Atividade biológica do extrato hidroalcoólico de Bauhinia forficata Link sobre Herpetomonas samuelpessoai (Galvão. ) Roitman / Biologic activity of the hydroalcoholic extract of Bauhinia forficata Link on Herpetomonas samuelpessoai (Galvão. ) Roitman

Inúmeros esforços têm sido dirigidos para conferir às plantas seu real papel e valor na terapia. Este estudo teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana, mutagênica, toxicidade, e os efeitos no crescimento e diferenciação de Herpetomonas samuelpessoai, do extrato hidroalcoólico de Bauhinia forficata. Para avaliar a atividade antimicrobiana foi realizado o teste de difusão em ágar, bem como a determinação das concentrações inibitória (CIM) e microbicida mínimas (CMM). O potencial clastogênico e/ou aneugênico, in vivo, foi avaliado usando o teste do micronúcleo em medula óssea de camundongos Swiss albinus. Foi determinada também a dose letal média (DL50). O extrato inibiu o crescimento de oito bactérias, mostrando-se mais ativo para Gram-positivas e não foi eficiente para os fungos, tendo sido ativo nas concentrações de 2000, 1000, 500 e 250 mg/mL contra os microrganismos testados. Os resultados mostraram que nas concentrações administradas (500, 1000 e 2000 mg/Kg), não houve aumento estatisticamente significativo de micronúcleos. Não houve ação no crescimento e diferenciação de Herpetomonas samuelpessoai nas concentrações testadas. Com relação a DL50, o extrato não apresentou toxicidade.

Numerous efforts have been directed to discover the role and the value of plants in therapy. This work aimed to evaluate the antimicrobial activity, mutagenicity, toxicity and effects on growth and differentiation of Herpetomonas samuelpessoai of the hydroalcoholic extract of Bauhinia forficata. To evaluate the antimicrobial activity it was performed the agar diffusion test, minimum inhibitory (MIC) and microbicidal (MMC) concentrations. The in vivo clastogenic and / or aneugênic potential was evaluated using the micronucleus test in mice bone marrow Swiss albinus. It was also determined the median lethal dose (LD50). The extract inhibited the growth of eight bacteria, being more active against Gram-positiveones, and was not active against fungi. The microorganisms tested had MIC concentrations of 2000, 1000, 500 and 250 mg / mL. The results showed that the tested concentrations (500, 1000 and 2000 mg / kg) had no statistically significant increasedthe micronucleus. There was no action on the growth and differentiation of Herpetomonas samuelpessoai at the concentrations tested. In respect to the LD50, the extract showed no toxicity.

Gingko biloba leaves extract on growth and morphology of trypanosomatids / Efecto del extracto de las hojas de Gingko biloba en el crecimiento y la morfología de tripanosomátidos

Gingko biloba has been one of the most used medicinal plants all over the world in the past years. In this study, our group has studied the effect of a hydroethanolic extract from the aerial parts of this plant on the growth and morphological differentiation of trypanosomatids. Herpetomonas samuelpessoai and Herpetomonas sp were used in this study. The extract was obtained in a Soxhlet apparatus (50 oC, 2 hours). This extract was aseptically added to Roitman’s medium in different concentrations (4, 20, 40, 60, 80 and 100 mg/ml). The growth rate was determined using a Newbauer chamber to count numbers of cells after the extract inoculation (24 and 72 hours later). Smears stained by the Panotic method was used to determine the percentages of pro, para and opisthomastigote forms. The extract inhibited Herpetomonas sp growth in concentrations higher than 20 mg/ml. H. samuelpessoai has been inhibited in doses higher than 40 mg/ml. No morphological differentiation was observed in Herpetomonas sp cell. However, morphological differentiations could be noticed in H. samuelpessoai cell using doses higher than 40 mg/ml. These alterations are probably related to the cell division process, since cells with 3 or 4 nucleus were observed. Also, cytoplasmatic expansions, representing unsuccessful process of cell division were frequently found out. Further ultrastructural analysis using a transmission electron microscope showed cells with homogeneous nucleus or the absence of it. Protozoan protein profile was also analyzed. It was possible to notice changes in both trypanosomatids used in this study. H. samuelpessoai has shown over expression and accumulation of proteins which its degradation is essential to continue the cell differentiation. Also, it is possible to suggest that this extract acts through the modulation of the genetic expression and may be harmful to human cells if not purified.

Gingko biloba es una de las plantas medicinales más utilizadas en todo el mundo en los últimos años. En este estudio, nuestro grupo ha estudiado el efecto de un extracto hidroetanólico de la parte aérea de esta planta sobre el crecimiento y la diferenciación morfológica de tripanosomátidos. Herpetomonas samuelpessoai y Herpetomonas sp se utilizaron en este estudio. El extracto se obtuvo en un aparato Soxhlet (50° C/2 horas). Este extracto se agregó asépticamente a medio Roitman en diferentes concentraciones (4, 20, 40, 60, 80 y 100 mg /ml). La tasa de crecimiento se determinó utilizando una cámara de Newbauer para contar el número de células después de la inoculación de extracto (24 y 72 horas más tarde). Frotis teñidos por el método Panotic se utilizó para determinar los porcentajes de pro, para y las formas opistomastigota. El extracto inhibió el crecimiento Herpetomonas sp en concentraciones superiores a 20 mg /ml. H. samuelpessoai se ha inhibido en dosis superiores a 40 mg /ml. No se observó diferenciación morfológica en la celda Herpetomonas sp. Sin embargo, las diferenciaciones morfológicas se pudo observar en la celda H. samuelpessoai con dosis superiores a 40 mg /ml. Estas alteraciones son probablemente relacionado con el proceso de división celular, ya que las células con 3 o 4 núcleos se observaron. Además, las expansiones citoplasmáticas, lo que representa el proceso fallido de la división celular se encontraron con frecuencia hacia fuera. Un análisis más detallado ultraestructural usando microscopio electrónico de transmisión mostró células con núcleo homogéneo o la ausencia de ella. El perfil de proteínas por Protozoarios también se ha analizado. Fue posible notar cambios tanto en tripanosomátidos utilizados en este estudio. H. samuelpessoai ha demostrado a lo largo de expresión y la acumulación de proteínas que su degradación es esencial para continuar con la diferenciación celular. Además, es posible sugerir que este extracto...

Effect of sphingosine and phorbol-12-myristate-13-acetate on the growth and dimethylsulfoxide-induced differentiation in the insect trypanosomatid Herpetomonas samuelpessoai

We investigated the effect of two modulators of protein kinase C, sphingosine and phorbol-12-myristate-13-acetate (PMA), on the growth and dimethylsulfoxide (DMSO)-induced differentiation in Herpetomonas samuelpessoai. Sphingosine did not stimulate the transformation of undifferentiated-promastigotes in differentiated-paramastigotes. PMA alone or in association with DMSO increased the number of paramastigotes in comparison to control cells. DMSO inhibited the parasite growth (35 percent) and several unusual morphological features resembling aberrant cell division were observed. Sphingosine did not significantly reduce the growth in contrast to PMA. Collectively, our results demonstrated that the reduction of the proliferation translates in an increase of the differentiation rate in the insect trypanosomatid H. samuelpessoai.

Biological effects of extracts obtained from Stryphnodendron adstringens on Herpetomonas samuelpessoai

We report the effect of Stryphnodendron adstringens on the trypanosomatid Herpetomonas samuelpessoai. The parasites were grown at 28ºC in a chemically defined medium containing crude extract and fractions at concentrations from 100 to 5000 µg/ml obtained from S. adstringens. Concentrations of 500, 1000, 2500, and 5000 µg/ml both crude extract and semi-purified fraction progressively inhibited the protozoans' growth. At a concentration of 100 µg/ml, crude extract or a semi-purified (F3) fraction did not affect the growth of the protozoans. The F3-9 - F3-12 sub-fractions, at a concentration of 1000 µg/ml, also showed increased inhibitory activity on H. samuelpessoai. The IC50 of the crude extract and the F3 fraction were 538 and 634 µg/ml, respectively. Ultrastructural and enzymatic alterations in the trypanosomatids were also evaluated. H. samuelpessoai cultivated in the presence of IC50 crude extract showed considerable ultrastructural alterations, such as marked mitochondrial swelling with a large number of cristae and evident Golgi complex vesiculation, as observed by transmission electron microscopy. Cells exposed to 538 µg/ml of crude extract at 28ºC for 72 h, showed decreased activity of the enzyme succinate cytochrome c reductase, a typical mitochondrion marker, as compared to untreated cells.

Efecto de orto-naftoquinonas lipofílicas sobre el crecimiento y la producción de peróxidos por Leptomonas seymouri y Crithidia fasciculata / Effect of lipophilic ortho-naphthoquinones on the growth and production of peroxides by Leptomonas seymouri and Crithidia fasciculata

Las §-naftoquinonas CG 8-935, CG 9-442, CG 10-248 y las mansonomas A, C, E y F inhiben el crecimiento de L. seymouri (LS) y C. fasciculata (CF). Las mansononas más activas fueron E y F (I50, 0.1 y 0.4 *M con LS y 0.3-1.2 *M con CF), con actividades citotóxicas iguales o superiores a las de las o-quinonas CG. La incubación de los protozoarios con las quinonas CG y las quinonas E y F indujo la producción de H2O2 y O2. Menor producción se obtuvo con la perezona y la priminina (p-benzoquinonas utilizadas como testigo). El efecto de las o-quinonas fue proprocional a su concentración y con las mansononas E y F la producción de O2 fue 4-5 veces mayor que la de H2O2. Diferencias menores se observaron con las quinonas CG. La producción de peróxidos resultó de un ciclo redox, iniciado por una fase anaeróbica (I) en la que se formaron los quinoles, seguida por una fase aeróbica (II) en la que se formó O2 y H2O2. Con las mansononas E y F, y las quinonas CG, la velocidad de la fase II fue superior o igual a la de la fase I pero, con las mansononas A y C, la velocidad de oxidación de los quinoles fue 8-10 veces menor que la de reducción de las quinonas. Esas diferencias concuerdan con a) la oxidación in vitro de los quinoles; b) su capacidad para producir O2 y c) su capacidad para inducir la quimiluminiscencia de la lucigenina. Los resultados descriptos demuestran la intervención de oxi-radicales en la citotoxicidad de las §-quinonas, no obstante la existencia de catalasa y otras enzimas protectoras en LS y CF, pero no se descartan otros mecanismos. La sensibilidad de ambos organismos a las quinonas estudiadas, similar o superior a la del T. cruzi, autoriza a utilizar a LS y CF como modelos para el ensayo de quimioterápicos antichagásicos

Infection of a mammal by monogenetic insect trypanosomatids (Kinetoplastida, trypanosomatidae)

Tripanosomatídeos monogenéticos de insetos, dos gêneros Crithidia, Leptomonas e Herpetomonas foram inoculados no lumen das glândulas de cheiro do gambá ae aí se multiplicaram como em culturas axênicas durante muitos meses. No soro dos animais foram detectados anticorpos específicos mas näo houve evidência de invasäo dos tecidos pelos parasitas

From a mono to a digenetic life-cycle: how was the jump for flagellates of the family trypanosomatidae?

Foi verificado que tanto espécies digenéticas do gênero Trypanosoma como espécies de tripanosomatídeos monogenéticos de insetos, podem desenvolver-se no lúmen das glândulas de cheiro do gambá, reproduzindo o ciclo que fazem no tubo digestivo dos insetos que lhes servem de hospedeiros e/ou transmissores. Com base nesses achados especula-se sobre o ciclo incompletamente conhecido de muitos tripanosomas de mamíferos e sobre a evoluçäo da família Trypanosomatidae

Novo meio líquido autoclavável, isento de sangue, para isolamento primário de Leishmanias de lesöes tegumentares: I-sua potencialidade no estudo da biologia dos tripanosomatídeos / A new autoclavable culture medium, devoid of blood for isolation of Leishmania from skin lesions: I - its potentiality in the study of the biology of Trypanosomidae

Novo meio, inicialmente denominado, BHYMI (Brain-heart-yeast-meat infusion) logo Rq., constante basicamente de extrato de cérebro, extrado de coraçäo, estrato de carne, extrato de levedura, mais glicose, cloreto de sódio e água, é meio monofásico de baixo custo, disponível no comércio ou facilmente preparado com matérias primas locais, no laboratório, de fácil esterilizaçäo, claro, facilitando a coleta e contagem dos organismos cultivados; foi usado, inicialmente, como a fase líquida dos meios difásicos NNN ou Ducrey, logo como meio de cultura único (exclusivo) para cultivo de leishmanias. É capaz de isolar primariamente leishmania de lesöes, em proporçäo bastante razoáveis, manter cepas isoladas e de funcionar mesmo após ser guardado por 12 meses à temperatura ambiente, como líquido ou por mais tempo quando liofilizado. Seu pH ótimo é de 7.4 a 7.6. Quando enriquecido com soro fetal bovino (S.F.B) na proporçäo de 5, 10, 20 e/ou 30 pôr cento potencia o crescimento das cepas de leishmanias e permite o cultivo de Trypanossomas sp; usado em temperatura mais elevada condiciona o aparecimento de formas amastigotas dos tripanosomatídeos. Quando associado a soro de pato e/ou na presença de cloridrato de tetraciclina estimula a metaciclogenese do Trypanosoma cruzi. Associado ao sangue (Plasma e/ou soro) de galinha estimula a transformaçäo de promastigota de leishmania sp para amastigota em temperatura adequada (35º C). Enriquecido com carväo de sangue de feto bovino, de bovino adulto e de pato ("Charcoal" - sangue dissecado pelo calor lento e permanente, desidratado ou näo, previamente, a vácuo, e moído finamente, para se transformar em pó) - permite o crescimento exuberante de Trypanosomatídeos e mantém os atributos que soros e plasmas frescos ou conservados conferem ao meio, sendo muito bom para manutençäo e crescimento de Trypanosoma cruzi. Este meio pode ser usado como difásico sendo incorporado à peptona ou ágar, como base, tendo como meio líquido o próprio meio, soros consevados de boi, SFB ou soro de pato, meio 199, meio de Grace ou suplemento líquido de Hanks, dependendo da finalidade do cultivo. A associaçäo de extrato de flebotomíneos ou de triatomíneos ao meio permitiu também crescimento aumentado das leishmanias