Cultura primária de condrócitos articular humana em monocamada / Culture of human articular chondrocyte in monolayer
Rev. Inst. Adolfo Lutz
; 62(3): 221-226, 2003. ilus, tab
Article
in Pt
| LILACS, SES-SP
| ID: lil-401284
Responsible library:
BR91.2
RESUMO
O objetivo deste trabalho foi padronizar a metodologia para obtenção de cultura primária de condrócitos de cartilagem hialina articular humana para sua utilização em transplante autólogo. Foram selecionados cinco pacientes do Instituto de Ortopedia e Traumatologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo (IOT-HC-FMUSP) sem doença degenerativa articular, com indicação de cirurgia artroscópica para correção de afecção do ligamento cruzado anterior do joelho. Os fragmentos de cartilagem articular pesando aproximadamente 300-500 mg foram colocados em placas de Petri contendo meio de Eagle modificado por Dulbecco's (DMEM) com 40ug/ml de gentamicina. Cada fragmento foi cortado e colocado em 2mg/ml de colagenase diluída em meio DMEM com 10 por cento de soro fetal bovino (SFB). As células foram isoladas e cultivadas em frasco de cultura T25 em meio DMEM suplementado com 10 por cento de SFB. As células aderiram ao frasco de cultura após 24h e após o 3º dia de cultivo as células apresentavam morfologia elipsóide e estrelada. As culturas foram fixadas e coradas intensamente com azul de toluidina sugerindo que as células iniciaram a síntese de uma nova matriz extracellular. A curva de crescimento mostrou que a razão de crescimento foi em torno do segundo e terceiro dia de cultivo, com a duplicação do número de células semeadas. As culturas apresentaram alta viabilidade celular após o congelamento celular em nitrogênio líquido
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Index:
LILACS
Main subject:
In Vitro Techniques
/
Cells, Cultured
/
Chondrocytes
Limits:
Humans
Language:
Pt
Journal:
Rev. Inst. Adolfo Lutz
Journal subject:
MICROBIOLOGIA
/
SAUDE PUBLICA
Year:
2003
Type:
Article