Efficacy of nitazoxanide against toxocara canis: larval recovery and humoral immune response in experimentally infected mice / Eficácia da nitazoxanida contra Toxocara canis: recuperação larvária e resposta imune humoral em camundongos experimentalmente infectados

SUMMARYThe efficacy of nitazoxanide (NTZ) against toxocariasis was investigated in an experimental murine model and results were compared to those obtained using mebendazole. Sixty male BALB/c mice, aged six to eight weeks-old, were divided into groups of 10 each; fifty were orally infected with 300 larvaed eggs of T. canisand grouped as follows, G I: infected untreated mice; G II: infected mice treated with MBZ (15 mg/kg/day) 10 days postinfection (dpi); G III: infected mice treated with NTZ (20 mg/kg/day) 10 dpi; G IV: infected mice treated with MBZ 60 dpi; G V: infected mice treated with NTZ 60 dpi; GVI: control group comprising uninfected mice. Mice were bled via retro-orbital plexus on four occasions between 30 and 120 dpi. Sera were processed using the ELISA technique to detect IgG anti- Toxocaraantibodies. At 120 dpi, mice were sacrificed for larval recovery in the CNS, liver, lungs, kidneys, eyes and carcass. Results showed similar levels of anti- ToxocaraIgG antibodies among mice infected but not submitted to treatment and groups treated with MBZ or NTZ, 10 and 60 dpi. Larval recovery showed similar values in groups treated with NTZ and MBZ 10 dpi. MBZ showed better efficacy 60 dpi, with a 72.6% reduction in the parasite load compared with NTZ, which showed only 46.5% reduction. We conclude that administration of these anthelmintics did not modify the humoral response in experimental infection by T. canis. No parasitological cure was observed with either drug; however, a greater reduction in parasite load was achieved following treatment with MBZ.

RESUMOFoi investigada a eficácia da nitazoxanida (NTZ) na toxocaríase murina experimental e os resultados comparados com os obtidos usando mebendazol (MBZ). Sessenta camundongos BALB/c machos, com idade entre seis e oito semanas foram divididos em grupos de 10 cada, 50 foram infectados oralmente com 300 ovos larvados de T. canise agrupados a seguir: GI: camundongos infectados não tratados; GII: camundongos infectados tratados com MBZ (15 mg/kg/dia) 10 dias pós-infecção (dpi); GIII: camundongos infectados tratados com NTZ (20 mg/kg/dia) 10 dpi, GIV: camundongos infectados tratados com MBZ 60 dpi; GV: camundongos infectados tratados com NTZ 60 dpi; GVI: controle não infectado. Os camundongos foram sangrados via plexo retro orbitário em quatro ocasiões entre o 30º e 120º dpi. Os soros foram processados pela técnica de ELISA para detecção de anticorpos IgG anti- Toxocara.Aos 120 dpi, os animais foram sacrificados para a recuperação larvária do SNC, fígado, pulmões, rins, olhos e carcaça. Os resultados mostraram níveis similares de anticorpos IgG anti- Toxocaraentre os camundongos infectados mas não submetidos a tratamento e os grupos infectados e tratados com MBZ ou NTZ, aos 10 e 60 dpi. Os valores da recuperação larval foram similares nos grupos tratados com NTZ e MBZ 10 dpi. MBZ mostrou melhor eficácia aos 60 dpi, com redução de 72,6% da carga parasitária comparada com NTZ, que mostrou redução somente de 46,5%. Concluímos que a administração destes anti-helmínticos não modificou a resposta humoral na infecção experimental por T. canis. Não foi observada cura parasitológica com nenhuma das drogas; porém maior redução na carga parasitária foi obtida após o tratamento com MBZ.

ANTHELMINTIC ACTIVITY OF LAPACHOL, β-LAPACHONE AND ITS DERIVATIVES AGAINST Toxocara canis LARVAE / Atividade anti-helmíntica do lapachol, β-lapachona e derivados contra larvas de Toxocara canis

Anthelmintics used for intestinal helminthiasis treatment are generally effective; however, their effectiveness in tissue parasitosis (i.e. visceral toxocariasis) is moderate. The aim of this study was to evaluate the in vitro activity of lapachol, β-lapachone and phenazines in relation to the viability of Toxocara canis larvae. A concentration of 2 mg/mL (in duplicate) of the compounds was tested using microculture plates containing Toxocara canis larvae in an RPMI-1640 environment, incubated at 37 °C in 5% CO2 tension for 48 hours. In the 2 mg/mL concentration, four phenazines, lapachol and three of its derivatives presented a larvicide/larvistatic activity of 100%. Then, the minimum larvicide/larvistatic concentration (MLC) test was conducted. The compounds that presented the best results were nor-lapachol (MLC, 1 mg/mL), lapachol (MLC 0.5 mg/mL), β-lapachone, and β-C-allyl-lawsone (MLC, 0.25 mg/mL). The larvae exposed to the compounds, at best MLC with 100% in vitro activity larvicide, were inoculated into healthy BALB/c mice and were not capable of causing infection, confirming the larvicide potential in vitro of these compounds.

Os anti-helmínticos empregados no tratamento das helmintoses intestinais, de modo geral, são eficazes, porém nas parasitoses teciduais, como é o caso da toxocaríase visceral, a eficácia é moderada. Este estudo teve como objetivo avaliar in vitro a atividade do lapachol, β-lapachona e fenazinas derivadas da β-lapachona sobre a viabilidade de larvas de Toxocara canis. Os compostos foram testados na concentração de 2 mg/mL (em duplicata) em placas de microcultivo, contendo larvas de T. canis em meio RPMI-1640, sendo incubados, a 37 °C, em tensão de CO2 de 5%, por 48 horas. Na concentração de 2 mg/mL, quatro fenazinas, o lapachol e três derivados, apresentaram atividade larvicida/larvostática de 100%. A seguir, foi realizado o teste de concentração larvicida/larvostártica mínima (CLM). Os compostos que apresentaram os melhores resultados foram o nor-lapachol (CLM, 1 mg/mL), lapachol (CLM, 0,5 mg/mL), a β-lapachona e a β-C-alil-lausona (CLM, 0,25 mg/mL). As larvas expostas aos compostos, na melhor CLM 100% in vitro foram inoculadas em camundongos BALB/c saudáveis não sendo capazes de causar infecção, confirmando o potencial larvicida in vitro desses compostos.

Toxocarosis neurológica: descripción de un caso clínico / Neurologic toxocariasis: description of clinical case

La toxocarosis es una parasitosis producida por los nematodos Toxocara canis y Toxocara felis cuyos huéspedes naturales son los cánidos y félidos domésticos, respectivamente. La infección humana ocurre de manera accidental por la ingesta de huevos larvados presentes en la tierra, arena, agua o alimentos contaminados. Abarca una diversidad de presentaciones clínicas que sumadas a la inespecifidad de la sintomatología y a la dificultad para acceder a un diagnóstico de laboratorio preciso, lleva a que la mayoría de los profesionales no piensen en esta helmintiasis. EL presente trabajo describe un caso clínico de toxocarosis neurológica, diagnóstica, tratamiento y epidemiología. Paciente femenino de 42 años de edad, con historia de contacto íntimo con cachorros y perras preñadas que desarrolló compromisos neurológicos (paraparesia y vejiga neurógena espástica) asociada a leucocitosis con eosinofilia intensa y persiste (11.766 eosinófilos/mm3), hepatomegalia y serología positiva a Toxocara canis determinada por Elisa y confirmada por Western-blot. Tratamiento: albendazol 400 mg/ día cada 12 hs por vía oral durante 7 días y metilprednisona 80 mg/ día por vía oral durante 3 semanas seguidas de una disminución paulatina de la dosis. El estudio epidemiológico consistió en diagnóstico serológico a convivientes de la paciente, análisis parasitológicos a las heces de su perro y a muestras de tierra procedentes de su domicilio, resultando en todos casos positivos para Toxocara canis

Avaliaçäo da eficácia do albendazol sobre a larva migrans visceral murina experimental por Toxocara canis / Evaluation of the efficacy of albendazol over the experimental murine larva migrans

Para realizaçäo deste trabalho foram utilizados 45 camundongos da linhagem C57B1/6, divididos em 2 grupos, sendo o do Grupo I com 30 animais e do GrupoII com 15 animais. Cada animal foi inoculado com 10ü ovos infectantes de Toxocara canis, via oral, através de uma sonda introduzida diretamente no esôfago. Os ovos utilizados como inóculo foram obtidos por dissecaçäo de exemplares fêmeas do parasito e mantidos em soluçäo formaldeído a 1(pôr cento), por um período de 40 dias, até a obtenção do estágio infectante. Os animais do Grupo I foram submetidos a tratamento com Albendazol após o 7º dia de infecçäo, na dosagem de 400mg/Kg/dia, por via oral, durante 30 dias. Os camundogos do Grupo II(grupo controle) näo foram tratados com a droga. No 5§ dia após o término do tratamento, todos os animais foram necropsiados sendo examinados cérebro e olhos através da técnica de compressäo entre lâminas, ao microscópio óptico. Foi observado nível de eficácia de 76,36(pôr cento). Concluímos que o esquema terapêutico utilizado neste experimento foi ineficaz no tratamento da Toxocaríase experimental