo 42 de suabes cloacais e 19 de necropsias. A bactéria mais isolada foi Escherichia coli com vinte e cinco cepas, seguida por catorze Klebsiella spp., doze Enterobacter spp., sete Pantoea agglomerans, duas Serratiaspp. e uma cepa de Proteus mirabilis. As cepas apresentaram maior resistência a sulfonamidas com 55,7%, seguidas por ampicilina com 54,1% e tetraciclina com 39,3%. Além disso, o total de cepas resistentes a múltiplas drogas (RMD) foi 34 (55,7%). Portanto, conclui-se que os canários albergam enterobactérias e que as cepas apresentam alto índice de resistência a antimicrobianos, com alta frequência de cepas RMD.

Septicemia decorrente de pododermatites em canários de cor (Serinus canarius) / Septicemia resulting from bumblefoot in color canaries (Serinus canarius)

Relataram-se um surto de pododermatite e quadro septicêmico em aves de um canaril comercial. Quarenta e quatro canários de cor foram escolhidos de forma aleatória, sem distinção de sexo, idade ou cor, os quais vieram a óbito naturalmente, após terem sido afetados pela pododermatite, sem que tivessem se submetido a tratamento prévio. As aves mortas foram encaminhadas para o exame necroscópico, onde amostras de tecidos das áreas afetadas foram colhidas para exames microbiológico, micológico e histológico. Todas as aves necropsiadas apresentavam pododermatite, com inflamação em um ou mais dedos, de aspecto nodular, com ou sem presença de úlceras ou necrose. Staphylococcus aureus plasma coagulase positivo foi isolado dos pés e do fígado de todas as aves. Foi observado que todas as linhagens isoladas foram resistentes aos antimicrobianos da classe das penicilinas (penicilina G e ampicilina) e parcialmente sensíveis ou resistentes à ciprofloxacina. Apenas metade dos isolados foram sensíveis à neomicina e à estreptomicina. Problemas de saúde pública podem estar relacionados ao surgimento de animais reservatórios de cepas multirresistentes para seres humanos contactantes, como neste caso.

An outbreak of bumblefoot and septicemia was reported in birds of commercial breeding. Forty-four color canaries chosen at random, without regard to sex, age or color, which died naturally having been affected with pododermatitis and not undergoing any prior treatment were used. The dead birds were sent for necropsy in which tissue samples from affected areas were taken for microbiological, mycological and histological examination. All necropsied birds had bumblefoot, inflammation in one or more fingers, nodular, with or without the presence of ulcers and necrosis. Staphylococcus aureus plasma-coagulase positive was isolated from the liver and the feet of all birds. It was observed that all isolates were resistant to the penicillin class of antibiotics (penicillin G and ampicillin) and partially sensitive or resistant to ciprofloxacin. Only half of the isolates were sensitive to neomycin and streptomycin. Public health problems may be related to the emergence of animal reservoirs of multi-resistant strains for contacted humans, as in this case.

Ultrastructural Identification of Circovirus in the Liver of Saffron Finch (Sicalis flaveola spp. ) / Identificación Ultrastructural de circovirus en el Hígado de Canarios Venezolanos (Sicalis flaveola spp. )

Circovirus are viral agents that cause disease in avian species. The main clinical symptoms of the disease are immunosuppression and, in young birds feather disorders. In neonates, the disease is known as "black spot" and characterized by abdominal enlargement, hepatobiliar congestion and failure to thrive. Also, it wasobserved in adult infected birds with other symptoms and clinical signs, such as enteritis, sinusitis, rhinitis, tracheitis, bronchopneumonia, myocarditis, nephritis, splenitis, dyspnea, anorexia, depression leading to high mortality. In April 2008, 317 saffron finch were apprehended during an illegal commercialization and were forwarded to the Wild Animals Recovery Center of the Tiete Ecological Park. Subsequently, 101 (31.66 percent) died and 20 of these were selected and sent to the Laboratory of Electron Microscopy, Biological Institute of São Paulo, Brazil to investigate possible etiological agents. After necropsy of these animals fragments of lung, liver and small intestine were processed using negative staining and resin embedding techniques. On the transmission electron microscopy, the negative staining technique allowed observation in 20 (100 percent) samples of liver suspension, a great number of particles with morphology similar to the circovirus, spherical, non-enveloped, isometric, characterized as "complete" and "empty ", measuring between 17 and 20 nm in diameter. By the resin embedding technique, oval or rounded viral intracytoplasmatic inclusion bodies, containing viral particles disposed in paracrystalline arrays or loose arrangements were observed in ultrathin sections on the 20 (100 percent) samples of liver suspension. This is the first report on the presence of circovirus in saffron finch (Sicalis flaveola spp.).

Circovirus son agentes virales que causan enfermedad en las aves. Los principales síntomas clínicos de la enfermedad son la inmunosupresión y desórdenes en las plumas de aves jóvenes. En los recién nacidos la enfermedad se conoce como "punto negro" y se caracteriza por distensión abdominal, congestión hepatobiliar y falla en el desarrollo. También se han observado en las aves adultas infectadas, otros síntomas y signos clínicos, tales como la enteritis, sinusitis, rinitis, traqueitis, bronconeumonía, miocarditis, nefritis, esplenitis, disnea, anorexia, depresión llevando también a alta mortalidad. En abril de 2008, durante una comercialización ilegal, fueron confiscados 317 canarios venezolanos, siendo llevados al Centro de Rehabilitación de Animales Silvestres del Parque Ecológico de Tietê. Posteriormente, 101 (31,66 por ciento) aves murieron y entre éstas fueron seleccionadas 20 y enviadas al Laboratorio de Microscopía Electrónica, Instituto Biológico de São Paulo, para identificar el posible agente etiológico. Después de la necropsia, fragmentos de pulmón, hígado e intestino delgado se procesaron mediante las técnicas de tinción negativa y de inclusión en resina. A través de microscopía electrónica de transmisión, la técnica de tinción negativa permitió visualizar en las 20 muestras (100 por ciento) de suspensión del hígado, un gran número de partículas con morfología similar al circovirus, esférico, sin envoltura, isométrico, que se caracteriza como "completa" y "vacío", que miden entre 17 y 20 nm de diámetro. Mediante la técnica de cuerpos de inclusión en resina se observó en el 100 por ciento de las muestras de suspensión de hígado, cuerpos de inclusión virales intracitoplasmáticos, redondeadas u ovales, con partículas de virus dispuestos en matrices paracristalinas o sueltas en los cortes ultrafinos. Este es el primer reporte de la presencia de circovirus en canarios Venezolanos (Sicalis flaveola spp.).

Uso do cloridrato de benzidamina no tratamento de cistos de retenção de penas em canários (Serinus canarius) / Use of benzidamina HCL on feather cysts treatment in canaries (Serinus canarius) / Uso del hidrocloruro de benzidamina en el tratamiento de los quistes de plumas en canarios (serinus canarius)

Os cistos de retenção de penas surgem como nódulos envolvendo um ou vários folículos das penas e sua ocorrência é devida a má formação da pena em crescimento sob a pele. São comuns em canários, principalmente os das raças Norwich e Gloucester. As formas de tratamento preconizadas são relativamente cruentas e susceptíveis a hemorragias. Este artigo descreve a utilizaçào do anti-inflamatório não esteróide, cloridrato de benzidamina, como método adjuvante para o tratamento desta anomalia. Nos últimos três anos, foram tratados 14 canários na Policlínica da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal Fluminense (UFF) com a citada medicação, sendo esta administrada por via oral, diretamente no bico ou diluída na água de beber. As aves tratadas apresentaram maturação dos cistos, facilitando assim a remoção de seu conteúdo, sem os indesejáveis riscos de hemorragia.

Feather cysts appear as swellings involving a single or several feather follicles and are due to malformation of a developing feather under the skin. These cysts are particulary common in Norwich and Gloucester canaries. The recommended forms of treatment are relatively traumatic and may cause hemorrhages. This article describes the use of a non steroidal antiinfl amatory (benzidamina HCL) as an alternative method for the treatment of this anomaly. In the last three years, 14 canaries had been treated at the Veterinary Policlinic of the Universidade Federal Fluminense (UFF) with that drug, administered orally, directly in the beak or in the drinking water. Treated birds presented maturation of the cysts, facilitating the removal of their contents, without risks of hemorrhages.

Los quistes de las plumas aparecen como nódulosinvolucrando uno o varios folículos plumíferos, y esto se debe a una malformación en el desarrollo de la pluma debajo de la piel. Estos quistes son frecuentes en canarios, principalmente en las razas Norwich y Gloucester. Los tratamientos recomendados son relativamente cruentos y susceptibles a hemorragias. Este artículo describe la utilización de un anti-infl amatorio no esteroide (hidrocloruro de benzidamina) como método alternativo para el tratamiento de esta anomalía. En los últimos tres años, fueron tratados 14 canarios en la Policlínica de la Facultad de Veterinaria de la Universidade Federal Fluminense (UFF) con la citada medicación, la cual fue administrada oralmente, directamente en el pico o diluida en el agua de bebida. Las aves tratadas presentaron maduración de los quistes, facilitando laremoción de su contenido sin los indeseables riesgos de hemorragia.