TC45, un antígeno inmunogenéticamente definido de trypanosoma cruzi: estrategias cromatográficas para su purificación / TC45, an inmunogenetically defined trypanosoma cruzi antigen: chromatographic strategies for its purification

RESUMEN

Se describen tres protocolos para la purificación, mediante cromatografía de alta presión (FPLC), de Tc45, un antígeno inmunogenéticamente definido de T. cruzi. Dos protocolos implicaron separaciones por tamaño molecular y uno por intercambio iónico. La presencia de Tc45 en las fracciones obtenidas fue monitoreada con sueros anti T. cruzi generados en dos cepas congénitas de ratones (A.SW/A.CA) y en conejos. Aunque en las tres cromatografías se lograron grados importantes de purificación, el intercambio iónico dio los mejores resultados, al entregar una fracción que presentó una sola banda en inmunoelectrotransferencia, monitoreada con un suero de conejo poliespecífico. La metodología descrita tiene potencial para ser escalada y generar cantidades adecuadas de Tc45 para ser usado en ensayos de protección activa, secuenciación y obtención de anticuerpos monoclonales