Evaluation of the Biological Behavior of Mucograft® in Human Gingival Fibroblasts: An In Vitro Study

ABSTRACT

Mucograft(r) is a resorbing porcine matrix composed of type I and type III collagen, used for soft tissue augmentation in guided tissue bony regeneration procedures. This in vitro study aimed to evaluate the biological behavior of Mucograft(r) in human gingival fibroblasts, as well as the ability of the matrix to induce production of extracellular matrix. Six resorbing Mucograft(r) matrices (MCG) were cut into 3 x 2 mm rectangles and 5 x 5 mm squares and were placed in 96- and 24-well plates, respectively. The control group (CTRL) consisted of cells plated on polystyrene without the MCG. After one, two, three and seven days, cell proliferation and viability were assessed using the Trypan exclusion method and MTT test, respectively. Type III collagen (COL 3A1) and vimentin (VIM) expression were also evaluated at 10 and 14 days, using Western blotting. Statistical analysis, using ANOVA with post hoc Bonferroni test, revealed that human gingival fibroblasts from MCG showed similar results (p>0.05) for proliferation and viability as the cells cultured on CTRL. After 14 days, a significant decrease in COL 3A1 expression (p<0.05) was observed when cultured with the MCG. VIM expression showed no significant difference at any time period (p>0.05). Although no increase in extracellular matrix secretion was observed in this in vitro study, Mucograft(r) presented cellular compatibility, being an option for a scaffold whenever it is required.

RESUMO

Resumo A Mucograft(r) é uma matriz reabsorvível, de origem suína, composta de colágenos do tipo I e III, utilizada para aumento de tecido mole em regeneração óssea guiada. Este estudo in vitro teve como objetivo avaliar o comportamento biológico da Mucograft(r), em fibroblastos gengivais humanos, bem como a indução da síntese de matriz extracelular. Seis matrizes reabsorvíveis de Mucograft(r) (MCG) foram cortadas em retângulos e quadrados medindo 3 x 2 mm e 5 x 5 mm e alocadas em placas de 96 e 24 poços, respectivamente. O grupo controle (CTRL) consistiu no plaqueamento celular em poliestireno, sem MCG. Após um, dois, três e sete dias, a proliferação e a viabilidade celular foram avaliadas utilizando o corante vital azul de Trypan e o teste MTT, respectivamente. Além disso, a expressão de colágeno tipo III (COL 3A1) e vimentina (VIM) foi avaliada após 10 e 14 dias, por meio de Western-blotting. Após análise estatística (Anova e pós teste de Bonferroni), pode-se observar que os fibroblastos gengivais humanos, cultivados sobre MCG, apresentaram proliferação e viabilidade semelhantes em comparação às células que foram cultivadas apenas no poliestireno (CTRL). Após 14 dias, notou-se uma diminuição significativa da expressão de COL 3A1 (p<0,05) quando as células foram cultivadas sobre a MCG. A expressão da VIM não mostrou diferença significativa em nenhum dos períodos estudados (p>0,05). No presente estudo in vitro pode-se concluir que apesar de não ter sido observado aumento da síntese de matriz extracelular, a Mucograft(r) apresentou compatibilidade celular, sendo uma opção de biomaterial em casos que o arcabouço é necessário.