Desenvolvimento e validação de método analí­tico indicativo de estabilidade por CLAE-DAD-CAD para besilato de anlodipino e seus produtos de degradação / Development and validation of analytical method indicative of stability by HPLC-DAD-CAD for amlodipine besylate and its degradation products

O presente estudo foi realizado com o objetivo de se desenvolver e validar uma metodologia analítica indicativa de estabilidade para separação e quantificação de anlodipino e seus produtos de degradação no medicamento besilato de anlodipino 5 mg por comprimido. Para tanto, realizou-se um estudo de degradação forçada, como forma de identificar os principais produtos de degradação, que podem vir a formar num estudo de estabilidade, bem como estabelecer possíveis rotas de degradação. Foi utilizada a técnica instrumental de separação, cromatografia a líquido (CL), com dois tipos de detectores: arranjo de diodos (DAD) e corona CAD (Detector de aerossol carregado), coluna cromatográfica Zorbax SB-Phenyl 1,8µm 4,6 x 50 mm Agilent® e fase móvel constituída por tampão pH3,0, metanol e acetonitrila sob condições de gradiente (75% de tampão pH 3,0, 15% de metanol e 10% de acetonitrila; no tempo de 10 minutos tem-se 20% de tampão pH3,0, 60% de metanol e 20% de acetonitrila; no tempo de 13 minutos tem-se 75% de tampão pH3,0, 15% de metanol e 10% de acetonitrila; e no tempo de 15 minutos tem-se 75% de tampão pH3,0, 15% de metanol e 10% de acetonitrila); fluxo de 1,0mL/min até 10 minutos; de 10,1 a 13 minutos tem-se fluxo de 0,5 mL/min; e de 13,1 a 15 minutos volta ao fluxo de 1,0 mL/min; e detecção em 238 nm. O método apresentou-se linear, preciso, exato, robusto e seletivo, e proporcionou resultados confiáveis, sem interferência de degradantes e impurezas

This study was conducted in order to develop an analytical methodology indicative of stability for separation and quantification of the antihypertensive amlodipine and its degradation products in the drug amlodipine besylate 5 mg per tablet. For this development was performed a forced degradation study, in order to identify the main degradation products that may form in a stability study, as well as establish possible degradation routes. It was used the instrumental separation technique, liquid chromatography (LC) with two types of detectors: diode array (DAD) and corona CAD (Charged Aerosol Detector), chromatographic column Zorbax SB-Phenyl 4.6 x 50 mm 1,8µm Agilent® and mobile phase of buffer pH3,0, methanol and acetonitrile under gradient conditions (75% buffer pH3,0, 15% methanol and 10% acetonitrile; 10 minutes has 20% buffer pH3,0, 60% methanol and 20% acetonitrile; 13 minutes has become 75% of buffer pH3,0, 15% methanol and 10% acetonitrile; and 15 minutes has become 75% of buffer pH3,0, 15% methanol and 10% acetonitrile); flow 1.0 mL/ min up to 10 minutes; a flow 0,5 mL/min is obtained from 10,1 to 13 minutes; and from 13,1 minutes the flows returns to 1,0 mL/min; and detection in 238 nm. The method is linear, precise, accurate, robust and selective, and provided reliable results without interference from degradation products and impurities

Métodos indicativos de estabilidade para determinação do besilato de anlodipino, nifedipino e nimodipino considerados inibidores do canal de cálcio / Determination of calcium channel blockers amlodipine besylate, nifedipine and nimodipine by stability assays

A hipertensão é uma doença crônica não transmissível e mais freqüente na população sendo o principal fator de risco para complicações cardiovasculares, tais como acidente vascular cerebral e infarto agudo do miocárdio. Na presente pesquisa estão sendo estudados os fármacos utilizados no tratamento da hipertensão mais especificamente, os bloqueadores do canal de cálcio do grupo diidropiridínicos: besilato de anlodipino, nifedipino e nimodipino. O objetivo desse trabalho foi verificar a estabilidade intrínseca dos fármacos besilato de anlodipino, nifedipino e nimodipino, para isto foram utilizadas as seguintes técnicas: testes indicativos de estabilidade utilizando as técnicas de espectrofotometria na região do Ultravioleta/Visível (UV/VIS) e Cromatografia em fase Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Termogravimetria/ Termogravimetria Derivada (TG/DTG), Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC), Difração de Raios X (DRX), Espectroscopia de absorção na região do Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Para o fármaco besilato de anlodipino (AB) pelo método de degradação forçada, analisado por espectrofotometria no UV/VIS, as condições para a análise espectrofotométrica foram metanol e água a uma proporção de (5:45 v/v) e a segunda diluição com água. A leitura foi efetuada a 364,4nm. A linearidade foi estabelecida na faixa de 40,0-65,0 µg/mL e o coeficiente de correlação foi (r) 0,9992. O método cromatográfico, mostrou o diferente comportamento das substâncias nifedipino e nimodipino diante dos meios básicos, ácido, neutro e oxidativo. As condições para a substância nifedipino foram coluna LiChrospher®100 RP-18 (5µm) Merck® fase móvel constituída por metanol e água (45:55v/v), fluxo 1.0 mL/min, tempo de retenção 5,1min, detecção UV a 234nm e vazão de 1.0 mL/min. Foi obtida uma linearidade no intervalo de 5.0-55.0 µg/mL coeficiente de correlação (r) =0,9964. E para a substância nimodipino foram coluna LiChrospher®100 RP-18 (5µm) Merck® fase móvel constituída por acetonitrila e água (55:45v/v), fluxo 1.0mL/min, tempo de retenção 5,8 min, detecção UV a 235 nm e vazão de 1.0mL/min. Foi obtida uma linearidade no intervalo de 5.0-55.0 µg/mL coeficiente de correlação (r) =0,9964. Os resultados obtidos das curvas TG/DTG e DSC mostraram o perfil da decomposição térmica das substâncias estudadas pela Calorimetria Exploratória Diferencial. A análise dos resultados de DRX e DSC mostraram que não há evidências de polimorfismo nessas substâncias. No entanto nas análises de Espectroscopia de absorção na região do infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR) não foram encontradas diferenças significativas na matéria-prima e no padrão de referência. As análises de MEV permitiram observar a cristalinidade das substâncias estudadas

Hypertension is the most frequent non-communicable chronic disease in the population being the main factor of risk for cardiovascular complications, such as stroke and acute myocardial infarction. In this work, active pharmaceutical ingredients used to treat hypertension were studied, more specifically the blockers calcium channel dihydropyridine group: amlodipine besylate, nifedipine and nimodipine. The aim of this study was to determine the intrinsic stability of amlodipine besylate, nifedipine and nimodipine. For this purpose the following stability test techniques were used: UV/VIS spectrophotometry and chromatography Net phase High Performance. Thermogravimetry/Derivative Thermogravimetry (TG/ DTG), Differential Scanning Calorimetry (DSC), X-Ray Diffraction (XRD), Fourier Transformed Infrared absorption (FTIR) and Scanning Electron Microscopy (MEV). For drug amlodipine besylate (AB) by forced degradation method analyzed by spectrophotometry UV/VIS spectrophotometric conditions for the analysis were methanol and water at a ratio (5:45v/v) and the second dilution with water. The reading was made at 364,4nm. The linearity was established in the range of 40.0 to 65.0 mg/mL and the correlation coefficient was (r) 0.9992. The chromatographic method showed different behavior of nifedipine and nimodipine substances on the basic means, acid, neutral and oxidative. The conditions for nifedipine were LiChrospher®100 RP-18 column (5µm) Merck® mobile phase consisting of methanol and water (45:55v/v), flow 1.0 mL/min, retention time 5,1min, UV detection at 234 nm and flow of 1.0 mL/min. Linearity was obtained within the range of 5.0-55.0 mg/mL correlation coefficient (r) = 0.9964. And for nimodipine the parameters were: LiChrospher®100 RP-18 column (5µm) Merck® mobile phase consisted of acetonitrile: water (55:45v/v), flow 1.0 mL/min, retention time 5,8min, UV detection at 235nm and flow of 1.0 mL/min. The linearity was obtained within the range of 5.0- 55.0 mg/mL correlation coefficient (r) = 0.9964. The results of TG/DTG and DSC curves presented the profile of the thermal decomposition of the substances studied by DSC. The results of XRD and DSC presented no evidence of polymorphism in these analyzes, however, according to analyzes of absorption spectroscopy in the infrared (FTIR) there were no significant differences in the raw materials and standard reference. SEM analyzes allowed to observe the crystallinity of the studied substances

Simultaneous estimation of rosuvastatin and amlodipine in pharmaceutical formulations using stability indicating HPLC method

A viable cost-effective and isocratic approach employing C-18 column (250 mm × 4.6 mm, 5 µm) based HPLC has been utilized to separate and estimate the drugs, rosuvastatin, amlodipine and their stress induced degradation products, simultaneously in pharmaceutical formulations. Focused on ICH guideline parameters, the efficient separation of both drugs and their degradation products was achieved by optimizing a 30:70 (v/v) solvent mixture of acetonitrile and 0.1 M ammonium acetate buffer (pH 5) as mobile phase. The flow rate of the mobile phase was 1.5 mL/min and all the detections were carried out at 240 nm using UV detector. The method was linear in the concentration range of 1-200 µg/mL for rosuvastatin with 0.996 coefficient of determination value. For amlodipine, linearity was in the range of 0.5-100 µg/ml with 0.994 coefficient of determination value. Both the drugs along with their degradation products were separated in less than twenty minutes. The results of within-day and between-day precision were varied from 0.72 to 1.81% for rosuvastatin and 0.83 to 1.88% for amlodipine. The results show that this ICH validated method can be employed successfully for the routine as well as stability quantification of both the active ingredients simultaneously in pharmaceutical formulations.

Utilizou-se abordagem de viabilidade custo-efetividade e isocrática, baseada em CLAE, empregando coluna C-18 (250 mm x 4,6 mm, 5 µm) para separar e avaliar os fármacos, rosuvastatina, anlodipino e seus produtos de degradação induzida por estresse, simultaneamente, em formulações farmacêuticas. Focada nos parâmetros das diretrizes da ICH, a separação eficiente de ambos os fármacos e de seus produtos de degradação foi obtida por meio da otimização da fase móvel com mistura de solventes 30:70 (v/v), respectivamente, acetonitrila e tampão acetato de amônio O,1 M (pH 5). A velocidade de fluxo da fase móvel foi de 1,5 mL/min e todas as detecções foram realizadas em 240 nm, utilizando detector de UV. O método foi linear no intervalo de concentração de 1-200 µg/mL para a rosuvastatina com coeficiente de determinação 0,996. Para o anlodipino, a linearidade ficou na faixa de 0.5-100 µg/mL, com coeficiente de determinação 0,994. Ambos os fármacos, junto com seus produtos de degradação, foram separados em menos de vinte minutos. Os resultados de precisão intra-dia e inter-dia variaram de 0,72 a 1,81% para a rosuvastatina e de 0,83 a 1,88%, para o anlodipino. Os resultados mostram que este método validado pelo ICH pode ser empregado com sucesso tanto para a rotina quanto para a quantificação simultânea da estabilidade de ambos os ingredientes ativos em formulações farmacêuticas.

Spectrofluorimetric determination of amlodipine in human plasma without derivatization

A rapid and sensitive spectrofluorimetric method was developed for the determination of amlodipine (AD), a calcium channel blocker, in the plasma. The type of solvent, the wavelength range, and the range of AD concentration were selected to optimize the experimental conditions. The calibration curves were linear (r² >0.997) in the concentration range of 0.1-12.5 ppm of AD. The limit of quantitation and limit of detection values for the method for plasma samples were 0.1 ppm and 0.07 ppm, respectively. The precision calculated as the relative standard deviation was less than 3.5%, and the accuracy (relative error) was better than 5.5% (n=6). The method developed in this study can be directly and easily applied for the determination of AD in the plasma without derivatization in plasma.

Método espectrofluorometrico rápido e sensível é descrito para a determinação de anlodipina (AD), um bloqueador de canais de cálcio, em amostras de plasma. O tipo de solvente, a faixa de comprimento de onda e a faixa de concentração foram escolhidas a fim de otimizar as condições experimentais. As curvas de calibração foram lineares (r > 0,997) na faixa de concentração de 0,1-12,5 ppm de AD. Os valores LoQ e LoD do método para amostras de plasma foram 0,1 ppm e 0,07 ppm, respectivamente. A precisão calculada como desvio padrão relativo (RSD) foi menor do que 3,5% e a precisão (erro relativo) foi melhor do que 5,5% (n=6). O método desenvolvido neste estudo pode ser fácil e diretamente aplicado para a determinação de AD sem derivatização no plasma.

Desenvolvimento de teste de dissolução e estudo comparativo de comprimidos e cápsulas magistrais contendo anlodipino / Development of dissolution test and comparative study of tablets and compounded capsules containing amlodipine

O anlodipino é um fármaco amplamente utilizado para o tratamento da hipertensão arterial e da angina, e encontra-se disponível, no mercado brasileiro, sob a forma de comprimidos e cápsulas magistrais.O presente estudo objetivou desenvolver as condições para o teste de dissolução, bem como realizar estudo comparativo visando avaliar a intercambiabilidade de alguns produtos contendo o fármaco por meio de testes físicos e físico-químicos, tais como:variação de peso, desintegração, dureza, friabilidade, identificação, teor, uniformidade de conteúdo, teste e perfil de dissolução.No desenvolvimento do método de dissolução, diversas condições foram testadas e os seguintes parâmetros foram considerados satisfatórios:ácido clorídrico 0,01N (500 mL, a 37graus C mais ou menos 0,5 graus C) como meio de dissolução, aparato cesta e pá, respectivamente para cápsulas e comprimidos, e rotação de 50 rpm.Realizou-se estudo comparativo de cápsulas manipuladas por cinco diferentes farmácias, denominadas de A, B, C, D e E;bem como de comprimidos obtidos de cinco laboratórios produtores diferentes, denominados de F, G, H, I e J. Os produtos B (cápsula) e H (comprimido) foram reprovados nos teste de uniformidade de conteúdo e dureza, respectivamente.Todos os demais produtos apresentaram resultados satisfatórios nos testes a que foram submetidos.

Fluorometric determination of amiodarone. amlodipine and propafenone

Three fluorimetric methods have been developed for the determination of some cardiovascular drugs. Amiodarone hydrochloride in 0.1 N sulphuric acid showed native fluorescence with excitation at 270 nm and emission at 540 nm. Methanolic solution of amlodipine besylate exhibits maximum excitation and emission at 365 nm and 450 nm, respectively. Propafenone hydrochloride forms fluorescent ion-pair with eosine at pH 5, which is extractable in chloroform, the excitation and emission at 318 nm and 550 nm, respectively. Linearity is obtained upon determining authentic samples in concentration range of 40 - 200 mug/ml, 0.4-2.8 mug/ml and 7-24.5 mug/ml for amiodarone, amlodipine and propafenone, respectively. The precision of the proposed method is checked by analyzing different samples of bulk powder and mean percentage recoveries are 100.26 +/- 1, 99.83 +/- 1.03 and 100.2 +/- 0.91 for amiodarone, amlodipine and propafenone, respectively. The pharmaceutical formulations are also estimated applying the proposed fluorimetric methods using st and ard addition technique, showing accurate results having great agreement with those of the reference methods