Immunofluorescence Analysis of Estrogen and Progesterone Receptors and Ki-67 Nuclear Protein in Canine Uteri Treated with Medroxyprogesterone Acetate During Anestrus / Análisis de Inmunofluorescencia de Receptores de Estrógeno y Progesterona y Proteína Nuclear Ki-67 en Úteros Caninos Tratados con Acetato de Medroxiprogesterona Durante el Anestr

ABSTRACT

SUMMARY: Estradiol and progesterone receptors play an essential role in the changes occurring in the uterus during the estrus cycle in dogs (Canis lupus familiaris). In order to investigate the potential effect of progestational agent medroxyprogesterone acetate (MPA) when is used during anestrus on the expression of estradiol receptors [ER], progesterone receptors [PR] and nuclear protein Ki67, we evaluated uterine tissue immunohistochemically. Uteri were grouped as nulliparous (control, n=11), multiparous (n=11) and treated with MPA (n=11; nulliparous with two treatments; 5mg/kg; i.m.). The amount and location of PR, ER and Ki67 were studied on the epithelial surface, apical and basal regions of the endometrium and myometrium using immunohistochemical techniques with a spectral confocal microscope and analyzed by ANOVA. Differences in ER were observed between the multiparous and MPA-treated groups in the apical region of the endometrium (p=0.0022). Differences in cell proliferation were detected between the nulliparous and multiparous groups (p=0.0037) and nulliparous and MPA-treated groups (p=0.0003) in the basal region of the endometrium. In conclusion, two doses of MPA (5mg/kg; i.m.) do not have a significant effect on the expression of ER and PR; however, they inhibit cell proliferation in the basal region of the endometrium, which includes the stroma, subepithelial cell layer, compact layer, and spongy layer. The clinical and long-term effect of this treatment should be evaluated in subsequent studies.

RESUMEN

Los receptores de estradiol y progesterona juegan un rol fundamental en los cambios que se producen en el útero durante el ciclo estral de las perras (Canis lupus familiaris). El objetivo de este estudio fue evaluar las expresiones de ER-a y PR en el útero y la proliferación de células endometriales detectando la expresión nuclear de la proteína Ki67 en perras expuestas a la progestina sintética MPA y compararlas con perras nulíparas y multíparas expuestas a progesterona luteal. Úteros fueron agrupados como nulíparas (control, n=11), multíparas (n=11) y tratadas con MPA (n=11; nulíparas con dos tratamientos; 5 mg/kg; i.m.). La expresión de PR, ER-a y Ki67 fue evaluada en la regiones apicales y basales del endometrio y miometrio con un microscopio confocal espectral. Se observó diferencias en ER-a entre los grupos multíparas y tratados con MPA en la región apical del endometrio (p=0,0022). Se detectaron diferencias en la proliferación celular entre los grupos de nulíparas y multíparas (p=0,0037) y los grupos de nulíparas y tratados con MPA (p=0,0003) en la región basal del endometrio. En conclusión, dos dosis de MPA (5mg/kg; i.m.) no tienen un efecto significativo sobre la expresión de ER y PR; sin embargo, inhiben la proliferación celular en la región basal del endometrio, el cual incluye a estroma, capa de células subepiteliales, estratos compacto y esponjoso. El efecto clínico a largo plazo de este tratamiento debe ser evaluado en estudios posteriores.