Expression of the VP3-VP1 sequence of foot-and-mouth disease virus in Escherichia coli

1. cDNA recombinants containing the VP3 and VP1 sequences of foot-and-mouth disease virus were isolated and the VP3-VP1 sequence was reconstructed. 2. The reconstructed VP3-VP1 sequence was subcloned into expression vector pEX31b and a fusion protein of about 62,000 Da was expressed. 3. When injected into mice, the fusion protein was able to elicit the production of antibodies that recognized viral VP1 and VP3. 4. Antibodies present in sera from mice immunized with VP3-VP1 protein did not neutralize the foot-and-mouth disease virus in vitro

Respuesta inmune en ratones inducida por diferentes dosis del virus de la fiebre aftosa / Immune response in mice induced by different doses of foot-and-mouth disease virus

Se estimó en ratones lactantes hijos de madres vacunadas y en ellas mismas, la respuesta inmune inducida por distintas dosis de inmunógeno del virus de la Fiebre Aftosa tipo 0 1 Campos. Las dosis fueron desde 0,05 hasta 30*g, equivaleiendo esta última aproximadamente a 1 *g por g de peso vivo promedio. La dosis menor protegió al 30,5% de las crias, las restantes confirieron 100% de proteción. Los índices seroneutralizantes de las madres, 45 días post-vacunación, oscilaron entre 3,60 y 4,86 para las dosis de 0,05 a 0,10 *g y entre 4,86 y 5,50 para las demás. Pese a las altas dosis de inmunógeno administradas y haber sido éstas adyuvadas con gel de hidróxido de aluminio, no se registraron alteraciones que indicaran un efecto adverso sobre la respuesta del sistema inmune

Uso de la células de sarcoma 180 TG para la obtención de fluídos ascíticos hiperinmunes de ratón para virus aftoso / Use of Sarcoma 180 TG cells in the obtention of ascitic fluid of mice hyperimmune to foot-and-mouth disease virus

Ratones inmunizados con antígeno 140 S de Aftovirus tipo C3 Arg84 fueron inoculados con Sarcoma 180 TG. Los líquidos ascíticos obtenidos por punción ventral contenían niveles de anticuerpos semejantes a los alcanzados por los sueros, según fueron determinados por las técnicas de seronertralización y ELISA; siendo sus volúmenes de 10 a 20 veces mayores que los correspondientes sueros sanguíneos

Respuesta inmune celular contra el virus de la fiebre aftosa en el bovino: efecto de la vacunación / Cellular immune response against foot-and-mouth disease virus in cattle: effect of vaccination

Se estudiaron 55 bovinos divididos en 3 gruposÑ C, controles no vacunadosñ HS, inmunizados con vacuna hidroxi-saponinada; y EO, inyectados con vacuna oleosa, que se trasladaron y se desafiaron con el virus de la fiebre aftosa (VFA). Se sangraron antes y 7 días después del desafío, y se contaron los leucocitos y subpoblaciones linfocitarias. Todos mostraron marcada neutropenia y eosinofilia, significativamente mayor en el grupo HS que en los grupos C y EO; ambos parámetros mejoraron significativamente en la 2§ sangría. El número total de linfocitos era normal. Las proporción de células B fue normal y no varió en los animales enfermos. Se estudió un grupo de animales antes y despues de la vacunación y viaje: los valores previos fueron normales y significativamente diferentes de los posteriores. Se postula que el stress y la saponina causaron la alteración. Para estudiar la respuesta inmune celular se usó, en los mismos grupos de animales, cultivo de linfocitos periféricos e inhibición de la migración leucocitaria (IML) frente a estimulantes inespecífico (ConA) y específicos (VFA purificado e inactivado de tipos O, A y C). Con ambas técnicas, todos los animales, inclusive los enfermos (C, 2§ sangría) respondieron bien a la ConA y dos animales que enfermaron y curaron respondieron bien al VFA durante 4 meses. Las respuestas al VFA, en C y en vacunados no protegidos, fueron negativas; entre los vacunados protegidos, 2/12 fueron positivos en cultivo y 4/6 en IML. Los resultados indican que...

Neutralización del virus de la fiebre aftosa O1 Campos por anticuerpos inducidos por un péptido sintético / Neutraliztion of fost-and-mouth diseases virus O1 Campos by antibodies induced by synthetic peptide

Un hexadecapéptido correspondiente a la secuencia 144-159 de la proteína estructural VP1 del virus de la fiebre aftosa (CFA), cepa O1K, fue sintetizado por métodos químicos. El mismo, acoplado covalentemente a distintas proteínas portadoras, demostró su capacidad de inducir anticuerpos neutralizantes del VFA cepa O1 Campos (O1Ca) en ratones adultos. La protección fue del 100% cuando se lo acopló a la hemocianina de un molusco (KLH) y fue inoculado en cantidad de 60 microng, dividida en dos dosis y adyuvada con mezcla oleosa. Las proteínas utilizadas como portadoras: albúmina bovina, purificado proteico de Mycobacterium (PPD), gliadina y células de Brocelas produjeron una respuesta inmune menor que la KLH

Aplicaçäo de uma técnica de ELISA ("Enzyme-linked immunosorbent assay") no diagnóstico direto do vírus da febre aftosa / Use of a technic ELISA-Enzyme-linked immunosorbent assay in the direct diagnosis of fost-and-mouth disease virus

O método do "Sandwich indireto" do ELISA ("Enzyme-Linked Immunosorbent Assay"), foi nesse trabalho empregado com vantagens para detecçäo e tipificaçäo direta dos sorotipos O1, A24, AVenceslau e C3 do vírus da febre aftosa presentes em suspensöes antigênicas brutas provenientes de cultura celular, do epitélio de coxim plantar de cobaias, de carcaça de camundongos e de epitélio lingual bovino, infectados com essas estirpes virais. Os títulos obtidos no ELISA foram sempre superiores aos da reaçäo de fixaçäo de complemento, apresentando uma sensibilidade 3,8 a 80 vezes maior do que esta última reaçäo. Quanto à especificidade do ensaio imunoenzimático foi observado o desenvolvimento de reaçöes heterotípicas cruzadas principalmente da estirpe O1 com o anti-soro anti-C3, da estirpe A24 com o anti-O1, e anti-C3, da estirpe AVenceslau com anti-O1 e da estirpe C3 com o anti-O1, o que näo ocorreu na reaçäo de fixaçäo de complemento. No entanto, isto näo impediu que as 4 estirpes virais estudadas (O1, A24, AVenceslau e C3) fossem classificadas pelo ELISA em seus respectivos sorotipos