Construção e análise de mutantes fluorescentes da troponina I / Construction and analysis of Troponin I fluorescence mutants

RESUMO

A troponina (Tn) regula a contração do músculo estriado esquelético de vertebrados. Ela é composta de três subunidades troponina I (TnI), troponina C (TnC) e troponina T (TnT). A TnI tem a função inibitória que é neutralizada pela ligação de Ca²+ nos sítios regulatórios do N-domínio da TnC, e a TnT posiciona o complexo no filamento fino. Para monitorar o sinal do Ca²+ sendo transmitido da TnC para a TnI as propriedades espectrais únicas do 5-hidroxitriptofano (5HW) foram utilizadas. O 5HW foi incorporado em mutantes pontuais da TnI com um único códon para triptofano. Foram identificadas duas sondas espectrais intrínsicas na TnI capazes de detectar a ligação de Ca²+ na Tn as TnIs com 5HW nas posições 100 e 121...