Evidence of cytogenetic and histological damage in specimens of Astyanax lacustris (Pisces, Characidae) exposed to the hydrogen cyanide-based herbicide Dormex®

The herbicide Dormex®, a solution of hydrogen cyanamide, is a growth regulator capable of breaking the dormancy of fruit plants, and is commonly applied in agriculture. However, the biological effects of this product on non-target organisms are unknown. The present study investigated the biological response of Astyanax lacustris (Lütken, 1875) specimens exposed to Dormex® using a chromosome aberration test, the mitotic index, and the histological analysis of the gills. Forty specimens of Astyanax lacustris were obtained from a local breeding facility and divided into 10 groups (nine experimental and one control) with four fish in each aquarium (group). The control group was maintained for 24 hours in dechlorinated water while the experimental groups were allocated to one of nine different treatments, with three concentrations of Dormex®, 0.05, 0.1 and 0.5 mL L-1, and exposure for 24, 48 and 72 hours. The fish exposed to Dormex® presented chromosomal aberrations of a number of types, including chromosomal breaks, acentric fragments, decondensation, and gaps at the three Dormex® concentrations, at all exposure times. The mitotic index decreased significantly in comparison with the control group. The histological preparations of the gills revealed alterations such as hyperplasia, and lamellar fusion and edema, whereas in the control group the structure of the gills was preserved. The cytogenetic analysis revealed the genotoxic potential of the herbicide Dormex® and the morphological alterations of the gills demonstrated the sensitivity of the fish, which responded rapidly to the stressor. These findings reinforce the need for special care and restrictions on the use of these herbicides in agricultural areas located near aquatic environments.

A new miniature species of Priocharax (Characiformes: Characidae) from the upper rio Ipixuna, Purus drainage, Brazil

A new species of miniature fish of the characid genus Priocharax is described from a small lake near the rio Ipixuna, rio Purus drainage, Amazonas State, Brazil. It is distinguished from all congeners except P. pygmaeus by the lower number of teeth on the maxilla and dentary. It differs from P. pygmaeus by the presence of two postcleithra and 22-27 branched anal-fin rays (vs absence and 19-22). The new species is further distinguished from other species of Priocharax by a combination of characters involving the number of pelvic-fin rays and branched anal-fin rays, the number of postcleithra, the shape of postcleithrum 3, and the absence of the claustrum. Molecular evidence based on COI sequences of all valid species of Priocharax also corroborates the validity of this new species.(AU)

Uma nova espécie de peixe miniatura do gênero de caracídeo Priocharax é descrita de um pequeno lago próximo ao rio Ipixuna, drenagem do rio Purus, estados do Amazonas, Brasil. Ela difere de todas as congêneres, exceto P. pygmaeus pelo menor número de dentes no maxilar e dentário. Distingue-se de P. pygmaeus pela presença de dois pós-cleitros e 22-27 raios ramificados na nadadeira anal (vs ausência e 19-22). A nova espécie também difere de outras congêneres por uma combinação de caracteres como número de raios das nadadeiras pélvica e anal, número de pós-cleitros e formato do pós-cleitro 3, e ausência de claustrum. Evidências moleculares com base em sequências do gene COI de todas as espécies válidas também corrobora a validade da nova espécie.(AU)

Seminal characteristics and sensitivity of Astyanax lacustris (Characiformes: Characidae) sperm to cryoprotective solutions based on dimethylsufoxide and methylglicol

This study aimed to determine the semen characteristics of Astyanax lacustris after hormonal induction and to evaluate the sensitivity of the species sperm to cryoprotective solutions based on the cryoprotectants dimethyl sulfoxide and methyl glycol. Volume, color, sperm concentration, total motility and aspects of sperm movement were analyzed using "Integrated Semen Analysis System". Three different extenders were tested: A) glucose 5%+egg yolk 10%, B) BTS®5% and C) glucose 5% and two permeable cryoprotectants: dimethyl sulfoxide (Me2SO) and methyl glycol (MTG). Fresh A. lacustris semen presented total motility of 76.6±11.2%, motility duration of 33.0±2.2s, sperm concentration of 7.22±3.2×109sptz/mL and seminal osmolality of 219±0.03mOsm/kg-1. The toxicity test showed the highest total motility values at the MTG15%+A, Me2SO15%+B and Me2SO10%+C dilutions, and the Me2SO10%+C and Me2SO15%+C dilutions presented the highest values for curvilinear velocity, linear velocity and average velocity. The tested protocol was not effective at maintaining the viability of A. lacustris semen after freezing because no motility was observed in any of the dilutions. However, the Comet Assay demonstrated that cryoprotectant solutions were effective in protecting the genetic material of cells, as DNA damage levels were low, with no difference between control and Me2SO10% + A, dilutions MTG10%+C, Me2SO10%+B and Me2SO15%+B.(AU)

O objetivo deste estudo foi determinar as características do sêmen de Astyanax lacustris após indução hormonal e avaliar a sensibilidade dos espermatozoides da espécie a soluções crioprotetoras baseadas nos crioprotetores dimetilsulfóxido e metilglicol. Volume, cor, concentração espermática, motilidade total e aspectos do movimento espermático foram analisados usando o "Sistema Integrado de Análise de Sêmen (ISAS®CASA)". Três extensores diferentes foram testados: A) glicose 5%+gema de ovo 10%, B) BTS® 5% e C) glicose 5% e dois crioprotetores permeáveis: dimetilsulfóxido (Me2SO) e metilglicol (MTG). O sêmen fresco de A. lacustris apresentou motilidade total 76,6±11,2%, duração da motilidade 33,0±2,2s, concentração de espermatozoides 7,22±3,2×109sptz/mL e osmolalidade seminal 219±0,03mOsm/kg-1. O teste de toxicidade apresentou maiores valores de motilidade total nas diluições MTG15%+A, Me2SO15%+B e Me2SO10%+C, e as diluições Me2SO10%+C e Me2SO15%+C apresentaram maiores valores de velocidade curvilínea, velocidade linear e velocidade média. O protocolo testado não foi eficaz em manter a viabilidade do sêmen de A. lacustris pós-congelamento, pois não foi observada motilidade em nenhuma das diluições. No entanto, o Ensaio Cometa demonstrou que as soluções crioprotetoras eram eficazes na proteção do material genético das células, pois os níveis de dano ao DNA eram baixos, sem diferença entre controle e Me2SO10%+A, MTG10%+C, Me2SO10%+B e Me2SO15%+B.(AU)

Zygoparity in Characidae - the first case of internal fertilization in the teleost cohort Otomorpha

Most teleosts are externally fertilizing, with internal fertilization occurring as a relatively rare event. Until now, Euteleosteomorpha is the only teleost cohort known to undergo internal fertilization. In the teleost cohort Otomorpha, it has been recorded the presence of sperm in the ovaries of some species of Characiformes and Siluriformes, but no fertilized eggs have been found so far in the female reproductive tract. It has been presumed that oocytes can be released into the water with associated spermatozoa and only there becomes fertilized, and the term insemination has been used to characterize the strategy adopted by these fish. Here, we present the discovery of the first case of internal fertilization in the teleost cohort Otomorpha, in Compsura heterura (Characiformes: Characidae). In the course of spawning, the eggs form the perivitelline space and the animal and vegetative poles within the ovaries, evidencing oocyte fertilization. The newly spawned eggs then continue to form the animal and vegetative poles and increase the perivitelline space. These eggs are in the zygotic stage. These data indicate that fertilized eggs are only retained for a short period, providing evidence that C. heterura is a zygoparous fish.(AU)

A maioria dos teleósteos são espécies com fecundação externa, sendo a fecundação interna um evento relativamente raro. Até o momento, Euteleosteomorpha é a única coorte de teleósteos conhecida com espécies de fecundação interna. Na coorte de teleósteos Otomorpha, tem sido registrada a presença de esperma nos ovários de algumas espécies de Characiformes e Siluriformes, porém nenhum ovo fecundado foi encontrado até agora no trato reprodutor feminino. Presume-se que os oócitos possam ser liberados na água associados aos espermatozoides e que somente lá são fecundados, e o termo inseminação tem sido empregado para caracterizar a estratégia adotada por esses peixes. Apresentamos aqui a descoberta do primeiro caso de fecundação interna na coorte de teleósteos Otomorpha, em Compsura heterura (Characiformes: Characidae). Durante a desova, os ovos formam o espaço perivitelino e os polos animal e vegetal dentro dos ovários, evidenciando a fecundação interna. Os ovos recém-desovados continuam a formação dos polos animal e vegetal e aumentam o espaço perivitelino. Esses ovos estão na fase zigótica. Estes dados indicam que os ovos fertilizados são retidos por um curto período, fornecendo evidências de que C. heterura é um peixe zigóparo.(AU)

Genetic variability in a population of Astyanax scabripinnis: recent bottleneck and the possible influence of individuals with B chromosomes

Access the genetic variability of endangered and isolated populations has become an important conservation tool. Astyanax scabripinnis is a well-known fish model for genetic studies, forming very isolated populations in headwaters. Besides that, this species frequently presents supernumerary chromosomes, which elevates the interest on genetic studies. Genetic diversity of an Astyanax scabripinnispopulation from the Atlantic Forest (Serra da Mantiqueira region, Brazil) was assessed with microsatellite markers for the first time. Since microsatellite markers are not described for this species, we tested markers described for a related species for transferability to A. scabripinnis. Six polymorphic loci were sufficiently reliable for population genetic analysis. We found that this population passed through a recent bottleneck because of the presence of an excess of heterozygotes, low allelic diversity, heterozygosity excess, and small effective population size. Individuals with and without B chromosomes were previously identified in this population and our study found private alleles in the individuals without B chromosomes. Furthermore, when individuals without B chromosomes were removed from the analysis, the population did not present heterozygosity excess, suggesting that the bottleneck event was driven by individuals with B chromosomes. Our results provide an insight into the value of microsatellite markers as molecular tools and is the first genetic study using molecular data of A. scabripinnis from this area.

Cytogenetic markers as tools in delimiting species of the highly diverse Neotropical fish Bryconamericus (Characiformes: Characidae)

Bryconamericus is a highly diverse group of characid fishes, being cytogenetic a valuable tool for the delimitation of species. Bryconamericus aff. iheringii (Upper Uruguay/Lower Paraná), B. coeruleus (Upper Paraná), B. cf. ecai e B. cf. eigenmanni (Upper Uruguay) were studied cytogenetically, and presented 2n=52 chromosomes, with interpopulational/interspecific variation of karyotype and fundamental number. Heterochromatin was evidenced in pericentromeric, telomeric and interstitial regions, and it was shown to be an important cytogenetic marker. Single nucleolar organizing regions (NORs) were found in B. cf. eigenmanni, B. cf. ecai and B. aff. iheringii (Lower Paraná), and multiple in B. aff. iheringii (Upper Uruguay) and B. coeruleus, with occurrence of two patterns for the first species, and three for the second. The 5S/18S rDNA-FISH confirmed the location of the NORs and showed single 5S rDNA cistrons only in B. aff. iheringii (Lower Paraná), evidencing the dispersion of both genes, often co-located, in the karyotype of the others species. The data of this work contribute for the delimitation of the species of the genus. Co-localization of ribosomal genes may represent a plesiomorphic condition for the group, and their dispersion suggest the occurrence of duplication, pseudogeneization and transposition events mediated by mobile genetic elements.(AU)

Bryconamericus é um grupo altamente diverso de caracídeos, sendo a citogenética uma valiosa ferramenta para a delimitação de espécies. Bryconamericus aff. iheringii (Alto Uruguai/Baixo Paraná), B. coeruleus (Alto Paraná), B. cf. ecai e B. cf. eigenmanni (Alto Uruguai) foram estudados citogeneticamente, e apresentaram 2n=52 cromossomos, com variação interpopulacional/interespecífica de cariótipo e número fundamental (NF). Heterocromatinas foram evidenciadas nas regiões pericentromérica, telomérica e intersticial, e mostrou-se um importante marcador citogenético. Regiões organizadores de nuclcéolos (RONs) simples foram encontradas em B. cf. eigenmanni, B. cf. ecai e B. aff. iheringii (Baixo Paraná), e múltiplas em B. aff. iheringii (Alto Uruguai) e em B. coeruleus, com a ocorrência de dois padrões de localização para a primeira espécie, e três para a segunda. A FISH-DNAr 5S/18S confirmou a localização das RONs e mostrou cístrons simples de DNAr 5S apenas em B. aff. iheringii (Baixo Paraná), evidenciando a dispersão de ambos os genes, muitas vezes co-localizados, no cariótipo das demais espécies. Os dados deste trabalho contribuem para a delimitação das espécies do gênero. A co-localização dos genes ribossomais pode representar uma condição plesiomórfica para o grupo, e sua dispersão sugere a ocorrência de eventos de duplicação, pseudogenização e transposição mediada por elementos genéticos móveis.(AU)

Redescription of Hyphessobrycon itaparicensis, a senior synonym of H. sergipanus (Characiformes: Characidae)

Hyphessobrycon itaparicensis was originally described from a small stream in the Itaparica coastal island, Bahia State, Brazil, and has been sampled in several coastal rivers draining Bahia and Sergipe States. Broad examination of type material and recently collected specimens resulted in the redescription provided herein. The presence of one humeral blotch, absence of pseudotympanum, and conservation aspects of H. itaparicensis are briefly discussed. Data obtained from the original description, paratypes and topotypes of H. sergipanus showed broad overlap with H. itaparicensis and absence of morphological diagnostic features supporting the recognition of H. sergipanus as a valid species. Thus, H. sergipanus is considered as junior synonym of H. itaparicensis. We emphasize the need of examining large population samples and type material of similar congeners to avoid improper propositions of new specific names.(AU)

Hyphessobrycon itaparicensis foi descrita de um pequeno riacho na Ilha de Itaparica, Estado da Bahia, Brasil, e tem sido amostrada em outros rios costeiros nos estados da Bahia e Sergipe. Um amplo exame do material tipo e exemplares recentemente coletados resultou na redescrição aqui apresentada. A presença de uma mancha umeral, a ausência de pseudotímpano e aspectos da conservação de H. itaparicensis são brevemente discutidos. Dados obtidos da descrição original, de parátipos e topótipos de H. sergipanus revelaram ampla sobreposição com H. itaparicensis e ausência de características morfológicas diagnósticas que sustentem o reconhecimento de H. sergipanus como espécie válida. Assim, H. sergipanus é considerada sinônimo júnior de H. itaparicensis. Nós enfatizamos a necessidade de examinar grandes amostras das populações e do material tipo de congêneres semelhantes para evitar a proposição indevida de nomes novos de espécies.(AU)

Comparative cytogenetics of Astyanax (Teleostei: Characidae) from the upper Paraguay basin

Astyanax is one of the most abundant and diverse taxa of fishes in the Neotropical region. In order to increase the amount of cytogenetic information for Astyanax as well as to exhibit data to subsidize future taxonomic studies, this work analyzed three species of Astyanax: two species are cryptic, and are here reported to live in syntopy (A. abramis and A. lacustris); the first karyotype description for A. pirapuan is also presented. Cytogenetic analyzes reveal a diploid number of 2n=50 chromosomes for three species, yet with differences in their karyotype morphology. The physical mapping of 18S rDNA showed up to thirteen sites in A. pirapuan and two in A. abramis and A. lacustris. The physical mapping of 5S rDNA has proven to be an effective marker for the characterization of species of Astyanax studied in this work.(AU)

Astyanax é um dos táxons mais representados e diversos na região Neotropical. Com o intuito de aumentar as informações citogenéticas para Astyanax e apresentar dados que possam subsidiar estudos taxonômicos futuros, este trabalho traz uma análise citogenética de três espécies de Astyanax: duas espécies consideradas crípticas, aqui reportadas em sintopia (A. abramis e A. lacustris) e a primeira descrição cariotípica de A. pirapuan. As análises citogenéticas revelaram 2n=50 cromossomos para as três espécies, com diferença na morfologia cariotípica de cada uma. Foram observados apenas dois sítios de rDNA 18S em A. abramis e A. lacustris e até 13 para A. pirapuan. O mapeamento físico do rDNA 5S se mostrou como um marcador efetivo para a caracterização das espécies de Astyanax abordadas neste estudo.(AU)

Molecular phylogeny and biogeographic history of the Neotropical tribe Glandulocaudini (Characiformes: Characidae: Stevardiinae)

Although former studies on systematics and biogeography represent a progress on the knowledge of the tribe Glandulocaudini, none was grounded on molecular evidence. Thus, the first hypothesis of relationships for the tribe based on a multilocus analysis is presented, including all genera and most of the valid species. DNA sequences of Glandulocauda caerulea and Mimagoniates sylvicola were analyzed for the first time. A molecular clock analysis was used to estimate the origin of the Glandulocaudini and the approximate timing of cladogenetic events within the group. Glandulocaudini was recovered as monophyletic. No hypothesis recovered Glandulocauda as monophyletic, since G. melanopleura is sister to Lophiobrycon weitzmani while G. caerulea is closely related to Mimagoniates. The relationships within the latter genus were resolved. The molecular clock results indicate the origin of the Glandulocaudini during the Miocene with diversification in the group occurring from Neogene to Pleistocene. These results corroborated the hypothesis that its origin took place on the Brazilian crystalline shield with the subsequent occupation of the Atlantic Coastal drainages. Apparently, Pleistocene sea-level fluctuations might have shaped the distribution pattern of some species in Glandulocaudini.(AU)

Embora estudos prévios sobre sistemática e biogeografia representam um avanço no conhecimento da tribo Glandulocaudini, nenhum foi baseado em evidência molecular. Assim, a primeira hipótese de relações para a tribo com base em uma análise multilocus é apresentada, incluindo todos os gêneros e a maioria das espécies válidas. Sequências de DNA de Glandulocauda caerulea e Mimagoniates sylvicola foram analisadas pela primeira vez. Uma análise de relógio molecular foi utilizada para estimar a origem de Glandulocaudini e datas aproximadas de eventos cladogenéticos dentro do grupo. Glandulocaudini foi recuperada como monofilética. Nenhuma hipótese recuperou Glandulocauda como monofilético, uma vez que G. melanopleura é irmã de Lophiobrycon weitzmani e G. caerulea está proximamente relacionada a Mimagoniates. As relações dentro deste último gênero foram resolvidas. Os resultados do relógio molecular indicam que Glandulocaudini originou-se durante o Mioceno, com diversificação dentro do grupo ocorrendo desde o Neogeno até o Pleistoceno. Estes resultados corroboram a hipótese da sua origem no escudo cristalino brasileiro, com a subsequente ocupação das drenagens costeiras atlânticas. Aparentemente, as flutuações pleistocênicas do nível do mar podem ter moldado o padrão de distribuição de algumas espécies em Glandulocaudini.(AU)

Conserved number of U2 snDNA sites in Piabina argentea, Piabarchus stramineus and two Bryconamericus species (Characidae, Stevardiinae)

The chromosomal location of 5S rRNA and U2 snRNA genes of Piabina argentea, Piabarchus stramineus and two Bryconamericus species from two different Brazilian river basins were investigated, in order to contribute to the understanding of evolutionary characteristics of these repetitive DNAs in the subfamily Stevardiinae. The diploid chromosome number was 2n = 52 for Bryconamericus cf. iheringii, Bryconamericus turiuba, Piabarchus stramineus and Piabina argentea. The 5S rDNA clusters were located on one chromosome pair in P. stramineus and B. cf. iheringii, and on two pairs in B. turiuba and P. argentea. The U2 snDNA clusters were located on the one pair in all species. Two-color FISH experiments showed that the co-localization between 5S rDNA and U2 snDNA in P. stramineus can represent a marker for this species. Thus, the present study demonstrated that the number of U2 snDNA clusters observed for the four species was conserved, but particular characteristics can be found in the genome of each species.(AU)

A localização cromossômica dos genes de RNAr 5S e RNAsn U2 de Piabina argentea, Piabarchus stramineus e duas espécies de Bryconamericus provenientes de duas bacias hidrográficas foi investigada, com a intenção de contribuir com o entendimento de características evolutivas destes DNAs repetitivos na subfamília Stevardiinae. O número cromossômico diploide foi 2n = 52 para Bryconamericus cf. iheringii, Bryconamericus turiuba, Piabarchus stramineus e Piabina argentea. Os sítios de DNAr 5S foram localizados em um par cromossômico em P. stramineus e B. cf. iheringii, e em dois pares em B. turiuba e P. argentea. Os sítios de DNAsn U2 foram localizados em um par em todas as espécies. Experimentos de FISH com duas sondas mostraram que a co-localização entre os DNAr 5S e DNAsn U2 em P. stramineus pode representar um marcador para esta espécie. Portanto, o presente estudo demonstrou que o número de sítios de DNAsn U2 observado para as quatro espécies foi conservado, porém características particulares podem ser encontradas no genoma de cada espécie.(AU)

Description of a new species of Moenkhausia (Characiformes: Characidae) from the upper Paraguay basin, Central Brazil, with comments on its phylogenetic relationships

A new species of Moenkhausia is described from tributaries of the upper rio Sepotuba, Paraguay basin, Brazil. The new species is distinguished from its congeners by a combination of characters, including an inconspicuous oval-shaped vertically elongated humeral blotch, extending horizontally from third through five lateral-line scales, and vertically from third row above lateral line to first row below it, followed by a diffuse field of dark chromatophores in the flank, combined with a well-defined dark line at the base of the anal fin. Furthermore, the phylogenetic position of the new species is presented based on molecular data, showing a close relationship among species of Moenkhausia and Hemigrammus that have a well-defined dark line at the base of the anal fin. Until this moment, this species is only known from in the upper rio Sepotuba basin.(AU)

Uma nova espécie de Moenkhausia é descrita nos afluentes do rio Sepotuba, bacia do Paraguai, no Brasil. A nova espécie se distingue dos seus congêneres por uma combinação de caracteres, incluindo uma mancha umeral discreta de forma oval, alongada verticalmente, que se estende horizontalmente da terceira a quinta escamas da linha lateral e, verticalmente, da terceira fila de escamas acima da linha lateral até a primeira fila abaixo da linha lateral; seguida por escassos cromatóforos no flanco, combinado com uma linha escura bem definida na base da nadadeira anal. Além disso, a posição filogenética da nova espécie é apresentada com base em dados moleculares, mostrando um relacionamento próximo entre as espécies de Moenkhausia e Hemigrammus que possuem uma linha escura bem definida na base da nadadeira anal. Até o momento, essa espécie é conhecida apenas da bacia do Alto Sepotuba.(AU)

Using ancient DNA to unravel taxonomic puzzles: the identity of Deuterodon pedri (Ostariophysi: Characidae)

Accurate identification is essential for any study exploring biodiversity. Unfortunately, museum type specimens preserved for more than a hundred years are often not informative enough for precise identification of the species represented by the name-bearing type. The use of ancient DNA can help solve taxonomic problems when name-bearing types no longer have diagnostic morphological features that allow for an accurate identification of the species involved. That is the case for Deuterodon pedri, an endemic species from a small drainage in the rio Doce basin in Minas Gerais, Brazil, for which the type material is in poor condition. Specimens of D. pedri were collected in 1865 by the Thayer Expedition to Brazil and fixed in spirits, enabling them to yield viable DNA. As the morphology alone of the type material does not allow for an accurate identification, we used both morphological and ancient DNA (aDNA) methods to decisively establish the identity of D. pedri. This identification allowed us to recognize the species among recently collected specimens and then, based on them, redescribe the species. A genetype for the lectotype of D. pedri is presented.(AU)

Uma identificação acurada é fundamental para qualquer estudo que explora a biodiversidade. Infelizmente, espécimes de museu descritos há mais de cem anos, algumas vezes não são informativos o suficiente para uma identificação precisa da espécie representada pelo tipo. O uso de DNA antigo pode ajudar a resolver problemas taxonômicos, quando espécimes tipos não apresentam mais as características morfológicas diagnósticas que permitem a identificação precisa das espécies. Esse é o caso de Deuterodon pedri, uma espécie endêmica de uma pequena drenagem na bacia do rio Doce, em Minas Gerais, Brasil cujo material tipo encontra-se em condições precárias. Espécimes de D. pedri foram coletados em 1865 pela Expedição Thayer ao Brasil e fixados em “cachaça”, o que permite apresentar DNA viável. Como apenas o exame morfológico do material tipo não permitiria a identificação precisa, nós usamos ambos os dados de análises morfológicas e DNA antigo (aDNA) para estabelecer decisivamente a identidade de D. pedri. Esta identificação permitiu reconhecer a espécie entre exemplares coletados recentemente e, com base neles, redescrever a espécie. É apresentado um genetipo para o lectótipo de D. pedri.(AU)

Karyotypic diversity among three species of the genus Astyanax (Characiformes: Characidae) / Diversidade Cariotípica entre três espécies do gênero Astyanax (Characiformes, Characidae)

Abstract The group Incertae sedis within the Characidae family currently includes 88 genera, previously included in the subfamily Tetragonopterinae. Among them is the genus Astyanax comprising a group of species with similar morphology and widely distributed in the Neotropics. Thus, the present study aimed to analyze the karyotype diversity in Astyanax species from different watersheds by conventional Giemsa staining, C-banding and fluorescence in situ hybridization (FISH rDNA 18S) probe.specimens of Astyanax aff. paranae belonging to the “scabripinnis complex”, Astyanax asunsionensis and Astyanax aff. bimaculatus were analyzed”. Two sympatric karyomorphs were observed in Astyanax.aff paranae, one of them having2n=48andthe other one with 2n=50 chromosomes. Other population of this same species also presented 2n=50 chromosomes, but differing in the karyotype formula and with macro supernumerary chromosome found in 100% of the cells in about 80%of females analyzed. Two population of A. asuncionensis and one population of Astyanax. aff. bimaculatus, also showed a diploid number of 50 chromosomes, but also differing in their karyotype formulas. Therefore, A. asuncionensis was also characterized by intraspecific chromosome diversity. The C-banding analysis was able to demonstrate a distinctable to demonstrate a distinct pattern of heterochromatin differing A. asuncionensis from Astyanax aff. paranae and Astyanax aff. bimaculatus. The supernumerary chromosome of Astyanax aff. paranae proved completely heterochromatic. Only Astyanax.aff. bimaculatus multiple showed multiple sites of nucleolar organizing regions. The other species were characterized by having a simple system of NOR. These data contributes to the know ledge of the existing biodiversity in our fish fauna, here highlighted by the inter- and intraspecific chromosomal diversity in the genus Astyanax.

Resumo O grupo Incertae sedis, dentro da família Characidae inclui atualmente 88 gêneros, anteriormente incluídos na subfamília Tetragonopterinae. Dentre eles encontra-se o gênero Astyanax que compreende um grupo de espécies com morfologia similar e com ampla distribuição na região Neotropical. Assim, o presente estudo teve como objetivo analisar a diversidade cariotípica em espécies de Astyanax de diferentes bacias hidrográficas, através da coloração convencional com Giemsa, bandeamento C e hibridização fluorescente in situ (FISH com rDNA 18S). Exemplares de Astyanax aff. paranae, pertencentes ao “complexo scabripinnis”; Astyanax asunsionensise Astyanax aff. bimaculatus foram analisados. Dois cariomorfos foram observados em A. aff. paranae, um deles com 2n=48 cromossomos e outro com 2n=50 cromossomos. Outra população apresentou 2n=50 cromossomos, ambas diferindo na fórmula cariotípica e um cromossomo supranumerário encontrado em 100% das células, em aproximadamente 80% das fêmeas analisadas. Populações de A.asunsionensis e uma população de Astyanax aff. Bimaculatus também mostraram número diplóide de 50 cromossomos, mas diferindo em suas fórmulas cariotípicas. Portanto, A. asuncionensis foi também caracterizado por uma diversidade cariotípica intraespecífica. As análises de bandeamento C foi capaz de demonstrar um padrão distinto de heterocromatina, diferindo A. asuncionensis de A.aff. paranae e A. aff. bimaculatus. O cromossomo supranumerário de Astyanax aff. paranae mostrou-se completamente heterocromático. Apenas Astyanax aff. bimaculatus mostrou múltiplos sítios de regiões organizadoras de nucléolo(NORs). As outras espécies foram caraterizadas por apresentar um sistema simples de NOR. Estes dados contribuem para o conhecimento da existência de biodiversidade em nossa fauna de peixes, aqui em destaque pela diversidade cromossômica inter e intraespecífica no gênero Astyanax.

Spatial and temporal biomarkers responses of Astyanax jacuhiensis (Cope, 1894)(Characiformes: Characidae) from the middle rio Uruguai, Brazil

Due to intense agricultural activity in the rio Uruguai (South Brazil), there is the potential for aquatic contamination by agrochemicals. In this region, there are many reservoirs to meet the water demand for rice fields, forming lentic environments. In line with this information, the aim of this study was to show a comparative analysis of some biomarkers, such as lipid peroxidation (TBARS), gluthatione S-transferase (GST), non-protein thiols (NPSH), amino acids (AA) and piscine micronucleus tests (MNE) in Astyanax jacuhiensis from lentic and lotic environments in the middle rio Uruguai region, comparing warm and cold seasons. Eight pesticides were found in water samples, with propoxur having the highest concentration found in both environments and seasons. Fish from the warm season showed higher levels of biochemical biomarkers, and fish from the cold season showed higher levels of MNE and AA. TBARS and AA presented higher levels in fish from the river, while GST, NPSH, MNE and AA presented higher levels in fish from dams. These environments have different characteristics in terms of redox potential, aeration, sedimentation, trophic structure, agrochemicals input and others, which may affect the physiological and biochemical responses of fish in against adverse situations.

Devido à intensa atividade agrícola no rio Uruguai (Sul do Brasil), há potencial para contaminação aquática por agrotóxicos. Há muitos reservatórios para atender a demanda de água de campos de arroz, formando ambientes lênticos. De acordo com estas informações, o objetivo do presente estudo foi mostrar uma análise comparativa de alguns biomarcadores como a peroxidação lipídica (TBARS), glutationa S-transferase (GST), tióis não-protéicos (NPSH), aminoácidos (AA) e teste písceo de micronúcleos (MNE) em Astyanaxjacuhiensis amostrados em ambientes lóticos e lênticos da região do médio rio Uruguai, comparando estações quentes e frias. Oito pesticidas foram encontrados em amostras de água, sendo propoxur a maior concentração encontrada em ambos os ambientes e estações. Peixes da estação quente apresentaram maiores níveis de biomarcadores bioquímicos e peixes da estação fria apresentaram maiores níveis de MNE e AA. TBARS e AA apresentaram maiores níveis nos peixes de rio, enquanto GST, NPSH, MNE e AA apresentaram níveis mais elevados em peixes da represa. Estes ambientes têm características diferentes, com potencial redox, aeração, sedimentação, estrutura trófica, a entrada de agroquímicos e outros que podem afetar as respostas fisiológicas e bioquímicas de peixe contra situação adversa.

Redescription and osteology of Hyphessobrycon compressus (Meek) (Teleostei: Characidae), type species of the genus

The type-species of Hyphessobrycon is redescribed and its osteology provided. Hyphessobrycon compressus is distinguished from its congeners by the 41-48 (mode 45) scales in the longitudinal series; 7-9 (mode 9) scales rows between the dorsal-fin origin and the lateral line, and absence of predorsal scales. Additional useful characters include the lack of spots on the body, a dorsal fin with a black spot, and an anal fin with two large, conspicuous hooks, and several other small hooks. Hyphessobrycon milleri is proposed as a junior synonym of H. compressus. The osteology of H. compressus is discussed in detail together with comments about phylogenetic relationships of Hyphessobrycon sensu stricto.

A espécie-tipo de Hyphessobrycon é redescrita, junto com sua descrição osteológica. Hyphessobrycon compressus é distinguido dos seus congêneres por possuir 41-48 (moda 45) escamas na série longitudinal, 7-9 (moda 9) séries de escamas entre a origem da nadadeira dorsal e a linha lateral, e pela ausência de escamas pré-dorsais. Caracteres adicionais úteis incluem a ausência de máculas no flanco, nadadeira dorsal com mácula preta e nadadeira anal com dois ganchos ósseos grandes e conspícuos e vários outros pequenos. Hyphessobrycon millerié proposto como sinônimo júnior de H. compressus. A osteologia de H. compressusé discutida em detalhe, junto com comentários sobre as relações filogenéticas de Hyphessobrycon sensu stricto.

Evaluation of genotoxicity and cytotoxicity of water samples from the Sinos River Basin, southern Brazil / Avaliação da genotoxicidade e da citotoxicidade de amostras de água da Bacia do Rio dos Sinos, sul do Brasil

Some water bodies in the Sinos River Basin (SRB) have been suffering the effects of pollution by residential, industrial and agroindustrial wastewater. The presence of cytotoxic and genotoxic compounds could compromise the water quality and the balance of these ecosystems. In this context, the research aimed to evaluate the genotoxicity and cytotoxicity of the water at four sites along the SRB (in the cities of Santo Antônio da Patrulha, Parobé, Campo Bom and Esteio), using bioassays in fish and cell culture. Samples of surface water were collected and evaluated in vitro using the Astyanax jacuhiensis fish species (micronucleus test and comet assay) and the Vero lineage of cells (comet assay and cytotoxicity tests, neutral red - NR and tetrazolium MTT). The micronucleus test in fish showed no significant differences between the sampling sites, and neither did the comet assay and the MTT and NR tests in Vero cells. The comet assay showed an increase in genetic damage in the fish exposed to water samples collected in the middle and lower sections of the basin (Parobé, Campo Bom and Esteio) when compared to the upper section of the basin (Santo Antônio da Patrulha). The results indicate contamination by genotoxic substances starting in the middle section of the SRB.

Alguns corpos d’água da Bacia Hidrográfica do Rio dos Sinos (BHRS) vêm sofrendo os efeitos da poluição por efluentes domésticos, industriais e agroindustriais. A presença de compostos citotóxicos e genotóxicos pode comprometer a qualidade da água e o equilíbrio desses ecossistemas. Neste contexto, o objetivo do trabalho foi avaliar a genotoxicidade e a citotoxicidade da água em quatro pontos ao longo da BHRS (Santo Antônio da Patrulha, Parobé, Campo Bom e Esteio), utilizando bioensaios em peixes e em cultura celular. As amostras de água de superfície foram coletadas e avaliadas in vitro utilizando a espécie de peixe Astyanax jacuhiensis (teste de micronúcleo e ensaio cometa) e a linhagem celular tipo Vero (ensaio cometa e os testes de citotoxicidade vermelho neutro - VN e tetrazólio MTT). O teste de micronúcleos em peixes não apresentou diferenças significativas entre os pontos de coleta, assim como o ensaio cometa e os testes VN e MTT nas células Vero. O ensaio cometa demonstrou aumento nos danos genéticos em peixes expostos às amostras de água coletadas nos trechos médio e inferior da bacia (Parobé, Campo Bom e Esteio) em relação ao trecho superior da bacia (Santo Antônio da Patrulha). Os resultados indicam contaminação por substâncias genotóxicas a partir do trecho médio da BHRS.

Redescription of Astyanax goyacensis Eigenmann, 1908 (Ostariophysi: Characiformes: Characidae)

Astyanax goyacensis Eigenmann, 1908 is redescribed based on the holotype and 25 topotypes. The species belongs to the A. bimaculatus species complex, sharing with those species a black, horizontally ovate, humeral spot (the most conspicuous feature of this complex), two diffuse vertical brown bars in the humeral area (the first through humeral spot and the second 2-3 scales behind), and black medium caudal-fin rays. Furthermore, A. goyacensis possesses a black stripe extending along midlateral body portion, more conspicuous in alcohol preserved specimens. These characteristics allow its inclusion in the putative "black lateral stripe" sub-group of A. bimaculatus species complex. From the species of this complex it differs by the black lateral stripe shape, pattern of chromatophores on the flank, coloration of the caudal fin, scales on the lateral line, branched rays on anal fin, eye diameter, and caudal peduncle depth. Comments about the color pattern in Astyanax bimaculatus species complex are added.(AU)

Astyanax goyacensis Eigenmann, 1908 é redescrita com base no holótipo e em 25 topótipos. Esta espécie pertence ao complexo A. bimaculatus, com o qual compartilha uma mancha umeral negra ovalada horizontalmente (a mais conspícua característica do complexo), duas barras umerais marrons difusas (a primeira passando pela umeral oval e a segunda, 2-3 escamas atrás) e raios caudais medianos negros. Além disso, A. goyacensis possui uma faixa lateral negra estendida ao longo da porção mediana do corpo, mais conspícua nos exemplares conservados em álcool. Essas características permitem incluí-la no suposto sub-grupo "faixa lateral negra" do complexo bimaculatus. Das espécies desse complexo ela difere pela forma da faixa lateral negra, padrão de cromatóforos no flanco, coloração da nadadeira caudal, escamas na linha lateral, raios ramificados na nadadeira anal, diâmetro do olho e altura do pedúnculo caudal. São adicionados comentários sobre o padrão de coloração nas espécies do complexo A. bimaculatus.(AU)

Microsatellite variation and population genetic structure of a neotropical endangered Bryconinae species Brycon insignis Steindachner, 1877: implications for its conservation and sustainable management

Piabanha (Brycon insignis) is a freshwater fish species from the drainages in Southeastern Brazil. During the 1950s, it was an important economic and food resource for local populations, but dramatic and continuous environmental degradation seriously jeopardized the B. insignis populations in the region. Microsatellite markers were used to assess the genetic structure of wild populations of B. insignis and compare the genetic variability and integrity of the wild populations with a captive population. Samples of DNA from 208 specimens from geographically isolated populations were analyzed. Population genetic structure was investigated using F ST, R ST estimates as well as AMOVA. All five loci used in this study were polymorphic with observed heterozygosity ranging from 0.77 (± 0.15) to 0.88 (± 0.07) in the wild population and 0.90 (± 0.09) in the captive population and the allelic richness average were 7.56 (± 0.27) and 5.80 (± 1.02), respectively. Overall genetic differences were significantly partitioned among populations (F ST = 0.072, p = 0.034). Evidence of a genetic bottleneck was found in some of the wild populations, but especially in the captive population. The results showed that genetic variability still can be found in B. insignis populations which are currently structured possibly due to anthropic actions. The implications of these findings for the management and conservation of B. insignis populations are discussed.(AU)

Piabanha (Brycon insignis) é uma espécie de peixe de água doce oriunda de drenagens da região sudeste do Brasil. Durante os anos de 1950, esta espécie foi um importante recurso econômico para populações locais. Contudo, a intensa e contínua degradação ambiental afetou seriamente as populações de B. insignis na região. Marcadores microssatélites foram usados para avaliar a estrutura genética de populações selvagens de B. insignis e comparar a variabilidade genética e integridade das populações selvagens com uma população de cativeiro. Amostras de DNA de 208 espécimes de populações geograficamente isoladas foram analisadas. A estrutura populacional foi investigada usando-se estimadores de F ST e R ST bem como AMOVA. Todos os loci usados neste estudo foram polimórficos com heterozigosidades observadas variando de 0.77 (± 0.15) a 0.88 (± 0.77) em populações selvagens e 0.90 (± 0.09) na população de cativeiro e a riqueza alélica média foi de 7.56 (± 0.27) e 5.80 (± 1.02), respectivamente. A maioria das diferenças genéticas foi significativa entre populações (F ST = 0.072, p = 0.034). Evidências de efeito gargalo foram observadas em algumas populações selvagens e especialmente também na população de cativeiro. Os resultados do presente estudo mostraram que as populações de B. insignis ainda apresentam variabilidade genética e que estas populações estão atualmente estruturadas geneticamente provavelmente devido a ações antrópicas. As implicações destes achados para o manejo e conservação das populações de B. insiginis são discutidas.(AU)

Temporal and ontogenetic variations in feeding habits of Hollandichthys multifasciatus (Teleostei: Characidae) in coastal Atlantic rainforest streams, southern Brazil

Feeding habits of the characin Hollandichthys multifasciatus were investigated. Samplings were made between March 2004 and February 2005 in two black water streams of the coastal Atlantic rainforest in southern Brazil. The diet, evaluated by qualitative and quantitative methods, included aquatic and terrestrial insects, decapods, oligochaetes, plants and spiders. Large individuals feed mainly on plants, terrestrial insects, and spiders, whereas small fish feed basically on plants and oligochaetes. The species showed an omnivorous feeding habit, and its diet was composed of autochthonous (mainly oligochaetes) and allochthonous (plants and terrestrial insects) material.(AU)

Neste estudo foram investigados os hábitos alimentares do caracídeo Hollandichthys multifasciatus. Amostras foram obtidas entre março de 2004 e fevereiro de 2005, em dois riachos de água escura da Floresta Atlântica Costeira do Sul do Brasil. A dieta, avaliada por métodos quantitativos e qualitativos, inclui insetos aquáticos e terrestres, decápodes, oligoquetos aquáticos, plantas e aranhas. Os maiores indivíduos alimentaram-se principalmente de plantas, insetos terrestres e aranhas, enquanto que os menores indivíduos alimentaram-se basicamente de plantas e oligoquetos aquáticos. A espécie apresentou hábito alimentar onívoro, e sua dieta no riacho estudado foi composta por material autóctone (principalmente oligoquetos aquáticos) e alóctone (plantas e insetos terrestres).(AU)

A redescription of Astyanax gymnodontus (Eigenmann, 1911), new combination, a polymorphic characid fish from the rio Iguaçu basin, Brazil

Astyanax gymnodontus (Eigenmann, 1911), new combination, a polymorphic characid fish endemic to the Rio Iguaçu basin in Southern Brazil, is redescribed. The species was originally described as belonging to the monotypic genus Psalidodon, distinguished from Astyanax by the possession of a single series of teeth on the premaxilla (vs. two series), by the presence of relatively compressed teeth on the premaxillary and dentary bones (vs. relatively bulky teeth), and by the absence of lips (vs. lips present). Examination of a large number of specimens from the rio Iguaçu basin that present dental and lip features that were intermediate between Psalidodon and Astyanax indicated that specimens attributed to Psalidodon show extreme characters observed within a polymorphic Astyanax species. Accordingly, the genus Psalidodon is synonymized under Astyanax. Specimens of "Astyanax sp. F" morphotype from the rio Iguaçu basin belong to the species Astyanax gymnodontus and display a regular tooth arrangement and morphology, and their lip development is similar to that of other Astyanax species.(AU)

Astyanax gymnodontus (Eigenmann, 1911), combinação nova, um peixe caracídeo polimórfico, endêmico da bacia do rio Iguaçu no sul do Brasil, é redescrito. A espécie foi originalmente descrita como pertencente ao gênero monotípico Psalidodon, diagnosticado de Astyanax pela posse de uma única série de dentes no pré-maxilar (vs. duas séries), pela presença de dentes relativamente comprimidos nos ossos pré-maxilar e dentário (vs. dentes relativamente robustos), e pela ausência de lábios (vs. lábios presentes). O exame de um grande número de espécimes da bacia do rio Iguaçu, apresentando características dentárias e labiais intermediárias entre Psalidodon e Astyanax, indicou que espécimes atribuídos a Psalidodon mostram caracteres extremos observados em uma espécie de Astyanax. Assim, o gênero Psalidodon é sinonimizado sob Astyanax. Espécimes do morfótipo "Astyanax sp. F" da bacia do rio Iguaçu pertencem à espécie Astyanax gymnodontus e exibem dentes com arranjo e morfologia regular, bem como lábios com desenvolvimento similar a outras espécies de Astyanax.(AU)