Characterization of Mycoplasma penetrans and Mycoplasma fermentans immunodominant proteins

Micoplasmas são procariotos diminutos, desprovidos de parede celular e envoltos por uma membrana lipoproteica cujo pequeno genoma sintetiza a maioria das moléculas necessárias para crescimento e replicacão. Dentre as dezesseis espécies isoladas do homem, Mycoplasma pneumoniae, agente causador da pneumonia atípica primária, e as espécies do trato urogenital como Mycoplasma hominis,Ureaplasma urealyticum e Ureaplasma parvum têm definido seu papel patogênico. M. penetrans e M. fermentans, espécies associadas ao HIV, têm sido investigadas principalmente em laboratórios de pesquisa. Considerando a importância dos micoplasmas nas doencas humanas e a peculiar variacão antigênica observada em tais espécies, foram caracterizadas, neste estudo, as lipoproteínas associadas a membranas (LAMP) de Mycoplasma penetrans e Mycoplasma fermentans. Para definir peptídeos com possível valor diagnóstico, empregamos as técnicas de ELISA e de Western blot usando soros de gestantes cujas amostras cervicais foram positivas por PCR. Por meio do ELISA foram observados anticorpos IgG anti-LAMP-M. fermentans em 57,5 per center e IgM em 74,5 per center das amostras. As três amostras PCR positivas para M. penetrans apresentaram anticorpos IgG anti-LAMP-M. penetrans e uma amostra positiva para IgM. IgA não foi detectada em nenhuma das espécies. A análise da LAMP, por Western blot, revelou como principais proteinas imunoreativas: 35, 38, 42, 61 and 103 kDa para M. penetrans e 29, 38, 41, 61, 78 and 95 kDa de M. fermentans. Dentre estas podemos considerar p35 específica para M. penetrans e p29, M. fermentans.Tais proteinas são promissoras como marcadores em diagnóstico.

Activation of nuclear factor kappaB and induction of inducible nitric oxide synthase by lipid-associated membrane proteins isolated from Mycoplasma penetrans / 中华医学杂志(英文版)

<p><b>BACKGROUND</b>This study was designed to investigate the potential pathogenicity of Mycoplasma penetrans (M. penetrans) and its molecular mechanisms responsible for the induction of iNOS gene expression in mouse macrophages stimulated by lipid-associated membrane proteins (LAMPs) prepared from M. penetrans.</p><p><b>METHODS</b>Mouse macrophages were stimulated with M. penetrans LAMPs to assay the production of nitric oxide (NO). The expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) was detected by RT-PCR and Western blotting. The activity of nuclear factor kappaB (NF-kappaB) and the effects of pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC), an inhibitor of NF-kappaB, on the production of nitric oxide and the expression of iNOS were also assessed in mouse macrophages treated with M. penetrans LAMPs by indirect immunofluorescence and Western blotting.</p><p><b>RESULTS</b>M. penetrans LAMPs stimulated mouse macrophages to produce nitric oxide in a dose- and time-dependent manner. The mRNA and protein levels of iNOS were also upregulated in response to LAMP stimulation and inhibited by PDTC treatment. M. penetrans LAMPs were found to trigger NF-kappaB activation, a possible mechanism for the induction of iNOS expression.</p><p><b>CONCLUSION</b>This study demonstrated that M. penetrans may be an important etiological factor of certain diseases due to the ability of M. penetrans LAMPs to stimulate the expression of iNOS, which is probably mediated through the activation of NF-kappaB.</p>

Detecçäo de Mycoplasma genitalium, M. fermentans e M. penetrans em pacientes com sintomas de uretrite e em indivíduos infectados pelo HIV-1 no Brasil / Detection of Mycoplasma genitalium, M. fermentans and M. penetrans in patients with symptoms of urethritis and in HIV-1 infected persons in Brazil

Neste trabalho investigamos a prevalência de três espécies de micoplasma recémðidentificadas como patógenos humanos, M. genitalium, implicado em casos de uretrite näoðgonocócica, e M. fermentans e M. penetrans, isolados de pacientes imunodeprimidos, e das duas espécies mais freqüentes no trato geniturinário, M. hominis e U. urealyticum. Foram estudados 110 pacientes com sintomas de uretrite (grupo A) e 106 indivíduos infectados pelo HIVð1 (grupo B). M. genitalium foi detectado em 10,9 por cento das amostras de raspado uretral do grupo A, e em 1,9 por cento das amostras de raspado uretral e 0,9 por cento e 5,7 por cento das amostras de raspado uretral dos grupos A e B, respectivamente. M. penetrans foi detectado em 6,6 por cento das amostras de urina somente do grupo B. M. hominis e U. urealyticum tiveram taxas de infecçäo de 0,9 por cento e 14,5 por cento no grupo A, e de 7,5 por cento e 18,9 por cento no grupo B, respectivamente. A relevante prevalência da infecçäo por estas novas espécies, em comparaçäo aos micoplasmas mais conhecidos do trato urogenital, sugere que a magnitude do papel destes microrganismos no âmbito das doenças sexualmente transmissíveis (DST) e da infecçäo pelo HIV pode estar sendo subestimada em nossa populaçäo

Detection and Isolation of Genital Mycoplasmas from Public Toilet Bowls

Genital mycoplasmas are sexually transmitted. There are considerable public concern that causative agents of sexually transmitted diseases might be transmitted nonsexually through public restrooms. In the present study, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum and M. penetrans among genital mycoplasmas were identified in 100 public restroom toilet bowls (50 men's and 50 women's public restrooms, each). Mycoplasmas were genotypically identified by two methods; (1) PCR of primary selective culture and (2) direct PCR of original specimens before primary selective culture. From 50 men's public restrooms, M. hominis, U. urealyticum and M. penetrans were identified from PCR of primary selective cultures in 6%, 4% and 0% of the specimens, respectively and M. hominis and U. urealyticum was codetected in 2% of those. And M. hominis, U. urealyticum and M. penetrans were identified by direct PCR in 20%, 16% and 0% of the original specimens, respectively and co-detection rate of M. hominis and U. urealyticum was 4% in those. From 50 women's public restrooms, 38% was positive for M. hominis, 14% for U. urealyticum, 0% for M. penetrans and 10% for both U. urealyticum and M. penetrans by PCR of primary selective culture. And 50% was positive for M. hominis, 46% for U. urealyticum and 0% for M. penetrans and 34% for both M. hominis and U. urealyticum by direct PCR of the original specimens. These results indicate that the genital mycoplasmas can survive for considerable duration in toilet bowels, and might be transmitted by through public restrooms.

Detection of mycoplasmas in urethral swabs from HIV-1 infected patients and control individuals using culture techniques and polymerase chain reaction

O objetivo do presente estudo foi determinar a prevalência de determinadas espécies de micoplasmas, tais como, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum e Mycoplasma penetrans, em swabs uretrais de pacientes infectados com HIV-1 comparando com um grupo controle. Micoplasmas foram detectados por técnicas padräo de cultivo e pela reacäo de polimerase em cadeia para a qual foram utilizados "primers" genericos obtidos da regiäo conservada 16sRNA e "primers" nos dois metodos foi comparavel. Contudo, o PCR mostrou ser mais sensivel nas condicöes empregadas enquanto que o cultivo permitiu a quantificacäo dos isolados. Os resultados demonstraram näo haver diferenças significantes (p<0,05) nas taxas de positividade entre os metodos empregados para a detecçäo dos micoplasmas