hsa_circ_0140180 affects the migration and invasion of esophageal squamous cell carcinoma cells by regulating miR-1287-5p / 中国肿瘤生物治疗杂志

ABSTRACT

@#[摘 要] 目的：探讨hsa_circ_0140180在食管鳞状细胞癌（ESCC）细胞中的表达水平及对其细胞恶性生物学行为的影响与分子机制。方法：收集2018年11月至2019年3月间在南充市中心医院胸心外科手术切除的6对ESCC组织和对应癌旁组织并进行全转录组测序，筛选出在ESCC组织中低表达的hsa_circ_0140180；建立过表达hsa_circ_0140180的TE-1和KYSE30细胞，qPCR法检测hsa_circ_0140180在人正常食管上皮细胞、ESCC细胞中的表达，以及过表达hsa_circ_0140180后TE-1和KYSE30细胞中miR-1287-5p的表达；CCK-8法和FCM检测过表达hsa_circ_0140180对TE-1和KYSE30细胞增殖和周期的影响；划痕实验和Transwell实验检测过表达hsa_circ_0140180对TE-1和KYSE30细胞迁移和侵袭能力的影响，双荧光素酶报告实验验证hsa_circ_0140180与miR-1287-5p的靶向关系。WB法检测过表达hsa_circ_0140180对TE-1和KYSE30细胞中EMT相关蛋白的表达及PI3K-Akt通路的磷酸化水平的影响。结果：转录组测序和qPCR结果显示，hsa_circ_0140180在ESCC组织和细胞中呈低表达（P<0.05或P<0.01），并确认其闭合环状分子特征且定位于细胞质。过表达hsa_circ_0140180能明显抑制ESCC细胞的迁移及侵袭能力（P<0.05），但不影响其增殖和周期。双荧光素酶报告基因实验证实hsa_circ_0140180靶向结合miR-1287-5并负调控其表达（P<0.01）。过表达hsa_circ_0140180能显著上调TE-1和KYSE30细胞中E-cadherin的表达（（P<0.05），而显著下调Snail的表达（P<0.05）和PI3K-Akt通路的磷酸化水平（P<0.01或P<0.001）。结论：hsa_circ_0140180在ESCC细胞及组织中呈低表达，其可能通过调控miR-1287-5p表达来降低PI3K-Akt通路的磷酸化水平和抑制EMT进程，从而影响ESCC细胞的迁移及侵袭能力。