Brazilian donkeys (Equus asinus) have a low exposure to Neospora spp / Asininos (Equus asinus) brasileiros têm uma baixa exposição à Neospora spp

Donkeys (Equus asinus) are closely related to horses and are known to be infected by several equine pathogens. Neospora caninum and Neospora hughesi are protozoan parasites that infect horses, but they were not confirmed in donkeys up to this date. The aim of this study was to evaluate the exposure of donkeys (Equus asinus) to Neospora spp. using tachyzoites of N. caninum as antigen and employing two common serologic methods, IFAT and immunoblot. Sera from 500 donkeys were obtained from 30 municipalities in Bahia state and tested by IFAT. Two of 500 sera were positive for Neospora spp. by IFAT with antibody titers of 100, and recognized a 37kDa antigen in immunoblot. Approximately 22% of the samples showed strong apical reactions and/or incomplete fluorescence, what may cause confusion in the interpretation of IFAT. We concluded that Neospora spp. are possibly of minor importance for Brazilian donkeys. Future studies are necessary to prove that Neospora spp. can naturally infect donkeys.

Asininos (Equus asinus) são próximos filogeneticamente a equinos e podem ser infectados por vários patógenos de cavalos. Neospora caninum e Neospora hughesi são parasitos protozoários que infectam equinos, porém não foram confirmados em asininos até o momento. O objetivo deste estudo foi avaliar a exposição de asininos (Equus asinus) a Neospora spp., usando-se taquizoítos de N. caninum como antígeno e empregando-se duas técnicas sorológicas comuns para esta finalidade, reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e immunoblot. Soros de 500 asininos, obtidos em 30 municípios no Estado da Bahia, foram testados por meio da RIFI. Dois dos 500 soros foram positivos para Neospora spp. pela RIFI com títulos de anticorpos de 100, e reconheceram um antígeno de 37kDa no immunoblot. Aproximadamente, 22% das amostras apresentaram fortes reações apicais e/ou fluorescência incompleta, o que pode causar confusão na interpretação da RIFI. Conclui-se que Neospora spp. são, possivelmente, de pouca importância para asininos brasileiros. Estudos posteriores são necessários para provar que Neospora spp. podem causar infecção natural em asininos.

Comparison of an ELISA assay for the detection of adhesive/invasive Neospora caninum tachyzoites / Comparação de um ensaio de ELISA para a detecção de taquizoítas adesivos/invasivos de Neospora caninum

Neospora caninum belongs to the phylum Apicomplexa, the causative agent of neosporosis, which leads to economic impacts on cattle production. A common feature among apicomplexan parasites is the invasive process driven mostly by the parasite. As a first evaluation of candidate molecules that play a possible role by interfering in this invasive process, the in vitro invasion assay is a fast and direct way to screen future agonists or antagonists. This work involved the development of a new cell culture ELISA and transient β-galactosidase activity applied to the semi-quantitative detection of N. caninum in Vero cell culture. Cell culture ELISA is based on histochemistry and immunology, resulting in a colorimetric reaction. The β-galactosidase activity was obtained by the transient transfection of the lacZ gene under control of RPS13 promoter of N. caninum. These methods were used to evaluate the effects of temperature (37°C and 85°C) on the invasion and adhesion of tachyzoites. The three tested methods (real time PCR, β-galactosidase activity and ELISA) showed a similar pattern, indicating that different methods may be complementary.

Neospora caninum, parasita do filo Apicomplexa, é causador da neosporose, doença responsável por perdas econômicas importantes na pecuária. Um fator comum entre os apicomplexas é o processo de invasão majoritariamente dirigido pelo parasita. Dentre as primeiras avaliações de moléculas candidatas, que possivelmente interferem no processo de invasão, o ensaio de invasão in vitro é um meio rápido e direto de selecionar futuros agonistas ou antagonistas. Este trabalho desenvolveu um novo ELISA baseado em cultura (Cell-culture ELISA) e um ensaio que mede a atividade transiente de β-galactosidase, aplicados para a detecção semiquantitativa de N. caninum em células Vero. Cell-culture ELISA é baseado em histoquímica e imunologia, resultando em uma reação colorimétrica. A atividade da β-galactosidase foi obtida pela transfecção transiente do gene LacZ sob controle do promotor RPS13 de N. caninum. Esses métodos avaliaram os efeitos da temperatura (37°C e 85°C) sobre a invasão e adesão. Os três métodos testados (real time PCR, atividade de β-galactosidase e ELISA) mostraram um padrão similar, indicando que diferentes métodos podem ser complementares. Adicionalmente, esse ELISA é adequado para aplicação em laboratórios carentes de uma complexa estrutura para métodos de detecção moleculares.

Review of Neospora caninum and neosporosis in animals

Neospora caninum is a coccidian parasite of animals. It is a major pathogen for cattle and dogs and it occasionally causes clinical infections in horses, goats, sheep, and deer. Domestic dogs are the only known definitive hosts for N. caninum. It is one of the most efficiently transmitted parasite of cattle and up to 90% of cattle in some herds are infected. Transplacental transmission is considered the major route of transmission of N. caninum in cattle. Neospora caninum is a major cause of abortion in cattle in many countries. To elicit protective immunity against abortion in cows that already harbor a latent infection is a major problem. This paper reviews information on biology, diagnosis, epidemiology and control of neosporosis in animals.