Perfil de metilação do DNA em genes relacionados à resposta imune na periodontite generalizada / DNA methylation profile of genes related to immune response in generalized periodontitis

RESUMO

A periodontite é uma doença inflamatória crônica, multifatorial, associada com a disbiose do biofilme dental e caracterizada pela destruição dos tecidos de suportes dos dentes. Embora a presença das bactérias seja essencial na patogênese da periodontite, fatores do hospedeiro, como os genéticos e epigenéticos e fatores ambientais e adquiridos participam do processo. Eventos epigenéticos, como a metilação do DNA, podem estar relacionados ao desenvolvimento de doenças com perfil inflamatório. Devido ao importante papel da resposta do hospedeiro na patogênese da periodontite, o objetivo do presente estudo foi investigar o perfil de metilação de genes relacionados à resposta imune em tecidos gengivais de pacientes com periodontite generalizada (PG) em comparação com indivíduos saudáveis. Métodos: Tecidos gengivais foram coletados de 20 indivíduos com PG e 20 indivíduos sem periodontite, como controle. O DNA genômico foi extraído e submetido a digestões enzimáticas. Uma triagem inicial utilizando um painel de genes envolvidos com a resposta imune foi realizada em pools contendo seis amostras de cada grupo. Os genes que apresentaram diferentes níveis de metilação entre os grupos foram selecionados para os ensaios individuais para validação. Resultados: Os resultados mostraram um perfil não metilado na maioria dos genes avaliados nos dois grupos. Os genes MALT1, LTB e STAT5 apresentaram um perfil de metilação parcial no controle comparado ao grupo PG. Ensaios individuais em um número maior de amostras (n = 20, cada grupo) confirmaram a hipometilação do STAT5 no grupo PG comparado ao grupo controle (p <0,001). Conclusão: A PG está associada à hipometilação do gene STAT5. Novos estudos são necessários para avaliar o impacto funcional desses achados.

ABSTRACT

Background and objective: Epigenetic events, as the DNA methylation, may be related to development of diseases with inflammatory profile. Due to the important role of host's response in the pathogenesis of periodontitis, the purpose of present study was to investigate the methylation profile of genes related to immune response in gingival tissues from patients with generalized periodontitis (GP) compared to healthy individuals. Methods: Gingival tissues were collected from 20 individuals with GP and 20 healthy individuals. Genomic DNA was extracted and submitted to enzymatic digestions. An initial screening using a panel of genes involved with the response immune was performed in pools containing six samples of each group. Genes that presented different levels of methylation between the groups were selected for individual assays for validation. Results: The array results showed an unmethylated profile in the majority of genes evaluated in both groups. MALT1, LTB and STAT5 genes presented a profile of partial methylation in the control compared to GP group. Individual assays in a larger number of samples (n=20, each group) confirmed the hypomethylation of STAT5 in the GP group compared to control group (p<0.001). Conclusion: GP is associated with hypomethylation of the STAT5 gene. Further studies are necessary to evaluate the functional impact these findings.