Detecção do risco de desenvolver reação mediante avaliação dos niveis de anticorpos anti-PGL-1 e anti-NDO-LID-1 em amostras de soros de pacientes com hanseniase, na vigência e na ausência de episódios reacionais / Detection of the risk of developing reaction by evaluating levels of anti-PGL-1 and Anti-NDO-LID-1 antibodies, in serum samples of leprosy patients, in the effectiveness and in the absence of reactive episodes

Pacientes com hanseníase podem apresentar surtos reacionais (reação tipo I e reação tipo II). Métodos sorológicos são desenvolvidos visando obter marcadores laboratoriais que auxiliem o diagnóstico precoce destes episódios. Diante disto, o objetivo deste estudo foi avaliar níveis de anticorpos de pacientes com hanseníase no momento do diagnóstico, com ou sem reação, e associar os resultados obtidos com tais fenômenos. Para isto, foram obtidos dados clínicos de prontuários e amostras séricas de 224 pacientes, diagnosticados no período de 2009/2010, no município de Rondonópolis-MT. Foram realizadas quantificações de anticorpos IgM anti-PGL-1 do Mycobacterium leprae (M. leprae) pelo método de ELISA, e detecção semiquantitativa de IgG/IgM anti-NDO-LID-1 pelo teste rápido. Obtivemos baixos níveis sorológicos de anti-PGL-1 e anti-NDO-LID-1 para os pacientes tuberculóides (T) (1,56% - 15,62%) e dimorfos-tuberculóides (DT) (7,95% - 26,13%), níveis médios nos dimorfos-dimorfos (DD) (47,91% - 68,75%) e elevados nos virchovianos (V) (93,33% - 100%) e dimorfos-virchovianos (DV) (88,88% - 100%). Ao compararmos os grupos reacionais (RI e RII) com os sem reação (SR) no momento do diagnóstico, observamos uma diferença estatística significativa entre os grupos, sendo que os pacientes com RII apresentaram maior resposta sorológica para ambos testes (anti-PGL-1 66,66% e anti-NDO-LID-1 91,66%). Os pacientes que vieram a desenvolver reação após o diagnóstico inicial, também apresentaram significativa positividade aos dois testes em comparação com aqueles que permaneceram sem reação no período estudado (p<0,0001). Estes resultados permitem concluir que os testes sorológicos podem contribuir para um diagnóstico precoce de RII, sendo que o teste anti-NDO-LID-1 demonstrou ser melhor indicador.

Patients with leprosy may present reactional outbreaks which are classified as Type I or Reverse Reaction and Type II or Nodose Hansenic Erythema. Serological methods have been developed aiming to obtain data that subsidize clinical and laboratory markers for the early diagnosis of these episodes. Therefore, the objective of this study was to evaluate antibody levels of leprosy patients at the time of diagnosis, with or without reactional episodes and to associate the results obtained with such phenomena. For this, clinical data of medical records and serum samples of 224 patients, diagnosed in the 2009/2010 period, were obtained in the municipality of Rondonópolis-MT. Quantifications of anti-PGL-1 IgM antibodies of Mycobacterium leprae (M. leprae) were performed by the ELISA method, and semiquantitative detection of anti-NDO-LID-1 IgM/IgG by the rapid test. We obtained low serological levels of anti-PGL-1 and anti-NDO-LID-1 for tuberculoid (T) (1.56% - 15.62%) and borderline-tuberculoid (BT) patients (7.95% - 26,13%), medium levels in the borderline-borderline (BB) (47.91% - 68.75)% and high in lepromatous (L) (93.33% - 100%) and borderline-lepromatous BL) , 88,0% - 100%). In addition, when comparing the reactional groups (RI and RII) with the non-reactive (SR) groups at the time of diagnosis, we observed a statistically significant difference between the groups, and patients with RII presented higher serological response for both anti-PGL-1 and for anti-NDO-LID-1 (66.66% - 91.66%). About the patients who developed a reaction after the initial diagnosis, they also showed significant positivity for both anti-PGL-1 and anti-NDO-LID-1 in comparison to the patients who stayed non-reactives in the study period (p < 0.0001). These results allow us to conclude that serological tests may contribute to an early diagnosis of RII, and the anti-NDO-LID-1 test demonstrated to be a better indicator.

Aspecto clínico-epidemiológicos e imunológicos da hanseníase em área heperendêmica do estado do Maranhão / epidemiological and immunological aspect of leprosy in hyperendemic area of the state of Maranhão

A hanseníase ou mal de Hansen (MH), causada pelo patógeno Mycobacterium leprae, ainda constitui um problema de saúde pública no Brasil, e em especial no Maranhão. A doença é hiperendêmica em 77 municípios do Estado. A resposta imune ao patógeno de indivíduos dessas regiões permanece obscuro podendo contribuir na manutenção da hiperendemia. Por isso, este estudo teve por objetivo caracterizar o perfil clínico-epidemiológico e imunológico de pacientes infectados por M. leprae, e de seus contatos, procedentes de área hiperendêmica. Para o desenvolvimento deste trabalho foi realizado um estudo transversal foi realizado nos municípios de Açailândia, Imperatriz e São Luís, no período 2009 a 2012. Pacientes e contatos foram clinicamente avaliados e tiveram os dados epidemiológicos coletados. Uma amostra de sangue foi obtida para realização das sorologias para detecção de anticorpos IgM anti-PGL1 pelos testes de ELISA e ML-Flow, e dosagem de citocinas e quimiocinas. A análise descritiva demonstrou que a maioria dos pacientes eram adultos, do gênero masculino, diagnosticados principalmente com as formas intermediárias da doença (60%)...

Leprosy, caused by the pathogen Mycobacterium leprae, it is a public health problem in Brazil yet, especially in Maranhão. The disease is hyperendemic in 77 counties of the State. Immune response to the pathogen of individuals in these regions remains unclear and may be contributing to maintenance of high endemicity. Therefore, this study aimed to characterize epidemiological and immunological profile of patients infected with M. leprae, and their contacts, from hyperendemic regions. Cross-sectional study was accomplished in Açailândia, Imperatriz and São Luís counties, 2009-2012. Patients and contacts were clinically evaluated and had their epidemiological data collected. A blood sample was obtained for performing serological tests IgM anti-PGL1 detection by ELISA and ML-Flow and measurement of cytokines and chemokines. Descriptive analysis showed that most patients were adults, male, diagnosed with intermediate forms mainly (60%)...

Reactividad serológica y celular frente a proteínas micobacterianas en la enfermedad de Hansen / Serological and cellular reactivity to mycobacterial proteins in Hansen´s disease

Se diseñó un estudio para evaluar la reactividad inmunológica frente a diferentes preparaciones proteicas micobacterianas utilizando pruebas serológicas y de inmunidad celular. Para el estudio fueron incluídos pacientes con manifestaciones clínicas de lepra predominantemente de la forma multibacilar. Todos los pacientes fueron adultos con edad comprendida entre 20 y 39 años. El 58 por ciento correspondía a la forma clínica de Lepra Lepromatosa (LL) n= 81, el 29 por ciento a la forma Borderline Lepromatosa (BL) n=41 y 10 por ciento a Borderline Borderline (BB) n=14. Solo el 3 por ciento fueron pacientes Borderline Tuberculoide (BT): 74 por ciento masculino y 26 por ciento femenino. El fenómeno reaccional más frecuente fue del tipo eritema nodoso leproso (ENL). Las proteínas micobacterianas ensayadas fueron: antígenos proteicos crudos totales de Mycobacterium leprae (MlSA), Mycobacterium bovis (MbSA y MbSA de excreción), antígeno proteico de excreción parcialmente purificado con una movilidad relativa de 30 kDa (Ml 30) y proteínas recombinantes de Mycobacterium (Mt70, Mb 65, Ml 36, 28, 18 y 10 kDa) encontrandose que las proteínas recombinantes (Ml10 kDa, Ml 36 kDa) a mayor carga bacilar presentaban una mayor reactividad serológica estadísticamente significativa (p= 0,0051 y 0,050 respectivamente). La proteína de 30 kDa fue predominantemente reconocida por anticuerpos de los pacientes multibacilares. Los resultados demuestran que el promedio de los valores de anticuerpos en pacientes no reaccionales fueron superiores en presencia de proteínas completas (MbSA y MbSA de exc) en comparación con el grupo de pacientes que presentaron fenómenos reaccionales (p=0,000567 y 0,000061 respectivamente) Este mismo comportamiento se observó frente a las proteínas micobacterianas individuales (30 kDa, 10 kDa y 36 kDa). La respuesta proliferativa de los linfocitos T en los pacientes multibacilares reaccionales y no reaccionales frente a las proteínas micobacterianas...

The study was designed for evaluating immunological reactivity to various mycobacterial protein preparations using serological and cell-mediated immunological tests in patients with clinical leprosy signs, predominantly, with the multibacillary forms. All patients were adults with ages between 20 and 30 years. Fifty eight (n= 81) percent corresponded to Lepromatous Leprosy (LL), 29 percent (n= 41) to Borderline Lepromatous Leprosy (BL) and 10 percent (n=41) to Borderline Borderline Leprosy (BB); only 3 percent were Borderline Tuberculoid (BT) patients: 74 percent males and 26 percent females. The most frequent reactional phenomenon was of the Erythema Nodosum (ENL) type. The mycobacterial proteins tested were: total crude Mycobacterium leprae antigens (MISA); Mycobacterium bovis (MbSA and excretion MbSA); partially purified excretion protein antigen, with a 30kDa relative movility (Ml30); and recombinant M. leprae proteins (Mt70, Mb 65, Ml 36, 28, 18 and 10 kDa). Two of the recombinant proteins (Ml10 and Ml 36 kDa) presented a statiscally significant higher serological reactivity, directly related with a larger bacillary load (p= 0.0051 and 0.050 respectively). The 30 kDa protein was predominantly recognized by antibodies from multibacillary patients. Results show that mean antibody values were higher in non reactional patients when tested against complete proteins (MbSA and ex MbSA) when compared with the group of patients who presented reactional phenomena (p= 0.000567 and 0.000061, respectively). Comparing reactional with non reactional patients, it was seen that mean antibody values against complete proteins (MbSA and ex MbSA) were higher in non reactional individuals (p= 0.000567 and 0.000061, respectively). This same behavior occurred towards individual mycobacterial proteins (30, 10 and 36 kDa). The T lymphocyte prolypherative response in reactional and non reactional patients towards mycobacterial proteins (MlSA, Ml 10 kDa, MbSA...

Comparación de la técnica serológica ML flow y frotis cutáneas para evaluar la carga bacteriana en pacientes nuevos diagnosticados de Lepra / No disponible

Introducción: La técnica ML Flow es un ensayo inmunocromatográfico que detecta anticuerpos de tipo IgM glicolípido fenólico-I (PGL-1) M. leprae específico. Además de los frotis cutáneos teñidos mediante Ziehl-Neelsen puede ser útil en la clasificación de los pacientes de lepra para administrar el correspondiente tratamiento farmacológico. Objetivo: Este estudio revisa la relación entre los niveles de anticuerpos detectables mediante la técnica serológica semi-cuantitativa ML Flow y la carga bacteriana cuantificada mediante frotis cutáneo. Pacientes y métodos: Se obtuvieron frotis cutáneos de 135 pacientes nuevos diagnosticados de lepra en un servicio dermatológico de referencia en Brasil (registrados como índice bacteriológico – IB) y un resultado con el ML Flow (registrado cuantitativa y semi-cuantitativamente) en el momento de ser admitidos al estudio. Se calcularon la regresión logística y concordancia (índice kappa). Resultados: Los frotis cutáneos resultaron positivos en el 35.9% de los pacientes y el 57% de los pacientes eran seropositivos para el PGL-1. De entre los seropositivos, el 41.6% presentaban 5 o menos de 5 lesiones y el 65.8% presentaba la implicación de más de un nervio periférico. Los frotis resultaron positivos en sólo tres casos seronegativos (5.6%) y negativos en el 41.9% de pacientes seropositivos. Los pacientes con un IB+4 presentaban un OR de 3.3 de ser seropositivos en comparación con los de IB más bajo. Conclusiones: Hay una correlación entre el test serológico y los frotis cutáneos. Por tanto, un test ML Flow puede resultar útil para la clasificación clínica de la lepra, además de los frotis cutáneos que requieren una infraestructura de laboratorio y personal con experiencia (AU)

Introduction. The ML Flow test is an immunochromatographic assay that detects IgM antibodies against M. leprae-specific anti-phenolic glycolipid I (PGL-I). In addition to slit skin smears stained by the Ziehl-Neelsen technique, it can be helpful in the operational classification of leprosy patients for treatment purposes. Objective. This work studied the relationship between antibody levels as detected by semi-quantitative ML Flow serologic test and bacterial load as quantified by slit skin smear. Patients and methods. 135 patients with newly detected leprosy at the reference service in Sanitary Dermatology in Brazil had slit skin smears (registered as bacillary index – BI) and an ML Flow test (registered qualitatively and semi-quantitatively) performed at admission. A logistic regression and agreement measures (kappa index) were calculated. Results. Slit skin smears were positive in 35.9% of patients and 57% of patients were seropositive for PGL-1 antibodies. Among the seropositive patients, 41.6% had five or fewer skin lesions, and 65.8% had more than one peripheral nerve involved. Slit skin smears were positive in only three seronegative patients (5.6%), and negative in 41.9% of seropositive patients. Patients with a BI of 4had an OR of 3.3 for being seropositive in comparison to those with a low BI. Conclusions. There is a correlation between serologic test and slit skin smear results. Therefore, an ML Flow test may become a useful tool in the clinical classification of leprosy, besides slit skin smears, which require a proper laboratory infrastructure and experienced personnel (AU)

Servicio de baciloscopía de la Lepra en Cuba. Organización y función la red de laboratorios / No disponible

No disponible

No disponible

Comportamiento clínico serológico microbilógico de la incidencia de lepra Camagüey Cuba. 2001-2004 / No disponible

No disponible

Comportamiento del estudio serológico de Lepra. Provincia Camagüey. Año 1999-2003 / No disponible

Teniendo en cuenta lo expresado en la Declaración de Caracas, durante el desarrollo de la Tercera Conferencia Regional de la OPS/OMS sobre la Eliminación de la Lepra de las Américas, en la que se planteó como una necesidad el “disponer de nuevas tecnologías apropiadas que permiten lograr un diagnóstico más temprano a fin de incluir sobre la transmisión hasta lograr la interrupción de la misma”, se decidió poner en práctica esta experiencia de pesquisaje serológico en la Provincia de Camagüey; provincia que mantenía un endemia leprosa por encima del nivel de de eliminación como problema de salud con el objetivo de determinar el comportamiento clínico epidemiológico de la infestación por el Mycobacterium lepraen la Provincia de Camagüey durante los años 1999-2003. Se divide la intervención en tres etapas; en los años 1999-2000 se realiza el estudio de forma general en toda la provincia y de acuerdo a los resultados se decide hacer en los años 2001-2002 sólo a las personas residente en los municipios con prevalencia superior a 1 X 10.000, que residen en la cuadra y manzana donde se notificó un caso nuevo de Hansen. Con estos resultados se decide realizar la serología en el 2003 como norma a todas las personas que tienen relación con un caso nuevo de lepra y además seguir los positivos de serología por 5 años. Se realiza serología a 21.379 personas de población expuesta; de estas 768 personas con serologías positivas de Hansen (por encima del nivel de corte: valores > 0,300) a las que se les realiza baciloscopia, negativa o débil respuesta inmunológica (lepromina por debajo de 5 mm), o al repetir la serología a los 6 meses aumenta el titulo, sin lesiones cutáneas, no toma neural: tratamiento profiláctico con dapsona y rifampicina por 6 meses y seguimiento serológico cada seis meses por año. Si baciloscopia y lepromina, positivas o negativas, con lesiones cutáneas compatibles: casos nuevos de lepra complementando el estudio con biopsia de piel. De las 768 personas fueron tratadas 87 y resultaron enfermos 12. Conclusiones: Se detectó una baja positividad en el estudio serológico efectuado a población de riesgo, siendo los municipios con mayor riesgo de transmisión de la enfermedad: Camagüey y Sierra de Cubitas y Santa Cruz del Sur. Predominó el grupo de edad entre 25 y 34 años, el sexo femenino y la raza blanca, la mayoría de los estudiados poseen nivel de escolaridad medio y se encuentran vinculados laboralmente. Prevaleció la población de riesgo y la fuente de infección ignorada. No se encontraron lesiones cutáneas en la mayor parte de individuos estudiados. En la mayoría de las personas con serologías por encima del nivel de corte se les realizó Mitsuda, se encontró elevada positividad en el test de lepromina y resultados negativos en la baciloscopia, lo que comprueba la baja inefectividad, no obstante se detectaron personas enfermas por el estudio serológico. La mitad de las personas que recibieron tratamiento negativizaron la serología 6 meses después de la intervención. Se trataron 87 personas como PB por 6 meses. Resultaron enfermos 12 personas

No disponible

Serología de la lepra

Se exponen los diferentes tests serológicos en la lepra, desde la antigua reacción de Rubino hasta los recientes del FLA-ABS, RIA, PHA, ELISA, GLP-1, MLPA, SACT y PCR. Se comparan los resultados de ellos que son positivos práticamente en el 100 por ciento de multibacilares, y sólo en un 50 por ciento de los paucibacilares, aunque el FLA-ABS da más positividad, siendo su mayor indicación en la detección de las formas subclínicas. En este aspecto y en el de predecir la aparición de la enfermedad no parecen ser extremamente útiles. Se considera que el PCR, el último test en estudio, podría ser la solución para la detección precoz de la enfermedad.

Clinical and serological profiles in leprosy / ?

Numerous clinical and serological similarities exist between lepromatous and dimorphous leprosy and diseases od collagen, particularly lupus erythematosus and rheumatoid arthritis. The clinical manifestations include spontaneous skin-ulcerations, ischaemic necrosis, petechial and purpuric eruptions, vesicle and bulla formation, subcutaneous nodules, hepatosplenomegaly, migratory arthralgia and polyarthritis, bizarre skin lesions including butterfly facial rashes, and a general tendency toward exacerbations and remissions. Haematological findings include anaemia and the ocasional appearance of lupus cells.Positive serological findings include rheumatoid factors, circulating thyroglobulin antibodies, false positive serological tests for syphilis, and cold precipitable proteins (a consistent finding). Because of these similarities, the authors believe that leprosy is a disease which should be considered as a model for the study of hyperglobulinaemic states, especially the diseases of collagen. An important consideration is that, unlike these other diseases, the agent causing leprosy is known

Studies on the serology of leprosy the complement-fixation reaction by a modified antigen. The Handai methos (Honda)

From the point of departure indicated in the introduction of this report, further studies have been carried out on cardiolipin, cholesterol and cephalin in an effort to obtain an antigen composition with high sensitivity with sera of various types of leprosy but low sensitivity with other sera. Ordinary crude cephalin was fractioned by Folch's method into phosphatidyl-ethanolamine, diphospho-inositide, and phosphatidyl-serine, and these were combined in various ratios. In order to obtain the optimal mixture-ratio of cardiolipin, cholesterol and cephalin, two were kept constatnt and the other changed serially in quantity. The optimal ratio of the three cephalin fractions (in the other stated above) for high sensitivity with pooled sera from lepromatous cases was found to be 29:10:1. The process was repeated with this cephalin mixture and varying quantities of cholesterol and cardiolipin. The least reactive amounts of these various substances were selected as optimal amounts, as prevention of the development of nonspecific reactions was desired. The optimal combination proved to be 0.2 cc. of o.2 per cent cardiolipin 0.2 cc. of 1 per cent cholesterol, and 0.4 cc. of 1 per cent cephalin fractions (0.29 cc. of phosphatidyl-ethenolamine, 0.1 cc. of diphosphoinositide, and 0.01 cc. of phosphatidyl-serine), plus 0.2 cc. of absolute alcohol. The cardiolipin: cholesterol: cephalin ratio of this antigen is 1:5:10...

Sôrologia da lepra

Numerosas reacções têm sôrologistas posto á disposição dos clinicos com o objectivo de elucidar ou de confirmar o diagnostico de lepra....