Bone morphogenetic protein-6 (BMP-6) induces atresia in goat primordial follicles cultured in vitro / A proteína morfogenética óssea-6 (BMP-6) induz a atresia em folículos primordiais caprinos cultivados in vitro

This study investigated the effects of bone morphogenetic protein 6 (BMP-6) on in vitro primordial follicle development in goats. Samples of goat ovarian cortex were cultured in vitro for 1 or 7 days in Minimum Essential Medium (control medium) supplemented with different concentrations of BMP-6. Follicle survival, activation and growth were evaluated through histology and transmission electron microscopy (TEM). After 7 days of culture, histological analysis demonstrated that BMP-6 enhanced the percentages of atretic primordial follicles when compared to fresh control (day 0). Nevertheless, BMP-6 increased follicular and oocyte diameter during both culture periods. As the culture period progressed from day 1 to day 7, a significant increase in follicle diameter was observed with 1 or 50ng/ml BMP-6. However, on the contrary to that observed with the control medium TEM revealed that follicles cultured for up to 7 days with 1 or 50ng/ml BMP-6 had evident signs of atresia. In conclusion, this study demonstrated that BMP-6 negatively affects the survival and ultrastructure of goat primordial follicles.

O presente estudo investigou os efeitos da proteína morfogenética óssea-6 (BMP-6) no desenvolvimento in vitro de folículos primordiais caprinos. Amostras de córtex ovariano de cabras foram cultivados por 1 ou 7 dias em Meio Essencial Mínimo (meio controle) suplementado com diferentes concentrações de BMP-6. As taxas de sobrevivência, ativação e crescimento foram avaliadas por histologia clássica e microscopia eletrônica de transmissão (MET). Após 7 dias de cultivo, a análise histológica demonstrou que a BMP-6 aumentou o percentual de folículos primordiais degenerados no dia 7 quando comparados ao controle fresco (D0). Além disso, houve um aumento significativo do diâmetro folicular e oocitário em ambos os períodos de cultivo em todos os tratamentos na presença de BMP-6. Com a progressão do cultivo do dia 1 para o dia 7, nos tratamentos com 1 ou 50ng/ml de BMP-6, foi observado um aumento significativo no diâmetro folicular. Entretanto, contrário ao observado no meio controle, a MET revelou que os folículos cultivados nesses tratamentos apresentavam sinais evidentes de atresia. Em conclusão, esse estudo demonstrou que a BMP-6 afeta negativamente a sobrevivência e a ultra-estrutura de folículos primordiais caprinos.

Effect of bovine bone morphogenetic proteins on radius fracture healing in rabbits / Efeito de proteínas morfogenéticas ósseas de origem bovina na consolidação de fraturas induzidas no rádio de coelhos

PURPOSE: To investigate the effect of bovine bone morphogenetic proteins (bBMPs) bound to hydroxyapatite plus collagen in the healing of unstable radius fractures. METHODS: A transverse fracture was induced at the mid of the diaphysis in both radii on 15 Norfolk rabbits with average age of 5.5 months and 3.5kg. A mixture of bBMPs bound to thin powdered hydroxyapatite (bBMP-HA) and bovine collagen as agglutinant was applied to the right radius fracture site. The left radius fracture was considered control and no treatment was used. After 30, 60 and 90 days (5 rabbits/period) the rabbits were euthanized and the radii were collected for histological analysis. RESULTS: The descriptive histological analysis revealed that repair was similar for both forelimbs. The histomorphometric analysis showed that the mean area of newly formed bone was 867442.16 mm², 938743.00 mm² and 779621.06 mm² for the control forelimbs, and 841118.47 mm², 788038.76mm² and 618587.24 mm² for the treated forelimbs at 30, 60 and 90 days, respectively. Thus the newly formed bone area was 12.17 percent larger in the forelimbs treated with bBMP-HA/collagen than in the control forelimbs (p<0.05, Tukey test) in the 60-day period after surgery. In both forelimbs the newly formed bone area increased throughout the experimental period until the complete fracture healing. CONCLUSION: Based on the result obtained here we concluded that bBMP-HA/collagen induced a lower but significant improvement in fracture consolidation.

OBJETIVO: Investigar a influência de Proteínas Morfogenéticas Osseas de origem bovina (bBMPs) ligadas a hidroxiapatita mais colágeno na consolidação de fraturas instáveis do rádio. MÉTODOS: Em 15 coelhos com aproximadamente 5,5 meses de idade e peso médio de 3,5kg foi realizada uma fratura transversa na porção média da diáfise do rádio de ambos os membros. Na fratura do rádio direito foi aplicada mistura de bBMPs ligadas à hidroxiapatita (bBMP-HA) e colágeno bovino como aglutinante e na do rádio esquerdo, considerada controle, nenhum tratamento foi usado. Os coelhos (cinco por período) foram submetidos à eutanásia aos 30, 60 e 90 dias após a cirurgia para realização do processamento histológico e análise microscópica. RESULTADOS: A análise histológica descritiva revelou que a consolidação foi similar para os membros tratado e controle. Pela análise histomorfométrica, a área de novo osso foi em média 867442,16 mm², 938743.00 mm² e 779621,06 mm² para os membros controles e 841118,47 mm², 788038,76mm² e 618587,24 mm² para os membros tratados, aos 30, 60 e 90 dias, respectivamente. Desta forma, aos 60 dias de pós-operatório a área de novo osso foi 12.17 por cento maior no membro tratado com bBMP-HA/colágeno em relação ao membro controle (p<0.05, teste de Tukey). Em ambos os membros a área de novo osso aumentou durante o período experimental até a total consolidação da fratura. CONCLUSÃO: Baseado nos resultados obtidos foi possível concluir que a mistura de bBMP-HA/colágeno induziu pequena, porém significante melhora na consolidação da fratura.

Estudo comparativo entre as osteossínteses com placas e osteossínteses com placas associadas a enxertos de proteína morfogenética óssea (Gen-Tech®) em fraturas distais de rádio-ulna em cães com menos de 6 quilos / A comparative study of osteosynthesis with plates and plates associated with grafts of bone morphogenic proteins (Gen-Tech®) in distal radio-ulna fractures in dogs with less than 6 quilograms

Sabe-se que Bone morphogenic proteins (BMP) são promotores de osteogênese, mas pesquisas ainda estão sendo feitas no intuito de descobrir sua atuação clínica na reparação de fraturas. As dificuldades inerentes da reparação de fraturas de rádio-ulna de cães abaixo de 6 quilos são conhecidas, principalmente, com a ocorrência freqüente de não-união óssea devido a pouca vascularização da porção distal do radio. Tendo em vista esta realidade objetivou-se a comparação da velocidade de formação de calo ósseo entre o tratamento com placas e parafusos e tratamento com placas e parafusos associados a BMP. Foram realizadas 33 osteossinteses de regiões distais de rádio-ulna de cães, sendo 17 animais do grupo controle (tratamento com placas e parafusos) e 16 animais do grupo BMP (tratamento com placas e parafusos com adição de proteína morfogenética óssea BMP). Avaliou-se, comparativa-mente, o tempo de formação de calo ósseo, por exames radiográficos, aos 30, 60, 90,120, 180 e 210 dias de pós-operatório. Foi encontrada a média de tempo de cicatrização de 127,5 +/- 34,15 dias no grupo controle e, no grupo tratado com a proteína morfogenética óssea, a média foi de 32 +/- 15 dias. Com isto pode-se concluir que as fraturas distais de rádio e ulna, em cães menos de 6 kg, tratadas com proteína morfogenética óssea sofreram redução significativa do tempo de formação de calo ósseo.

It is well known that bone morphogenic proteins (BMP) cause osteogenesis, yet clinical research must be performed in order to really show their benefits. Animals weighing less than 6 kg show well known difficulties regarding radius and ulna fracture repair mainly with bone non-union, due to poor vascularization of the distal portion of the radius. Therefore this study aimed to compare the velocity of bone callus formation in the treatment of fracture repair with plates and screws alone or with plates and screws plus BMP. Thirty three dogs with radius and ulna fractures were distributed into two groups, where animals of the control group received the conservative treatment performed with screws and plates alone, whilst the other group received the conservative treatment and BMP. The time of bone callus formation was evaluated comparatively through radiographic exams 30, 60, 90, 120, 180 and 210 days after the surgical procedure. Animals treated with BMP showed a healing time of 32±15 days, which was significantly different (p <0.001) from the control group which required 127±34 days. With the results obtained, it can be concluded that the distal radio-ulna fractures of dogs weighing less than 6 kg suffered a significant reduction of the bone callus formation time, which was around 90 days.

Comparação de osteossíntese com placa e osteossíntese com placa associada a enxerto de proteína morfogenética óssea em fratura bilateral distal de rádio e ulna em cão: relato de caso / Comparison between bone plate osteosinthesis and bone plate associated to bone morphogenetic protein in a bilateral distal fracture of radius and ulna in a dog: case report

Os cuidados e dificuldades em reparação de fraturas de rádio-ulna de cães de porte pequeno são conhecidos, com a ocorrência freqüente de não-união óssea, principalmente no que tange as fraturas distais, relacionadas a características anatômicas inerentes, como pouco recobrimento de tecido muscular, canal medular de diâmetro reduzido, e pouca vascularização. Tendo em vista esta realidade, descreve-se a comparação entre o tratamento com placa e parafuso e placa e parafuso com adição de proteína morfogenética óssea em fratura completa transversa de terço distal bilateral de rádio-ulna, de semelhante apresentação em cão da raça Pinscher, atendido no Serviço de Cirurgia de Pequenos Animais do HOVET / USP. Avaliou-se, comparativamente, o tempo de formação de calo ósseo, por exames radiográficos, aos 30, 60, 90 e 120 dias de pós-operatório, onde foi encontrado tempo de cicatrização de 90 dias no membro controle enquanto que, no membro tratado com a proteína morfogenética óssea, o tempo de cicatrização foi de 30 dias, demonstrando a possibilidade de incremento que o uso de fatores de crescimento podem trazer ao tratamento de fraturas em cães de pequeno porte.

The aims and difficuIties in small breed dogs radius and ulna fracture repair are known, frequently occurring cases of nonunionn principally in distal part of these bones, by their inherent anatomical characteristics, as poor muscular recovering, small medullar channel and less vascular aport, that are the principal causes of complication in post surgical or conservative procedures. By this reallty, the comparison between treatment with bone plate and screws, with and without addition of bone morphogenetic protein (BMP), in distal fracture of radius and ulna in a Doberman Pinscher, cared in HOVET surgical area is described. It was evaluated the bone callus formation, by radiographic examination in 30th ,60th ,90th and 120th day of surgical procedure, being visualized total consolidation after 90 days in the control member and after 30 days in the BMP member, showing all the beneficial possibilities of the BMP use in cases of distal fractures in small breed dogs.

Engenharia de tecido em odontologia / Tissue engineering in dentistry

Uma das atuações da biotecnologia conteporânea é na "Engenharia de tecido", uma atividade multidisciplinar que tem como proposta a formação biológica de tecido funcional. A matriz do osso contém proteínas capazes de auto-indução através da diferenciação celular, denominadas proteínas morfogeneticas do osso (BMPs). A indução e produção biologica de osteodentina e/ou dentina pela ação das BMPs tem sido demonstrado no tecido pulpar de animais que sofreram pulpotomias. A proposta inicial deste relato é de observar "in vivo" as reações álgicas, sinais de alterações patológicas e a possibilidade de detectar radiograficamente os efeitos indutivos de dentina reparativa com o uso da BMP-2 recombinante humano em arcabouço de ácido poliláctico/poliglicolítico e de colagéno desenvolvidos pela KÜNZEL BIOMATERALS sobre a polpa de dentes decíduos humanos. Após dez meses de acompanhamento não foi observado sintomatologia ou qualquer sinal clínico/radiográfico de patologia