Análise da virulência de isolados de Paracoccidioides brasiliensis, contendo seqüências conhecidas do gene PbGP43: ptodução e caracterização de isoformas recombinantes de gp43 / Virulence in mice of Paracoccidioides brasiliensis isolates bearing know PbGP43 genotypes: production and characterization of recombinant isoforms of gp43

RESUMO

O Para coccidioides brasiliensis é o fungo dimórfico térmico causador da paracoccidioidomicose (PCM) no homem. A glicoproteína gp43 é o principal antígeno diagnóstico do fungo, mas também elicita imunidade celular protetora em camundongos imunizados e é um potencial fator de virulência devido à sua propriedade adesiva. Em nosso laboratório foi previamente reportando um importante polimorfismo na sequência do exon 2 do PbGP43, o qual definiu 6 grupos genotipos (A a F). Dentre os 17 isolados fúngicos estudados Pb2, Pb3 e Pb4 apresentaram as seqüências mais polimórficas com 14 a 15 substituições. Esses isolados foram obtidos de pacientes com PCM crõnica e expressam proteína mais básica. Nós testamos a virulência de Pb2, Pb3 e Pb4 (genotipo A) em comparação com isolados carregando os outros genotipos D, E e F, incluindo Pb18. A infecção foi realizada em camundongos 1310.A pelas vias intraperitoneal (i.p.) com fungo adaptado in vitro, intratraqueal (i.t.) e intravenosa (i.v.) com fungos repuperados de órgãos. Esses três isolados provocaram baixa mortalidade e foram recuperados baixos números de leveduras dos animais infectados após os diferentes períodos de estudo. Pb3 adaptado in vivo causou infecção maior após 30 e 60 dias, no entanto a doença regrediu aos 120 dias. A resposta antigp43 elicitada por Pb2, Pb3 e Pb4 foi rica em IgG2a, IgG2b e IgG3, sugerindo uma tendência a resposta tipo Th1 (com IgG2a>IgG2b>IgG3). Esse resultado foi de acordo com uma maior presença de INF e menos IL-10 nos animais inoculados com Pb3. Os outros isolados provocaram doença progressiva e maior produção de anticorpos IgG1 e IgA, característicos de resposta Th2...