Estudio inmunocitoquímico del complejo-receptor de superficie celular del subgrupo de las integrinas ß1 en la proliferación intraocular / Immunocitochemical study of receptor-complex of cellular surface of beta 1 integrins subgroup in intraocular proliferation

La interacción entre la matriz extracelular y los componentes celulares es la principal responsible de la diferenciación celular y del desarrollo tisular. Mediante técnicas inmunocitoquímicas para microscopía óptica y electrónica, hemos estudiado el receptor de membrana celular del subgrupo Beta1 de la familia de las integrinas, la laminina (LN) y la fibronectina (FN) en membranas epirretinianas (MER) de pacientes sometidos a vitrectomía portadores de una vitreorretinopatía proliferativa (VRP) como complicación de un desprendimiento de retina, y en membranas vítreorretinianas fibrovasculares de la retinopatía diabética proliferativa (RDP). Los resultados obtenidos indican que las MER presentan el complejo Beta1 en disposición pericelular, unido a la membrana plasmática. La LN y la FN se hallan en la matriz extracelular en estrecha relación con la integrina. El receptor parece ser observado más frecuentemente en las MER de hasta 2 meses de evolución cuando comparadas a las de mayor tiempo de evolución. Por otro lado, dicha integrina se encuentra localizada en los capilares de neoformación de las membranas fibrovasculares obtenidas de pacientes diabéticos. Estos hallazgos aportan nuevos datos para una mejor comprensión de los mecanismos fisiopatológicos de la interacción célula-sustrato en el proceso proliferativo intraocular.

Isolation of a type IV collagen binding protein from human platelets.

In order to study the molecular basis of platelet interaction with collagen IV of the basement membrane separating the arterial endothelium from the underlying subendothelial connective tissue, the possibility of presence of platelet membrane protein with affinity to type IV collagen was examined by subjecting the platelet membrane extract to affinity chromatography on collagen IV-sepharose. Urea (4 M) eluate was found to contain a protein with an apparent mol. wt of 68 kDa. The radioiodinated protein was isolated and used to test its specificity. By dot blot assay on nitrocellulose disks and solid-phase assays, the 68 kDa protein was found to bind with high affinity to collagen IV. Lack of significant binding to fibronectin and laminin when compared to albumin control indicated its high specificity for collagen. The radioiodinated protein was inserted into egg yolk lecithin liposomes. While these liposomes attached to microtitre plates coated with collagen IV, there was no significant binding to fibronectin or laminin coated wells, suggesting the membrane associated character of the protein as well as its specificity for collagen. These results indicate that presence of a 68 kDa protein in platelet membrane which interacts with very high specificity to collagen IV.