Histomorphometric analysis of liver biopsies of treated patients with Gaucher disease type 1

Gaucher disease (GD) is an autosomal recessive lysosomal disorder caused by a disturbance in the metabolism of glucocerebroside in the macrophages. Most of its manifestations - hepatosplenomegaly, anemia, thrombocytopenia, and bone pain - are amenable to a macrophage-target therapy such as enzyme replacement. However, there is increasing evidence that abnormalities of the liver persist despite the specific GD treatment. In this work, we adapted histomorphometry techniques to the study of hepatocytes in GD using liver tissue of treated patients, developing the first morphometrical method for canalicular quantification in immunohistochemistry-stained liver biopsies, and exploring histomorphometric characteristics of GD. This is the first histomorphometric technique developed for canalicular analysis on histological liver biopsy samples.

Análise da DNA-ploidia em carcinoma lobular de mama / DNA content analysis of breast lobular invasive carcinoma

O carcinoma mamário apresenta elevados números relacionados à incidência e prevalência nas mulheres em vários países. No Brasil, é a neoplasia com um dos maiores índices de mortalidade. O tipo de carcinoma mamário mais freqüente é o ductal invasor seguido do carcinoma lobular. Embora essas neoplasias tenham características próprias, há ainda muitas questões a serem dirimidas. Sabe-se que os carcinomas lobulares apresentam alto risco de desenvolvimento bilateral e recorrência; estão relacionadas à expressão hormonal e têm desfecho lento. Sabe-se que o carcinoma lobular não tem positividade para a proteína E-caderina, cuja ausência de expressão imuno-histoquímica tem sido usada para diferenciá-la do carcinoma ductal. O padrão do conteúdo de DNA no carcinoma lobular tem sido objeto de controvérsias, com trabalhos descrevendo-o como predominantemente diplóide e outros, ao contrário, aneuplóide. O objetivo deste estudo foi analisar os padrões da DNA-ploidia em carcinomas lobulares invasivos de mama, E-caderina negativos, e correlacioná-los com fatores prognósticos de notória importância: expressão da proteína p53, Cerb-B2, receptores de estrógeno, tamanho dos tumores, comprometimento linfonodal, metástases a distância e pós-cirúrgica. Para isso foi realizado um estudo retrospectivo, com 50 casos examinados no Departamento de Anatomia Patológica do Hospital do Câncer A. C. Camargo, São Paulo-SP. Essas mulheres foram tratadas com cirurgia e as que apresentaram comprometimento axilar, receberam terapia adjuvante com quimioterapia, radioterapia e hormônioterapia. As medianas dos tempos de seguimento, com início no tratamento inicial (cirurgia) até o evento foi: grupo que foram a óbito 50 ± 27,6 meses; grupo com perda de seguimento 33 ± 56,0 meses; grupo de censura por interrupção do tempo para análise 79 ± 45,3 meses. A idade média foi de 54 anos (variando de 34 a 80 anos). A análise do conteúdo de DNA mostrou-se predominantemente aneuplóide (63,16 % dos casos). Somente o comprometimento linfonodal mostrou-se significativo (p=0,043) em relação a análise de DNA-ploidia, os demais parâmetros não mostraram associação significativa. Concluímos que a análise do conteúdo de DNA não é um parâmetro relevante para avaliar a agressividade do carcinoma lobular.

Análise da DNA-ploidia em carcinoma lobular de mama

O carcinoma mamário apresenta elevados números relacionados à incidência e prevalência nas mulheres em vários países. No Brasil, é a neoplasia com um dos maiores índices de mortalidade. O tipo de carcinoma mamário mais freqüente é o ductal invasor seguido do carcinoma lobular. Embora essas neoplasias tenham características próprias, há ainda muitas questões a serem dirimidas. Sabe-se que os carcinomas lobulares apresentam alto risco de desenvolvimento bilateral e recorrência; estão relacionadas à expressão hormonal e têm desfecho lento. Sabe-se que o carcinoma lobular não tem positividade para a proteína E-caderina, cuja ausência de expressão imuno-histoquímica tem sido usada para diferenciá-la do carcinoma ductal. O padrão do conteúdo de DNA no carcinoma lobular tem sido objeto de controvérsias, com trabalhos descrevendo-o como predominantemente diplóide e outros, ao contrário, aneuplóide. O objetivo deste estudo foi analisar os padrões da DNA-ploidia em carcinomas lobulares invasivos de mama, E-caderina negativos, e correlacioná-los com fatores prognósticos de notória importância: expressão da proteína p53, Cerb-B2, receptores de estrógeno, tamanho dos tumores, comprometimento linfonodal, metástases a distância e pós-cirúrgica. Para isso foi realizado um estudo retrospectivo, com 50 casos examinados no Departamento de Anatomia Patológica do Hospital do Câncer A. C. Camargo, São Paulo-SP. Essas mulheres foram tratadas com cirurgia e as que apresentaram comprometimento axilar, receberam terapia adjuvante com quimioterapia, radioterapia e hormônioterapia. As medianas dos tempos de seguimento, com início no tratamento inicial (cirurgia) até o evento foi: grupo que foram a óbito 50 ± 27,6 meses; grupo com perda de seguimento 33 ± 56,0 meses; grupo de censura por interrupção do tempo para análise 79 ± 45,3 meses. A idade média foi de 54 anos (variando de 34 a 80 anos). A análise ...

Immunohistochemistry quantification by a digital computer-assisted method compared to semiquantitative analysis

PURPOSE: To compare immunostaining quantification obtained by a digital computer-assisted method with the well-established semiquantitative analysis. METHODS: Cytoplasmic staining of galectin-3 was obtained by standard immunohistochemical reactions in 25 cases of well-differentiated thyroid carcinoma. The expression index that associates the conventional area fraction of labeled cells with the immunostaining intensity score based on visual qualitative observation was used as the semiquantitative analysis. A digital computer-assisted method is described based on the use of an image processing program (ImageLab®). Three parameters were obtained: (1) percentage of labeled cells; (2) digital immunostaining intensity, and (3) digital expression index. The proposed method allows numerical analysis of the immunostaining intensity. RESULTS: There was a strong correlation between the immunostaining intensity obtained by the two methods (Pearson correlation coefficient, r = 0.71, P = 0.0001). The same was observed between expression indexes (Pearson correlation coefficient, r = 0.66, P = 0.0001). CONCLUSION: Results obtained with our proposed digital computer-assisted method for immunoexpression analysis were concordant with the semiquantitative analysis. In addition, digital values can also resolve disagreement among different observers about the quality of staining intensity because the digital method does not classify the results into groups, but rather provides a numerical value for each individual case; thus, it increases the diagnostic and, more importantly, the prognostic sensitivity of the immunohistochemical analysis.

OBJETIVO: Comparar a quantificação da imunomarcação através de um método digital assistido por computador à bem estabelecida análise semiquantitativa. MÉTODO: A marcação citoplasmática de galectina-3 foi obtida por reações imunohistoquímicas em 25 casos de carcinoma bem-diferenciado da glândula tireóide. Determinou-se o índice de expressão da análise semiquantitativa que associa a convencional fração de área de células marcadas com os escores de intensidade da imunoexpressão, com base na observação visual qualitativa. O método digital assistido por computador foi desenvolvido com o uso de um programa de análise de imagem (ImageLab®). Três parâmetros foram obtidos: (1) porcentagem de células marcadas; (2) intensidade de imunoexpressão digital e (3) índice de expressão digital. O método proposto resulta na análise numérica da intensidade de imunoexpressão. RESULTADOS: Houve importante correlação entre as intensidades de imunoexpressão obtidas pelos dois métodos (coeficiente de correlação de Pearson, r=0,71, p=0,0001). O mesmo foi observado entre os índices de expressão (coeficiente de correlação de Pearson, r=0,66, p=0,0001). DISCUSSÃO: Os resultados de intensidade de imunoexpressão obtidos com o emprego do método digital assistido por computador foram concordantes com os escores da análise semiquantitativa. Entretanto, os resultados alcançados com o emprego do método digital podem resolver a discordância entre diferentes observadores com relação a esta intensidade de imunomarcação. Além disso, o método proposto não categoriza os resultados em grupos, o que torna a análise imunohistoquímica numericamente mensurável individualmente, aumentando seu poder diagnóstico e, sobretudo, prognóstico.

Detection of DNA aneuploidy in exfoliated airway epithelia cells of sputum specimens by the automated image cytometry and its clinical value in the identification of lung cancer / 华中科技大学学报（医学）（英德文版）

To evaluate the value of detection of DNA aneuploidy in exfoliated airway epithelia cells of sputum specimens by the automated image cytometry for the identification of lung cancer, 100 patients were divided into patient group (50 patients with lung cancer) and control group (30 patients with tuberculosis and 20 healthy people). Sputum was obtained for the quantitative analysis of DNA content of exfoliated airway epithelial cells with the automated image cytometry, together with the examinations of brush cytology and conventional sputum cytology. Our results showed that DNA aneuploidy (DI>2.5 or 5c) was found in 20 out of 50 sputum samples of lung cancer, 1 out of 30 sputum samples from tuberculosis patients, and none of 20 sputum samples from healthy people. The positive rates of conventional sputum cytology and brush cytology were 16% and 32%, which was lower than that of DNA aneuploidy detection by the automated image cytometry (P0.05). Our study showed-that automated image cytometry, which uses DNA aneuploidy as a marker for tumor, can detect the malignant cells in sputum samples of lung cancer and it is a sensitive and specific method serving as a complement for the diagnosis of lung cancer.