Assuntos
Antígenos de Bactérias/genética , Antígenos de Bactérias/imunologia , Antígenos de Bactérias/isolamento & purificação , Clonagem Molecular , Escherichia coli , Estatística como Assunto , Expressão Gênica , Genes Bacterianos , /biossíntese , Monócitos/imunologia , Mycobacterium leprae/genética , Mycobacterium leprae/imunologia , Mycobacterium leprae/isolamento & purificação , Peso Molecular , Precursores de Proteínas/genética , Precursores de Proteínas/imunologia , Precursores de Proteínas/isolamento & purificação , Proteínas de Bactérias/genética , Proteínas de Bactérias/imunologia , Proteínas de Bactérias/isolamento & purificaçãoRESUMO
A novel Mycobacterium leprae lipoprotein LpK (accession no. ML0603) was identified from the genomic database. The 1,116-bp open reading frame encodes a 371-amino-acid precursor protein with an N-terminal signal sequence and a consensus motif for lipid conjugation. Expression of the protein, LpK, in Escherichia coli revealed a 33-kDa protein, and metabolic labeling experiments and globomycin treatment proved that the protein was lipidated. Fractionation of M. leprae demonstrated that this lipoprotein was a membrane protein of M. leprae. The purified lipoprotein was found to induce production of interleukin-12 in human peripheral blood monocytes. The studies imply that M. leprae LpK is involved in protective immunity against leprosy and may be a candidate for vaccine design.
Assuntos
Antígenos de Bactérias/imunologia , Proteínas de Bactérias/imunologia , Interleucina-12/biossíntese , Lipoproteínas/imunologia , Proteínas de Membrana/imunologia , Mycobacterium leprae/imunologia , Precursores de Proteínas/imunologia , Sequência de Aminoácidos , Antígenos de Bactérias/genética , Antígenos de Bactérias/isolamento & purificação , Proteínas de Bactérias/genética , Proteínas de Bactérias/isolamento & purificação , Clonagem Molecular , Escherichia coli , Expressão Gênica , Genes Bacterianos , Humanos , Lipoproteínas/genética , Lipoproteínas/isolamento & purificação , Proteínas de Membrana/genética , Proteínas de Membrana/isolamento & purificação , Dados de Sequência Molecular , Peso Molecular , Monócitos/imunologia , Mycobacterium leprae/genética , Mycobacterium leprae/isolamento & purificação , Precursores de Proteínas/genética , Precursores de Proteínas/isolamento & purificação , Análise de Sequência de DNARESUMO
Pancreatic polypeptide, a 36-amino acid peptide hormone, is synthesized in pancreatic islets of Langerhans and acts as a regulator of pancreatic and gastrointestinal functions. We isolated cDNA clones encoding rat pancreatic polypeptide precursor from an islet cDNA library and determined their nucleic acid sequences. Rat pancreatic polypeptide was found to be flanked on the amino terminus by a putative signal peptide and on the carboxyl terminus by Gly-Lys-Arg followed by a 30-amino acid peptide. Nucleotide and amino acid sequences of the signal peptide and the pancreatic polypeptide of the rat were highly homologous to those of the human (Boel, E., Schwartz, T. W., Norris, K. E., and Fill, N. P. (1984) EMBO J. 3, 909-912). On the other hand, the rat carboxyl-terminal peptide differed markedly from the corresponding domain of the human precursor and did not contain any sequence similar to the icosapeptide, which has so far been known to be a second stable product from mammalian pancreatic polypeptide precursors (Schwartz, T. W., Hansen, H. F., Hakanson, R., Sundler, F., and Tager, H. S. (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 81, 708-712). The mosaicism of sequence conservation and divergence in prepropancreatic polypeptides may be a unique example in the evolution of prohormones.